當前化學合成多肽的方法主要有兩種，即 Fmoc 和 t Boc ；由于 Fmoc 比 tBoc 存在更多優勢，所以現在較流行的是 Fmoc 法。多肽合成是一個重復添加氨基酸的過程，合成方向是從 C 端（羧基端）向 N 端（氨基端）進行；過去多肽合成大多是在液相中進行，現在大多采用固相合成，從而大大的降低了每步產品提純的難度；為了防止副反應的發生，合成柱和添加的氨基酸的側鏈都是預先被保護的，只有羧基端是游離的，并且在反應之前必須先用化學試劑活化它。
具體合成步驟如下：
1 、去保護： Fmoc 保護的柱子和單體必須用一種堿性溶劑（ piperidine ）去除氨基的保護基團。（如圖 1 ）
2 、激活和交聯：下一個氨基酸的羧基被一種激活劑所激活溶解，激活的單體與游離的氨基在交聯劑的作用下交聯，形成肽鍵。（如圖 2 ）
3 、循環：這兩步反應反復循環直到整條肽鏈合成完畢。
4 、洗脫和脫保護：根據肽鏈所含的殘基不同，用不同的脫樹脂溶劑從柱上洗脫下來，其保護基團被一種脫保護劑（ TFA ）洗脫和脫保護。
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