植物石蠟切片(番紅-固綠染色)
一、目的要求
1、 熟悉植物石蠟切片的制作過程。
2、 掌握番紅-固綠對染法的基本原理和具體方法。
二、實驗原理
石蠟切片法也是在研究植物細胞的形態結構等方面常用的制片方法。它可以使植物材料
切成薄的薄片,又可以切成連續薄片,切片經染色,觀察效果甚好。番紅-固綠對染法,為植物制片上最普遍的一種二重染色法,其染色程序簡單并能清晰地顯示出細胞的結構。番紅
為堿性染料,能使細胞核及木質化的細胞壁染成紅色;固綠為酸性染料,能使細胞質及纖維
素的細胞壁染成綠色。
三、實驗用品
(一) 器材
切片刀,切片機,溫箱,溫臺,解剖刀,鑷子,單面刀片,臺木,毛筆,蠟鏟,酒精燈,包
埋紙盒,染色缸,玻片盤,溫度計,臉盆。
(二)試劑
FAA 固定液,1%番紅,1%固綠,各級酒精(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%),二甲
苯,石蠟,郝普特氏明膠粘片劑,樹膠。
試劑配法:
1、FAA 固定液(福爾馬林-醋酸-灑精混合液)
福爾馬林 5 ml
50%或 70%的灑 90 ml
冰醋酸 5 ml
此液適用于植物組織,此液中的酒精,有用 50%的,也有用 70%的,一般薄嫩的材料右用
50%的,厚硬的材料用 70%的,醋酸的用量也可根據材料情況作適當的改變,對一些大塊而
密實的組織可增加用量,同時減少福爾馬林的用量。固定時間可因材料及醋酸含量的變化而
異,一般為 5~20h。固定的材料,一般無需用水洗,可直接從 70%的酒精開始脫水。
退回重染。
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