什么是OPO？
 
嬰兒配方奶粉中常常看到“添加OPO”的字樣， OPO學(xué)名為1，3-二油酸-2-棕櫚酸甘油三酯， O是油酸（Oleic acid），P是棕櫚酸（Palmitic acid），所以O(shè)PO就是帶有2個C18:1和1個C16:0 脂肪酸鏈的甘油三酯。也是母乳區(qū)別于普通配方奶粉的一種特殊成分。
 
在無特殊添加的普通嬰兒配方奶粉中，也含有二油酸-棕櫚酸甘油三酯，但含量較高的是OPO的同分異構(gòu)體OOP，二者的區(qū)別在于油酸和棕櫚酸的連接位點不同，在甘油三酯的“山”字型甘油骨架上，OOP的“C位”，即sn2位連接的是油酸（O），OPO的sn2位鏈接的是棕櫚酸（P）。
  
OPO和OOP細微的結(jié)構(gòu)差異卻帶來了生理學(xué)功能的大相徑庭，嬰兒體內(nèi)脂肪酶可以專一性的水解特定位點的脂肪酸，棕櫚酸在sn2位上就不能被水解下來，而連接在“山”型骨架上的棕櫚酸結(jié)構(gòu)是可以被嬰兒的腸胃吸收的，但是棕櫚酸如果不在C位，在sn1或sn3上，就可以被脂肪酶水解下來形成游離的棕櫚酸，游離的棕櫚酸則無法被吸收，會與礦物質(zhì)結(jié)合，導(dǎo)致嬰兒失去功能性棕櫚酸和大量礦物質(zhì)，對嬰兒的消化功能產(chǎn)生不良影響。
 

圖1. OPO和OOP的結(jié)構(gòu)差異
 
  
如何檢測奶粉中的OPO？

由于OPO和OOP是結(jié)構(gòu)十分相近的同分異構(gòu)體，所以色譜行為一致，UPLC無法對OOP和OPO進行色譜分離。
 
常規(guī)的CID碎裂模式是通過化合物內(nèi)化學(xué)鍵鍵合的強弱規(guī)律獲得碎片的，所以O(shè)PO和OOP的碎片再CID碎裂模式下也是一致的，無法區(qū)分二者結(jié)構(gòu)上的差異。
 
SCIEX ZenoTOF™ 7600系統(tǒng)除了具有CID碎裂模式外，還有一種全新的EAD碎裂模式，EAD是一種基于自由電子碰撞的電子激活解離，可以對sn2位和sn1/3位進行區(qū)分（圖2），進而可以實現(xiàn)通過簡單的液質(zhì)聯(lián)用方法對同分異構(gòu)體OPO和OOP進行區(qū)分。
 
圖2. EAD對甘油三酯的不同位點的碎裂規(guī)律
 
如圖3所示，OOP在EAD碎裂模式下可以獲得特異性碎片，18:1在不同位點時的碎片不同，在sn2位時碎片是331.26，在sn1/3位時345.27和347.25；以此為根據(jù)通過sn2位的脂肪酸鏈判斷該化合物的結(jié)構(gòu)組成是OOP；OPO在EAD碎裂模式下可以獲得特異性碎片，圖4中可知16:0 在sn1/3位時碎片是319.26和321.24，而在sn2位時碎片是305.25；以此為根據(jù)通過sn2位的脂肪酸鏈判斷該化合物的結(jié)構(gòu)組成是OPO（圖4）。
 

圖3. OOP在EAD模式下的二級譜圖
 

圖4. OPO在EAD模式下的二級譜   
 
選擇了某品牌的嬰兒配方奶粉，配方成分中含有1,3-二油酸-2-棕櫚酸甘油三酯（OPO）成分，含量為3~5g /100g 奶粉，經(jīng)前處理后質(zhì)譜檢測，與標準譜圖對比分析發(fā)現(xiàn)，嬰兒奶粉中含有m/z 305和m/z 331兩種碎片離子，即sn-2位分別為C16:0和C18:1的脂肪酸鏈，說明在嬰兒配方奶粉中同時存在OPO和OOP，即在嬰兒配方奶粉中除含有普通奶粉中OOP之外，還添加了可被嬰兒腸道消化吸收的OPO成分。
 

圖5. 嬰兒配方奶粉在EAD模式下的
一級色譜圖和二級質(zhì)譜圖
 
常規(guī)液質(zhì)聯(lián)用儀不能識別的脂質(zhì)精細結(jié)構(gòu)，例如OPO和OOP同分異構(gòu)體，但脂質(zhì)化合物的精細結(jié)構(gòu)對于脂質(zhì)的生理學(xué)功能卻是至關(guān)重要的，幸運的是，具有EAD功能的SCIEX ZenoTOF 7600系統(tǒng)在包括脂質(zhì)在內(nèi)的多種化合物的結(jié)構(gòu)解析方面所展現(xiàn)的強大能力彌補了質(zhì)譜檢測的不足之處，為化合物結(jié)構(gòu)解析對生物學(xué)功能的影響相關(guān)研究提供了簡便而有力的技術(shù)手段。