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本中心成功建立了人鼠嵌合抗體及人源全長抗體改造系統(tǒng)。利用這一系統(tǒng)可以將您的鼠源單克隆抗體進(jìn)行人源嵌合化改造，或?qū)⒛男》肿涌贵w進(jìn)行全長改造。
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制備人鼠嵌合抗體及人源全長抗體
服務(wù)簡介● 人-鼠嵌合抗體：
人源單抗的生產(chǎn)在技術(shù)上難以克服融合率低、建株難、不穩(wěn)定、產(chǎn)量低、人體不能隨意免疫等問題。隨著基因工程技術(shù)的崛起以及抗體分子遺傳學(xué)的深入研究，應(yīng)用基因工程技術(shù)該著現(xiàn)有優(yōu)良的鼠單抗的基因，其著眼在于盡量減少抗體重的鼠源成分，但又盡量保留原有的抗體特異性，從而創(chuàng)造出新型抗體-基因工程抗體。1984年，Morrion，從雜交瘤細(xì)胞中分離出功能性可變區(qū)基因，與人Ig恒定區(qū)的基因連接，插入適當(dāng)質(zhì)粒，構(gòu)建鼠-人嵌合的重鏈和輕鏈基因質(zhì)粒載體，共同轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞（如骨髓瘤細(xì)胞），表達(dá)鼠-人嵌合抗體。人-鼠嵌合抗體的特點是就是用人源性抗體的一部分代替鼠源性抗體的一部分，使之保留對抗原的特異性，又具備與補體和細(xì)胞結(jié)合的功能，并減少異源性蛋白的抗原性。此外，通過連接上不同的人恒定區(qū)基因而改變抗體的效應(yīng)功能。要生產(chǎn)這樣的嵌合抗體，第一步也是關(guān)鍵的一步是要從雜交瘤細(xì)胞中獲得McAb的特定可變區(qū)基因，然后再與人的抗體恒定區(qū)基因連接，最后將構(gòu)建好的人-鼠嵌合抗體基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞中表達(dá)。主要步驟包括制備目的基因、選擇載體、將目的基因和載體重組，然后將嵌合抗體的DNA重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞，篩選陽性細(xì)胞和表達(dá)產(chǎn)物的鑒定。
● 人源化抗體（humanized antibody，HAb）人源化抗體就是指抗體的可變區(qū)部分由人類可變區(qū)基因所編碼，即Vh和Vl。人源化抗體可以大大減少鼠源抗體對人類機(jī)體造成的免疫副反應(yīng)。制備人源化抗體的主要目的是減少抗體的異源性，以利其臨床應(yīng)用。
基因工程抗體的出現(xiàn)，極大地推動了抗體技術(shù)的發(fā)展和抗體藥物及診斷試劑的研發(fā)。但是目前有相當(dāng)數(shù)量的具有潛在應(yīng)用價值的鼠源單抗以及小分子抗體（scFv等）無法進(jìn)行人源改造及全長改造并開展進(jìn)一步研究。
本中心成功建立了人鼠嵌合抗體及人源全長抗體改造系統(tǒng)。利用這一系統(tǒng)可以將您的鼠源單克隆抗體進(jìn)行人源嵌合化改造，或?qū)⒛男》肿涌贵w進(jìn)行全長改造。
服務(wù)流程 （8個月）
| 項目服務(wù) | Cat.No. | 報價 |
| 人鼠嵌合抗體制備 | A21 | ￥50000起（詢價） |
| 人源全長抗體制備 | A22 | ￥50000起（詢價） |
我實驗室已建立了從基因克隆，載體構(gòu)建到表達(dá)篩選、抗體制備及親和力測定等一整套嵌合（全長）抗體制備流程。其技術(shù)路線為：
① 獲得重輕鏈可變區(qū)，構(gòu)建入含有人抗體恒定區(qū)的表達(dá)載體質(zhì)粒。（2個月）
② 轉(zhuǎn)染二氫葉酸還原酶（dhfr）缺陷型CHO細(xì)胞系，在選擇壓力下篩選并克隆獲得穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株。 （3個月）
③ 加壓篩選表達(dá)效率最高的細(xì)胞株，制備純化少量抗體并檢測其親和力、特異性等技術(shù)指標(biāo)。（3個月）
提供成果
① 1-2株穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株。
② 各實驗節(jié)點檢測報告。（包括可變區(qū)基因測序報告，抗體活性ELISA檢測報告，細(xì)胞株表達(dá)量ELISA檢測報告，抗體親和力ELISA或SPR檢測報告，抗體特異性ELISA或western blot檢測報告）
