Fibronectin在細(xì)胞培養(yǎng)中的功能
01 促進(jìn)細(xì)胞黏附與鋪展
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞需要附著在培養(yǎng)皿或支架材料上才能正常生長(zhǎng)和分裂。Fibronectin作為細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分之一,通過其Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)序列與細(xì)胞表面的整合素受體結(jié)合,促進(jìn)細(xì)胞的黏附和鋪展。這種黏附作用不僅有助于細(xì)胞在培養(yǎng)環(huán)境中的穩(wěn)定生長(zhǎng),還能提高細(xì)胞的增殖效率。
在細(xì)胞培養(yǎng)初期,為了促進(jìn)細(xì)胞的快速黏附和鋪展,研究人員常常在培養(yǎng)皿或支架材料上涂布一層Fibronectin。這種處理可以顯著提高細(xì)胞的附著效率和鋪展面積,為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作提供便利。例如,在培養(yǎng)BHK、CHO等細(xì)胞系時(shí),以1-5 ug/cm²的量包被Fibronectin可以觀察到更顯著的細(xì)胞黏附和鋪展效果。
圖1.纖維連接蛋白(FN)纖維狀基質(zhì)環(huán)繞著培養(yǎng)中的細(xì)胞。按照Brenner等人(2000)的方法,將HT1080細(xì)胞在含有0.1μM地塞米松和25μg/ml鼠血漿FN的培養(yǎng)基中培養(yǎng)20小時(shí)。然后將細(xì)胞固定并用抗FN單克隆抗體(IC3)染色,再用熒光標(biāo)記的山羊抗小鼠免疫球蛋白G染色。圖中顯示了圍繞著用4',6-二甲基-2-苯基吲哚(DAPI)染色的細(xì)胞核(藍(lán)色)的FN纖維(綠色)。
02 調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)與分化
Fibronectin不僅能夠促進(jìn)細(xì)胞的黏附和鋪展,還能通過激活特定的信號(hào)通路來調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。例如,F(xiàn)ibronectin與整合素受體的結(jié)合可以激活FAK、AKT、YAP等信號(hào)通路,這些信號(hào)通路在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化以及維持細(xì)胞生物學(xué)特性方面發(fā)揮重要作用。因此,在干細(xì)胞培養(yǎng)、組織工程等領(lǐng)域,F(xiàn)ibronectin被廣泛應(yīng)用于促進(jìn)細(xì)胞的定向分化和功能實(shí)現(xiàn)。
在干細(xì)胞培養(yǎng)和組織工程領(lǐng)域,F(xiàn)ibronectin的應(yīng)用尤為廣泛。由于干細(xì)胞具有自我更新和多向分化的潛能,因此需要在特定的培養(yǎng)條件下才能維持其生物學(xué)特性和功能。Fibronectin作為細(xì)胞外基質(zhì)的重要成分之一,可以通過激活特定的信號(hào)通路來引導(dǎo)干細(xì)胞的定向分化和功能實(shí)現(xiàn)。例如,在心臟分化過程中,F(xiàn)ibronectin被證明對(duì)人多能干細(xì)胞(hPSC)的心臟分化至關(guān)重要。此外,F(xiàn)ibronectin還可以與其他ECM蛋白質(zhì)協(xié)同作用,共同構(gòu)建復(fù)雜的組織工程支架材料,為細(xì)胞提供更為全面的支持和保護(hù)。
03 改善細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)如Fibronectin的添加可以模擬體內(nèi)微環(huán)境,為細(xì)胞提供更為接近生理?xiàng)l件的生長(zhǎng)環(huán)境。這種環(huán)境有助于細(xì)胞保持其原有的生物學(xué)特性和功能,從而提高細(xì)胞培養(yǎng)的成功率和質(zhì)量。此外,F(xiàn)ibronectin還可以與其他ECM蛋白質(zhì)如層粘連蛋白(Laminin)等協(xié)同作用,共同構(gòu)建復(fù)雜的細(xì)胞外基質(zhì)網(wǎng)絡(luò),為細(xì)胞提供更為全面的支持和保護(hù)。
在藥物研發(fā)和毒性評(píng)估過程中,細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)重要的實(shí)驗(yàn)手段。Fibronectin作為細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分之一,可以模擬體內(nèi)微環(huán)境并影響細(xì)胞的生物學(xué)行為。因此,在藥物篩選和毒性評(píng)估過程中加入Fibronectin可以更加準(zhǔn)確地反映藥物對(duì)細(xì)胞的影響和毒性作用。這種方法的應(yīng)用有助于提高藥物研發(fā)的效率和安全性。
展望
Fibronectin蛋白在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。它不僅能夠促進(jìn)細(xì)胞的黏附和鋪展、調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)與分化,還能改善細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境并提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。隨著對(duì)Fibronectin研究的不斷深入和技術(shù)的不斷發(fā)展,相信其在細(xì)胞培養(yǎng)、干細(xì)胞培養(yǎng)、組織工程以及藥物研發(fā)等領(lǐng)域的應(yīng)用將會(huì)更加廣泛和深入。
斯達(dá)特生物提供高活性Fibronectin基質(zhì)蛋白滿足不同細(xì)胞培養(yǎng)需求!
產(chǎn)品名稱 Fibronectin-CH296 Protein, Human 貨號(hào) UA040264
Measured by the ability of the immobilized protein to support the adhesion of NIH-3T3 mouse embryonic fibroblast cells. The EC50 for this effect is less than 120ng/ml.
>95% by SDS-PAGE& HPLC
杭州斯達(dá)特(www.starter-bio.com)志在為全球生命科學(xué)行業(yè)提供優(yōu)質(zhì)的抗體、蛋白、試劑盒等產(chǎn)品及研發(fā)服務(wù)。依托多個(gè)開發(fā)平臺(tái):重組兔單抗、重組鼠單抗、快速鼠單抗,重組蛋白開發(fā)平臺(tái)(E.coli,CHO,HEK293,Insect Cells),已正式通過歐盟98/79/EC認(rèn)證、ISO9001認(rèn)證ISO13485。