普健生物提供的分子間相互作用服務基于BiacoreTM、openSPR兩大系統,其原理是基于表面等離子體共振 (SPR)技術,能夠快速實現對分子間(蛋白與蛋白、抗原與抗體、蛋白與小分子)親和力的定性以及定量分析。與傳統的GST pull down,免疫共沉淀等相比,具有更高的靈敏度、檢測通量及較低的樣品要求等優點。
表面等離子體共振 (SPR)親和力測定是一種基于光學的無標記檢測技術,用于實時檢測兩個或多個分子之間的分子互作。SPR親和力檢測是一種通過傳感器芯片跟蹤信號變化來檢測分子相互作用的方法。SPR信號通過折射率變化呈現,它指的是響應單位 (RU) 大約相當于1pg/mm2的蛋白質表面濃度。在兩個分子之間的相互作用過程中,隨時間繪制SPR信號會產生傳感圖,該圖可以實時可視(圖 1)。一般結合反應包括三個階段:結合、平衡和解離;將這些傳感圖數據與數學模型擬合,科學家們可以計算關聯 (Ka) 和解離 (Kd) 速率常數,并最終確定結合親和力(KD)。與基于平衡點測量抗體結合親和力的等溫量熱法 (ITC) 不同,SPR可以獲得完整的動力學參數來評估結合和解離的所有影響以及抗體親和力。