PCR Array FAQ:

1. 任何一臺能夠做QPCR的儀器據(jù)能夠做PCRarray嗎？
2. QPCR 儀器都可以進(jìn)行QPCR array的實驗。
3. 根據(jù)儀器采用的96孔或者384孔板，分為以下5種板型（plate format）：

BioTNT PCR array的適用在哪里？

回答：適用現(xiàn)有的通路研究；

適用少樣本或中等樣本，多基因的QPCR 檢測；

在低樣本或中等樣本的情況下，費用和時間遠(yuǎn)小于自行建立QPCR實驗；

使用方便，操作簡單，結(jié)果穩(wěn)定性好；

BioTNT PCR array的優(yōu)點是什么？

 Ct值的平均差異只有0.25個循環(huán)；

數(shù)據(jù)分析方便：專用軟件方便數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

從QPCR 得到實驗數(shù)據(jù)后，如何進(jìn)行后續(xù)的結(jié)果分析？需要配套的儀器設(shè)備嗎？

回答： 您可以用這個鏈接，http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx

點擊分析工具，然后再點擊：分析軟件下載下載后進(jìn)行分析。不需要特殊的分析儀器。

BioTNT 的PCR array，如果自己使用，需要購買哪些配套產(chǎn)品？

http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx

PCR array 產(chǎn)品之外，您應(yīng)購買以下產(chǎn)品，對PCR array進(jìn)行配套使用：

PCR array cDNA第一鏈合成試劑盒 A2010B0B03  
Real time 染料PCR PreMIX A2010A0112
建議使用高品質(zhì)的抽提試劑盒，推薦型號為：

RNase-Free DNase Set (50)，79254 

如果使用其他公司的抽提試劑盒，如Trizol 法抽提試劑盒，能否使用BioTNT的PCR array 產(chǎn)品？

DNA 去除；使用PCR array 產(chǎn)品前，先進(jìn)行樣本質(zhì)量的驗證。能夠通過樣本質(zhì)量驗證的樣本，可以進(jìn)行PCR array實驗。

如何進(jìn)行PCR array 實驗前的樣本質(zhì)量驗證？

PCR array實驗的質(zhì)量，建議在使用前先進(jìn)行樣本質(zhì)量驗證；

定量與質(zhì)量控制

使用無菌水(RNase-free)稀釋 RNA 樣本，檢測 260  nm 和 280  nm 吸光值，A260/280 應(yīng)大于 1.8。

使用公式A260× 40 ×稀釋倍數(shù)  = XXXXμg/mL 計算 RNA 濃度。

使用瓊脂糖凝膠電泳檢測 RNA 完整性。

建議：RNA 質(zhì)量測定后，逆轉(zhuǎn)錄得到CDNA，建議用多個內(nèi)參基因自行驗證CDNA 質(zhì)量；

biotnt 的樣本質(zhì)量驗證引物套裝，可以在進(jìn)行QPCR 之前對樣本進(jìn)行驗證(包含內(nèi)參引物，如human beta actin， GAPDH,  18sRNA等)

基因組DNA污染控制

Array板塊上的GDC(Genomic  DNA  Control)反應(yīng)孔專為檢測每個樣品進(jìn)行qPCR反應(yīng)時可能存在的基因組DNA污染而設(shè)置。如果該反應(yīng)孔的CT值小于35，則表明存在可檢測到的基因組DNA污染，應(yīng)采取措施予以解決。因此，必須從RNA樣品中去除基因組和其他全部殘余污染物。建議采用Qiagen 柱式抽提過程中加入DNAse去除基因組污染。

PCR array 之前購買BioTNT 樣本質(zhì)量驗證引物套裝或者單獨的GDC 引物進(jìn)行基因組DNA 污染控制的質(zhì)量驗證；驗證結(jié)果CT 值如果小于35，則表明存在可檢測到的基因組DNA污染，應(yīng)采取措施予以解決。

如何進(jìn)行樣本的調(diào)平？

PCR array之前，對樣本需要進(jìn)行調(diào)平。具體調(diào)平方式為：  

RNA 含量調(diào)平：實驗樣本的RNA 盡量調(diào)到同一水平；加入RNA 酶free的水，調(diào)整RNA 濃度；

調(diào)平后的樣本：通過內(nèi)參引物進(jìn)行驗證，根據(jù)CT 值，進(jìn)行二次調(diào)平。

BioTNT PCR array定制費用如何？

BioTNT PCR array 提供您的定制，僅比預(yù)制產(chǎn)品增加了400元/板的定制費用。您可以把您要檢測的指標(biāo)給我們，然后把您的儀器型號，以及sample 數(shù)量，重復(fù)數(shù)量提供給我們，我們?yōu)槟�設(shè)置相應(yīng)的PCR array 形式，并核算相應(yīng)的費用給您。

BioTNT PCR array的定制，方式靈活，1 plate起訂。

http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx，點擊定制服務(wù)。

如果我沒有QPCR 儀器，BioTNT 能夠提供什么服務(wù)？

BioTNT PCR array service。

 http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx，點擊service。