腺病毒的介紹及病毒注射實驗安全操作須知
瀏覽次數:1833 發布日期:2023-11-30
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什么是腺相關病毒?
腺相關病毒(Adeno-associated viruses,常縮寫為AAV),是一種隸屬細小病毒科依賴性細小病毒屬、能夠感染人類以及其他部分靈長類動物的病毒。腺相關病毒直徑約20納米、無被膜,無法自主完成復制,全基因組長約4.8千堿基對(kb)[1][2]
腺相關病毒因毒性低、不能自主復制、不致病,且較少整合到宿主基因組中,因而被認為是一種較為理想的基因治療載體,廣泛應用于基因過表達、基因敲除、基因干擾表達和內源基因過表達。
腺相關病毒對人體的危害?
腺相關病毒 (AAV) 與大多數病毒不同,它需要同時存在輔助病毒才能進行主動感染。高達 80% 的人群 AAV 抗體血清呈陽性。AAV 已知是一種非致病性病毒,目前尚不清楚 AAV 會引起任何人類疾病。但是最近的報告已確定 AAV 插入突變是發生肝細胞癌的潛在因素[3]。
除此之外,關于 AAV 感染與不良生殖結局(如胎盤并發癥、自然流產和生育障礙)的發生之間的關系,以及 AAV 感染與 HPV 相關宮頸癌發生的保護作用之間的關系等等,目前對此研究結果不一致,因而關于 AAV 自然感染的許多問題尚沒有定論[4]。
注射病毒如何正確防護?
* 實驗室管理要求:
實驗室應當滿足二級生物實驗室要求,即P2實驗室。相當于BSL-2實驗室。主要用于初級衛生服務、診斷和研究。其實驗對象的危害等級為二級:能夠引起人類或者動物疾病,但一般情況下對人、動物或環境不構成嚴重危害,傳播風險有限,實驗室感染后很少引起嚴重疾病,并且具備有效治療和預防措施的微生物(中等個體危害、有限群體危害)
* 實驗人員防護要求:
1.病毒使用前,操作人員應當充分了解病毒相關實驗安全問題,加強安全操作意識。在實驗操作中,穿戴好實驗服、口罩、護目鏡以及一次性手套,盡量不要裸露雙手以及手臂皮膚。
2.病毒操作時,注意避免蛋白酶或細菌污染,建議使用 DNase/RNase-Free 耗材進行操作。操作過程中如果有病毒濺出,立即使用70%酒精加1% SDS溶液擦拭消毒。
3.實驗結束后,請用84溶液浸泡接觸過病毒的槍頭、離心管和玻璃電極,消殺病毒至少20 min。實驗人員請及時用肥皂水清潔雙手。所有生物廢料的處理均需遵從公共機構發布的和所處機構制定的規范條例執行。
4.若眼睛、皮膚等不小心接觸到病毒,請立即用大量清水沖洗。若病毒接觸到傷口等部位,立即用10%碘伏溶液擦洗之后,用大量清水沖洗,建議沖洗時間至少20 min。
病毒注射所需的設備
* MP-500玻璃微電極拉制儀:
加熱片固定卡槽—操作簡便
內置拉制模版—智能高效
一體式插拔濕度控制室—人性化設計
* R-480注射泵:
高精度、密封性好、注射運行穩定
* 動物麻醉系統:
一體化機身設計
麻醉過程穩定可控
雙通道獨立控制
低應激誘導,高效氣體回收
* 腦立體定位儀:
精準穩定、種類齊全、適配多種實驗場景
參考資料
[1]Naso, Michael F.; Tomkowicz, Brian; Perry, William L.; Strohl, William R. Adeno-Associated Virus (AAV) as a Vector for Gene Therapy. BioDrugs. 2017, 31 (4): 317–334.
[2]Wu, Zhijian; Yang, Hongyan; Colosi, Peter. Effect of Genome Size on AAV Vector Packaging. Molecular Therapy. 2010, 18 (1): 80–86.
[3]Araujo, Natalia M. "A dual role for adeno-associated virus in human health." Virology Journal 20.1 (2023): 228.
[4]Sant’Anna, Thaís B., and Natalia M. Araujo. "Adeno-associated virus infection and its impact in human health: an overview." Virology Journal 19.1 (2022): 173.