單克隆抗體則是由一個產生抗體的細胞與一個骨髓瘤細胞融合而形成的雜交廇細胞經無性繁殖而來的細胞群所產生的,所以它的免疫球蛋白屬同一類型,質地純一,而且它是針對某一抗原決定簇的,因此特異性強,親合性也一致。1975年Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞與和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交瘤細胞既可產生抗體,又可無性繁殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。
(1)服務流程
1)免疫和ELISA檢測:客戶提供的蛋白質或多肽與載體蛋白(如KLH)偶聯。需要約4 mg蛋白質免疫原或5-10 mg的多肽,免疫5只Balb/c小鼠,采血用ELISA進行檢測。
2)融合和篩選:用小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞進行融合,得到的雜交瘤細胞通過增殖和ELISA篩選得到高效價的克隆。
3)亞克隆和交付的結果:挑選兩個最好的克隆進行亞克隆和亞型鑒定,交付結果包括1個單克隆細胞株及純化抗體2 mg。
(2)您需要提供
應提供抗原的相關參數,如分子量、來源、穩定性、儲存方法等,提供符合技術要求數量足夠的抗原,
1)如果是蛋白抗原>10mg蛋白(SDS-PAGE純度大于85%),
2)如果是多肽抗原>10mg(要求純度大于95%);
3)如果是cDNA克隆,提供目的蛋白名稱、種屬來源、序列、NCBI號;含有目的蛋白全長cDNA的克隆
(3)我們提供
1個單克隆細胞株及純化抗體2 mg,抗體對免疫原的ELISA效價大于1:80000
(4)質量保證
1)經多次克隆化保證細胞為單克隆,且連續兩次克隆化所檢測亞克隆的陽性率為100%。
2)選取1~2個最好的克隆,生產腹水,并可根據客戶要求進行抗體純化