無需外部注射DT，DTA小鼠精準驅(qū)動細胞條件性剔除的介紹
在上一期內(nèi)容中，我們?yōu)榇蠹医榻B了DTR小鼠模型，它通過注射白喉毒素（DT）來實現(xiàn)條件性細胞剔除。如果還有朋友對這一模型不太了解，可以點擊鏈接查看詳細介紹：細胞條件性剔除：DTR小鼠助力細胞功能研究。
不過，白喉毒素（DT）是一種管制藥物，獲取難度較大，并且在使用過程中，劑量的不同會導(dǎo)致效果出現(xiàn)較大差異。那么，除了DTR小鼠模型，還有其他方案嗎？本期內(nèi)容，我們將為大家詳細介紹DTA小鼠模型。
DTR模型需要注射白喉毒素（DT）來激活，通過DTR受體介導(dǎo)的細胞死亡，而DTA（DT subunit alpha gene）則是直接表達毒素亞基A，導(dǎo)致細胞自主性死亡，無需外部注射DT。通過將表達DTA的flox小鼠與Cre小鼠進行配繁，實現(xiàn)在特定細胞中直接表達DTA直接介導(dǎo)細胞的特異性剔除。
研究案例一
本研究中，作者將Aldh1L1-DTA小鼠與Pax3-Cre或Oliga2-Cre小鼠配繁后去除eGFP和STOP序列，表達DTA，實現(xiàn)區(qū)域星形膠質(zhì)細胞特異性剔除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，區(qū)域星形膠質(zhì)細胞耗竭導(dǎo)致神經(jīng)元異常。
本研究中，作者為驗證肝細胞對于維持造血干細胞和祖細胞（HSPC）中的基因組穩(wěn)定性至關(guān)重要，構(gòu)建了Alb-Cre和ROSA26-LSL-DTA小鼠。通過將兩者進行交配，獲得了Alb-Cre+/-iDTA+/-小鼠，結(jié)果表明，這些小鼠的肝細胞數(shù)量在E16.5時減少了約 50%，HSPC（Kit+）的數(shù)量減少了30%[2]。
好啦，聽了這么多，大家是不是疑惑在做細胞條件性剔除的時候應(yīng)該選擇DTR小鼠還是DTA小鼠呢？從查閱到的文獻來看，目前使用DTR小鼠的更多。小編在這里也總結(jié)了兩者的優(yōu)缺點，大家可以根據(jù)自己的需求結(jié)合文獻進行選擇。
除上述品系外，南模生物在基因修飾小鼠模型的開發(fā)方面具有豐富的經(jīng)驗和技術(shù)平臺，可根據(jù)客戶需求定制各種類型的DTA小鼠模型。
若您有相關(guān)需求，歡迎撥打400-728-0660熱線，或通過南模生物微信公眾號在線咨詢。我們的專業(yè)團隊將竭誠為您服務(wù)!
Reference：
[1] Tsai HH, Li H, Fuentealba LC, et al. Regional astrocyte allocation regulates CNS synaptogenesis and repair. Science. 2012;337(6092):358-362. doi:10.1126/science.1222381
[2] Guo XL, Wang YD, Liu YJ, et al. Fetal hepatocytes protect the HSPC genome via fetuin-A [published correction appears in Nature. 2025 Mar;639(8053):E3. doi: 10.1038/s41586-025-08714-8.]. Nature. 2025;637(8045):402-411. doi:10.1038/s41586-024-08307-x
[3] Wang B, Wang L, Gasek NS, et al. Intermittent clearance of p21-highly-expressing cells extends lifespan and confers sustained benefits to health and physical function. Cell Metab. 2024;36(8):1795-1805.e6. doi:10.1016/j.cmet.2024.07.006
關(guān)于我們
上海南方模式生物科技股份有限公司（Shanghai Model Organisms Center, Inc.，簡稱"南模生物"），成立于2000年9月，是一家上交所科創(chuàng)板上市高科技生物公司（股票代碼：688265），始終以編輯基因、解碼生命為己任，專注于模式生物領(lǐng)域，打造了以基因修飾動物模型研發(fā)為核心，涵蓋多物種模型構(gòu)建、飼養(yǎng)繁育、表型分析、藥物臨床前評價等多個技術(shù)平臺，致力于為全球高校、科研院所、制藥企業(yè)等客戶提供全方位、一體化的基因修飾動物模型產(chǎn)品解決方案。
不過，白喉毒素（DT）是一種管制藥物，獲取難度較大，并且在使用過程中，劑量的不同會導(dǎo)致效果出現(xiàn)較大差異。那么，除了DTR小鼠模型，還有其他方案嗎？本期內(nèi)容，我們將為大家詳細介紹DTA小鼠模型。
DTR模型需要注射白喉毒素（DT）來激活，通過DTR受體介導(dǎo)的細胞死亡，而DTA（DT subunit alpha gene）則是直接表達毒素亞基A，導(dǎo)致細胞自主性死亡，無需外部注射DT。通過將表達DTA的flox小鼠與Cre小鼠進行配繁，實現(xiàn)在特定細胞中直接表達DTA直接介導(dǎo)細胞的特異性剔除。
研究案例一
本研究中，作者將Aldh1L1-DTA小鼠與Pax3-Cre或Oliga2-Cre小鼠配繁后去除eGFP和STOP序列，表達DTA，實現(xiàn)區(qū)域星形膠質(zhì)細胞特異性剔除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，區(qū)域星形膠質(zhì)細胞耗竭導(dǎo)致神經(jīng)元異常。
Fig.1 Regional astrocyte depletion results in neuronal abnormalities[1]
本研究中，作者為驗證肝細胞對于維持造血干細胞和祖細胞（HSPC）中的基因組穩(wěn)定性至關(guān)重要，構(gòu)建了Alb-Cre和ROSA26-LSL-DTA小鼠。通過將兩者進行交配，獲得了Alb-Cre+/-iDTA+/-小鼠，結(jié)果表明，這些小鼠的肝細胞數(shù)量在E16.5時減少了約 50%，HSPC（Kit+）的數(shù)量減少了30%[2]。
Fig.2 HSPCs lack hepatocyte refuge in the early fetal liver[2]
上述方法只能實現(xiàn)特定細胞的剔除，而無法實現(xiàn)特定時間的細胞剔除。如果想要在某個特定階段研究細胞的功能，我們可以利用CreERT系統(tǒng)或者Tet-on/off系統(tǒng)實現(xiàn)。
研究案例三
本研究中，作者將p21-Cre小鼠（需他莫昔芬誘導(dǎo)表達Cre，P小鼠）與Rosa-LSL-DTA小鼠交配獲得p21-Cre/+;DTA/+小鼠（P/D小鼠）。P和P/D小鼠從20個月大開始每月接受兩次他莫昔芬劑量注射（PD小鼠注射他莫昔芬后可實現(xiàn)p21高表達細胞特異性剔除）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PD小鼠中位壽命延長了79天，中位生存期提升27%，死亡風(fēng)險降低至57%；小鼠的最大壽命也增加了約8.1%[3]。
Fig.3 Intermittent clearance of p21high cells extends both median and maximum lifespans in mice[3]
好啦，聽了這么多，大家是不是疑惑在做細胞條件性剔除的時候應(yīng)該選擇DTR小鼠還是DTA小鼠呢？從查閱到的文獻來看，目前使用DTR小鼠的更多。小編在這里也總結(jié)了兩者的優(yōu)缺點，大家可以根據(jù)自己的需求結(jié)合文獻進行選擇。
南模生物DTA小鼠
南模生物開發(fā)了一系列DTA小鼠模型，可用于不同細胞類型的選擇性剔除。部分模型見下表：
若您有相關(guān)需求，歡迎撥打400-728-0660熱線，或通過南模生物微信公眾號在線咨詢。我們的專業(yè)團隊將竭誠為您服務(wù)!
Reference：
[1] Tsai HH, Li H, Fuentealba LC, et al. Regional astrocyte allocation regulates CNS synaptogenesis and repair. Science. 2012;337(6092):358-362. doi:10.1126/science.1222381
[2] Guo XL, Wang YD, Liu YJ, et al. Fetal hepatocytes protect the HSPC genome via fetuin-A [published correction appears in Nature. 2025 Mar;639(8053):E3. doi: 10.1038/s41586-025-08714-8.]. Nature. 2025;637(8045):402-411. doi:10.1038/s41586-024-08307-x
[3] Wang B, Wang L, Gasek NS, et al. Intermittent clearance of p21-highly-expressing cells extends lifespan and confers sustained benefits to health and physical function. Cell Metab. 2024;36(8):1795-1805.e6. doi:10.1016/j.cmet.2024.07.006
關(guān)于我們
上海南方模式生物科技股份有限公司（Shanghai Model Organisms Center, Inc.，簡稱"南模生物"），成立于2000年9月，是一家上交所科創(chuàng)板上市高科技生物公司（股票代碼：688265），始終以編輯基因、解碼生命為己任，專注于模式生物領(lǐng)域，打造了以基因修飾動物模型研發(fā)為核心，涵蓋多物種模型構(gòu)建、飼養(yǎng)繁育、表型分析、藥物臨床前評價等多個技術(shù)平臺，致力于為全球高校、科研院所、制藥企業(yè)等客戶提供全方位、一體化的基因修飾動物模型產(chǎn)品解決方案。
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