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如何選擇合適的線粒體內參抗體?

瀏覽次數:5165 發布日期:2016-12-12  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

為什么選擇推薦Abbkine品牌的COX IV作為線粒體內參抗體?

我們知道,在Western Blotting中使用內參其實就是在WB過程中的另外用內參對應的抗體檢測內參蛋白,這樣在檢測目的產物的同時可以檢測內參的表達,由于內參在各組織和細胞中的表達相對恒定,借助檢測每個樣品內參的量就可以用于校正上樣誤差,這樣半定量的結果才更為可信。此外使用內參可以作為空白對照,檢測蛋白轉膜情況是否完全、整個Western Blot顯色或者發光體系是否正常。

細胞色素c氧化酶(Cytochrome c oxidase,簡稱COX)是一種異源寡聚酶,通常含有13個亞基,定位于線粒體內膜,是線粒體呼吸鏈的酶復合物。細胞色素c氧化酶中形成催化中心的3個最大的亞基由線粒體DNA編碼,其余10個亞基包括COX IV由細胞核內的基因組DNA編碼。細胞色素c氧化酶(COX)活性缺陷和人類多種疾病相關。COX IV抗體可用作線粒體蛋白上樣量的內參抗體,其檢測目標蛋白大小為16kD左右。

常用的細胞總蛋白質內參有GAPDH和細胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。對于一些植物的樣本,則需要特別的植物Actin蛋白作為內參。當實驗樣品中只是核蛋白,而不是細胞總蛋白提取液時,可以用組蛋白H(Histone H),或者增殖細胞核抗原(PCNA)等為核內參抗體。而在一些特別的針對線粒體作為微環境的研究課題時,需要提取線粒體總蛋白并檢測其中的目標蛋白含量,這時候常規的細胞總蛋白內參就不是很合適,我們推薦使用線粒體總蛋白的內參抗體,對于線粒體蛋白的檢測,常用COX IV或VDAC1作為內參抗體,這里面COX IV又是被引用最多的線粒體內參。COX IV的檢測分子量大約在16kD左右,比較適合用于檢測目標蛋白在較大的WB實驗。

我們課題組是做凋亡和線粒體方面研究的,經常研究線粒體方面的通道蛋白,一直使用Abbkine的COX IV抗體來做WB,效價挺高的。——武漢大學生科院一客戶

產品名稱及描述 品牌 貨號 產品說明
Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2) Abbkine A01060 詳情

 

小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性以及效價都要優于多克隆抗體。 另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl COX IV抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:4000,最終使用液相當于400ml),要比效價低的1ml的COX IV抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,最終使用液相當于200ml)性價比更高。因此在選擇抗體的時候,不但需要考慮抗體的量,還需要考慮抗體的效價,即不同應用的建議稀釋比率。

童靴們知道在做wb時,要用Western Blot比較不同條件下或者不同組織中,目的蛋白表達量的相對多少,前提條件是等量的細胞上樣,才有比較的基礎。特別表達量不高時,上樣量的差別就很可能影響結果的分析。所以你需要內參。

供應COX IV抗體的進口品牌有很多,像Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling(CST)、Millipore等都有相關COX IV抗體提供。但是由于不是專門的標簽和內參抗體供應商,因此在性價比上不是最優的選擇, 以Abcam為例,其一支100μl COX IV抗體的RMB報價為¥4418;CST的一支100μl COX IV抗體的報價是¥2997。

Abcam COX IV抗體   Santa Cruz COX IV抗體   Millipore COX IV抗體   CST COX IV抗體

另外,一些國內的供貨商也能提供分裝的COX IV抗體,但是在品牌和質量保障上都有不足。國產分裝的COX IV抗體在質量穩定性上有不足,并且經過分裝以后,其效價也有損失。而原產于國內實驗室的GAPDH抗體有些具有較好的檢測活性,但是在應用類型上有差距,并且在批次之間的穩定性上較難控制,而國內僅有的少量原產抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價比更高,同時也是原裝進口品牌的COX IV線粒體內參抗體,那 Abbkine可能會是您的一個重要考慮選項之一。我們向您推薦Abbkine的COX IV單克隆內參抗體Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2)(貨 號A01060)。

產品名稱及描述 品牌 貨號 產品說明
Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2) Abbkine A01060 詳情

 

該COX IV抗體為單克隆抗體,克隆號為14Y2。其抗原為KLH偶聯的兼具種屬通用型和蛋白特異性的COX IV蛋白部分序列。Abbkine的COX IV單克隆抗體(貨號#A02060)產品,其價格比Abcam低65%,只有CST的一半價格。可高效的應用于Western Bloting實驗,作為線粒體總蛋白的內參定量。

Abbkine還提供1ml大包裝以及更大定制規格的COX IV線粒體內參抗體,非常適合經常進行線粒體領域免疫學檢測的實驗需求。為方便客戶的使用, 上述產品,Abbkine均在中國備有現貨。Abbkine針對中國市場,提供全球化的產品質量追蹤和售后服務以及保障,如果您在使用過程中有任何問題, 請直接與其當地代理商艾美捷科技有限公司聯系。一個高效價的抗體不僅影響實驗結果的靈敏度,還意味著更高的性價比。Abbkine的COX IV線粒體內參抗體在常規的WB實驗里,推薦的起始稀釋比率為1:1000,實際在Abbkine的應用中,還有1:5,000甚至更高的稀釋比率,需要根據客戶具體的實驗條件進行進行優化。

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Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2) Abbkine A01060 詳情

 

美國Abbkine品牌是一家提供高性價比免疫學和細胞學科研產品及解決方案的品牌,艾美捷將其引入中國,作為其中國線粒體內參抗體—克隆號為14Y2的COX IV單克隆抗體區域代理,將為客戶提供最具性 價比的常規免疫學試劑,如各種標簽抗體、內參抗體、常規一抗以及全系列二抗,抗體檢測底物以及相關試劑盒等。同時我們作為多家國際知名品牌的的中國代理或 區域代理,艾美捷能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產品感興趣,請致電免費客戶專線400-6800-868到艾美捷科技有限公司垂詢相關的產品信息及完整實驗解決方案。

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