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PCR Array 常見問題解答

瀏覽次數(shù):3414 發(fā)布日期:2015-11-18  來源:BioTNT

PCR Array FAQ:

  1. 任何一臺(tái)能夠做QPCR的儀器據(jù)能夠做PCRarray嗎?
  2. QPCR 儀器都可以進(jìn)行QPCR array的實(shí)驗(yàn)。
  3. 根據(jù)儀器采用的96孔或者384孔板,分為以下5種板型(plate format):

plate format

Instrument provider

QPCR instrument model

A(384well)

lifetechnologies

7900,ViiA7(384 well block)

B(96 well)

lifetechnologies

7300,7500,7700,7900(standard 96well),ViiA7(standard 96well)

C(96 well)

lifetechnologies

7500(fast block),7900HT(fast block),stepone plus,ViiA 7(Fast block)

D(96 well)

Biorad

iCycler,MyiQ, iQ5

E(96 well)

Biorad

CFX96,DNA Engine opticon,opticon 2,Chromo4

 

BioTNT PCR array的適用在哪里?

回答:適用現(xiàn)有的通路研究;

適用少樣本或中等樣本,多基因的QPCR 檢測(cè);

在低樣本或中等樣本的情況下,費(fèi)用和時(shí)間遠(yuǎn)小于自行建立QPCR實(shí)驗(yàn);

使用方便,操作簡(jiǎn)單,結(jié)果穩(wěn)定性好;

 

BioTNT PCR array的優(yōu)點(diǎn)是什么?

 Ct值的平均差異只有0.25個(gè)循環(huán);

數(shù)據(jù)分析方便:專用軟件方便數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

 

QPCR 得到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)后,如何進(jìn)行后續(xù)的結(jié)果分析?需要配套的儀器設(shè)備嗎?

回答: 您可以用這個(gè)鏈接,http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx

點(diǎn)擊分析工具,然后再點(diǎn)擊:分析軟件下載下載后進(jìn)行分析。不需要特殊的分析儀器。

 

BioTNT PCR array,如果自己使用,需要購(gòu)買哪些配套產(chǎn)品?

http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx

PCR array 產(chǎn)品之外,您應(yīng)購(gòu)買以下產(chǎn)品,對(duì)PCR array進(jìn)行配套使用:

PCR array cDNA第一鏈合成試劑盒 A2010B0B03  
Real time 染料PCR PreMIX A2010A0112
建議使用高品質(zhì)的抽提試劑盒,推薦型號(hào)為:


RNase-Free DNase Set (50),79254 

如果使用其他公司的抽提試劑盒,如Trizol 法抽提試劑盒,能否使用BioTNTPCR array 產(chǎn)品?

DNA 去除;使用PCR array 產(chǎn)品前,先進(jìn)行樣本質(zhì)量的驗(yàn)證。能夠通過樣本質(zhì)量驗(yàn)證的樣本,可以進(jìn)行PCR array實(shí)驗(yàn)。

如何進(jìn)行PCR array 實(shí)驗(yàn)前的樣本質(zhì)量驗(yàn)證?

PCR array實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量,建議在使用前先進(jìn)行樣本質(zhì)量驗(yàn)證;

定量與質(zhì)量控制

使用無菌水(RNase-free)稀釋 RNA 樣本,檢測(cè) 260  nm 和 280  nm 吸光值,A260/280 應(yīng)大于 1.8。

使用公式A260× 40 ×稀釋倍數(shù)  = XXXXμg/mL 計(jì)算 RNA 濃度。

使用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè) RNA 完整性。

建議:RNA 質(zhì)量測(cè)定后,逆轉(zhuǎn)錄得到CDNA,建議用多個(gè)內(nèi)參基因自行驗(yàn)證CDNA 質(zhì)量;

biotnt 的樣本質(zhì)量驗(yàn)證引物套裝,可以在進(jìn)行QPCR 之前對(duì)樣本進(jìn)行驗(yàn)證(包含內(nèi)參引物,如human beta actin, GAPDH,  18sRNA等)

基因組DNA污染控制

Array板塊上的GDC(Genomic  DNA  Control)反應(yīng)孔專為檢測(cè)每個(gè)樣品進(jìn)行qPCR反應(yīng)時(shí)可能存在的基因組DNA污染而設(shè)置。如果該反應(yīng)孔的CT值小于35,則表明存在可檢測(cè)到的基因組DNA污染,應(yīng)采取措施予以解決。因此,必須從RNA樣品中去除基因組和其他全部殘余污染物。建議采用Qiagen 柱式抽提過程中加入DNAse去除基因組污染。

PCR array 之前購(gòu)買BioTNT 樣本質(zhì)量驗(yàn)證引物套裝或者單獨(dú)的GDC 引物進(jìn)行基因組DNA 污染控制的質(zhì)量驗(yàn)證;驗(yàn)證結(jié)果CT 值如果小于35,則表明存在可檢測(cè)到的基因組DNA污染,應(yīng)采取措施予以解決。

如何進(jìn)行樣本的調(diào)平?

PCR array之前,對(duì)樣本需要進(jìn)行調(diào)平。具體調(diào)平方式為:  

RNA 含量調(diào)平:實(shí)驗(yàn)樣本的RNA 盡量調(diào)到同一水平;加入RNA 酶free的水,調(diào)整RNA 濃度;

調(diào)平后的樣本:通過內(nèi)參引物進(jìn)行驗(yàn)證,根據(jù)CT 值,進(jìn)行二次調(diào)平。

BioTNT PCR array定制費(fèi)用如何?

BioTNT PCR array 提供您的定制,僅比預(yù)制產(chǎn)品增加了400元/板的定制費(fèi)用。您可以把您要檢測(cè)的指標(biāo)給我們,然后把您的儀器型號(hào),以及sample 數(shù)量,重復(fù)數(shù)量提供給我們,我們?yōu)槟O(shè)置相應(yīng)的PCR array 形式,并核算相應(yīng)的費(fèi)用給您。

BioTNT PCR array的定制,方式靈活,1 plate起訂。

http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx,點(diǎn)擊定制服務(wù)。

如果我沒有QPCR 儀器,BioTNT 能夠提供什么服務(wù)?

BioTNT PCR array service。

 http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx,點(diǎn)擊service。

發(fā)布者:BioTNT(冠泰生物)
聯(lián)系電話:021-51692391
E-mail:sales@biotnt.com

標(biāo)簽: pcr array
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