腫瘤壞死因子α（TNF/TNF-α）是TNF超家族的促炎細胞因子，主要由活化的巨噬細胞/單核細胞在急性炎癥期間產生，約占體內TNF總活性的70%～95%^[1]。通過與不同受體結合，TNF-α參與正常炎癥反應和免疫反應，調節細胞增殖、代謝激活、炎癥反應和細胞死亡等多種生物過程。TNF-α表達失調是類風濕性關節炎（RA）、炎癥性腸病（IBD）和銀屑病（PS）等自身免疫性疾病，以及胰島素抵抗、多囊腎病和癌癥等多種疾病病理發展的關鍵因素和主要的干預靶點^[2]。
 

圖1 TNF及其受體下游的信號傳遞模式和生物活性[2]

TNF-α在自身免疫性疾病發揮重要作用
作為內源性熱原，TNF-α能夠誘導發熱、細胞凋亡、惡病質和炎癥，抑制腫瘤發生和病毒復制，并通過產生IL-1和IL-6的細胞對敗血癥作出反應。TNF-α過度產生或信號傳導失調會通過促進炎癥、誘導骨侵蝕和關節損傷以及加劇組織損傷等方式導致自身免疫性疾病^[2-3]。因此，TNF-α抑制劑是多種自身免疫疾病的首選治療藥物^[4]。艾伯維的TNF-α抑制劑修美樂（阿達木單抗）自上市以來全球累計銷售額超過2000億美元，盡管面臨多方圍剿，但TNF-α抑制劑市場仍未達到巔峰。據調研機構Precedence Research預測，2023年全球TNF-α抑制劑市場規模為420.7億美元，預計到2033年將達到506.3億美元，全球自身免疫性疾病發病率的上升將推動對TNF-α抑制劑藥物的持續需求^[5]。
 

圖2 2024年至2033年TNF-α抑制劑藥物的市場規模與增長預測^[5]

DBA/1小鼠是自身免疫性疾病研究的重要模型
DBA/1小鼠是一種常見的近交系品系，廣泛用于關節炎誘導造模、神經生物學、動脈粥樣硬化、自身免疫性腎炎和乳腺腫瘤等領域研究^[6]。膠原誘導的關節炎（CIA）模型是類風濕性關節炎（RA）小鼠的“金標準”，其誘導效果與MHC Ⅱ類分子密切相關。基于高敏感性DBA/1品系構建的CIA小鼠具有較高的發病率和良好的重復性，成為相關研究的首選模型^[7]。在接受Ⅱ型膠原蛋白免疫后，DBA/1小鼠會出現與滑膜炎及軟骨和骨骼侵蝕相關的嚴重類風濕性關節炎，并伴有自身免疫反應。另一方面，研究表明，表達人類TNF-α的DBA/1轉基因品系較C57BL等品系關節炎發病速度更快、病理組織中的TNF-α活性更高且發病機制與人類疾病符合^[8]。因此，DBA/1小鼠無疑是研究類風濕性關節炎（RA）等TNF-α相關自身免疫疾病的首選品系。
 

圖3 DBA/1小鼠在膠原誘導的關節炎（CIA）中呈現更高的臨床評分^[9]

以DBA/1小鼠為背景構建TNF人源化小鼠模型，將有助于多種誘導性自身免疫性疾病模型構建，并加速更多靶向人類TNF療法的研發和藥效評價。賽業生物通過將DBA/1小鼠的Tnf基因原位替換為包含5'UTR和3'UTR區域的人源TNF基因，成功構建了DBA/1-hTNF小鼠模型（產品編號：I001195）。該模型能成功表達人源TNF基因和蛋白，以下是該模型的詳細表型信息。

DBA/1-hTNF小鼠僅表達人類TNF基因
檢測數據顯示，10周齡的DBA/1-hTNF小鼠成功表達人源TNF基因且不表達小鼠Tnf基因。
 

圖4 DBA/1-hTNF小鼠和DBA/1野生型小鼠人源TNF基因和小鼠Tnf基因表達的RT-qPCR檢測

圖5 DBA/1-hTNF小鼠和DBA/1野生型小鼠在LPS刺激后人源和小鼠TNF蛋白的表達情況