DNA提取磁珠特性的全面講解
瀏覽次數:2245 發布日期:2019-12-17
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具有醫療器械憑證的DNA提取磁珠
吉恩特生物的DNA提取磁珠是國內首批具有醫療器械生產備案憑證的DNA提取磁珠(備案號:豫洛食藥監械生產備20180004號),是洛陽吉恩特生物科技有限公司自主研發生產的高分子磁性微球,主要用于磁珠法核酸提取過程中DNA、RNA的吸附與釋放。吉恩特生物通過嚴格的生產工藝,完善的質檢工藝,成為各大測序公司、體外診斷公司、基因檢測公司的長期供應商,為廣大用戶提供穩定可靠的高質量生物磁珠及磁珠法試劑盒。
一、懸浮時間
懸浮時間的長短對加樣均一性有較大影響,懸浮時間越長的DNA提取磁珠,加樣均一性越好。GNT系列的磁珠緩沖液,懸浮時間能穩定在5-10min或30-40min。(測試方法:1ml磁珠溶液,沉降至500ul所用的時間)
二、磁吸時間
磁吸時間對實驗操作效率有較大影響,磁吸越快的磁珠,操作體驗越好,效率越高。磁吸時間在20-30s以內,有些可以達到瞬間磁吸的效果。(測試方法:將10ul磁珠溶液置于1ml純水中,完全磁吸的時間)
三、吸附效率
吸附效率是用戶關心的參數,任何核酸提取實驗,得率越高越好,吉恩特生物通過不斷的優化與驗證,將DNA提取磁珠的吸附效率做到穩定。誠然,在磁珠法核酸提取的過程中,磁珠需要搭配若干種試劑共同完成提取工作,這其中會有較多的不穩定因素,影響磁珠真實的吸附效率。因此,我們建議用回收效率來反應DNA提取磁珠真實的吸附效率。在這套體系中,有固定濃度的樣本,固定濃度的結合液,變量就是不同批次的磁珠,用這套體系得出的磁珠吸附效率,更加客觀,參考價值也更高。
▲使用不同批次的磁珠,對已知濃度的DNA進行回收,回收效率一致(80%左右),
證明磁珠的批次穩定性良好
四、磁珠熱穩定性
DNA提取磁珠熱穩定性是經常被使用者忽略的參數之一,這里的熱穩定性是指將磁珠置于洗脫液并加熱一段時間,磁吸完全后,對上清液進行紫外分光光度計的分析。此時,熱穩定性較差的磁珠,會在260nm處有吸光值,若是有這樣的情況出現,理論上來講,這樣的磁珠是完全不能使用的,因為大部分的核酸提取實驗,都需要加熱步驟,而由于加熱引起的磁珠本身的數據波動,會使實驗結果很不穩定,對使用者造成困擾。通常情況下,如若某些實驗數據高的離譜,就要考慮磁珠本身的熱穩定性是否存在影響。
▲將20ul磁珠置于50ul洗脫液中,70℃水浴30min后,進行上清濃度檢測,檢測結果良好
五、磁珠重懸性
磁珠重懸性也經常被使用者忽略,重懸性是指DNA提取磁珠自然沉降后,再次回到懸浮狀態的難易程度。有些磁珠自然沉降后,容易結塊,且結塊較難被打散,使用過程中容易造成加樣的不均一,盡管這種現象可以通過渦旋震蕩進行改善,但重懸性差較差的磁珠,增加了使用者的操作難度,所以選擇一款重懸性好的磁珠,才是解決該問題的根本辦法。
▲磁珠重懸性
六、磁珠儲存條件和保質期
儲存條件和保質期也是用戶經常關心的問題,由于儲存不當或產品存放時間過長引起的問題,也令人頭疼,較難追溯。GNT系列的磁珠通過嚴格的驗證,可實現全年室溫保存(洛陽地區全年室溫在2-32℃之間),且理化性質均保持穩定。
▲將磁珠置于室溫(2-32℃,無需控溫)保存不同時間,回收效率不變(80%左右)
七、磁珠滅菌后的驗證
磁珠能否進行滅菌,也是客戶經常提起的問題。我們對吉恩特生物的DNA提取磁珠,進行121℃滅菌30min的處理,并作相關驗證實驗,結果顯示除了磁珠濃度會略微增加外(水分蒸發),吸附效率、純度、懸浮時間等參數并未發生變化,保持穩定。
▲對比磁珠滅菌前后的相關實驗數據,除濃度略微增加外,其余參數均能保持穩定性
八、磁珠用于核酸提取的驗證
說了這么多,使用DNA提取磁珠的終目的是要搭配試劑進行高質量的核酸提取,GNT系列的磁珠配合相關試劑,可以實現各類樣本的核酸提取。(PS:GNT-B02血液基因組DNA提取試劑盒現免費試用,全程常溫操作,無需任何加熱步驟,而且再也不用擔心A260/A230比值偏低啦)
▲使用不同批次的磁珠,對200ul血液樣本進行基因組DNA提取,得率和純度均在標準范圍內