利用LC-ESI-MS/MS蛋白鑒定技術對膠條樣本(即SDS-PAGE樣本)、IP、co-IP、Pull-down等純化溶液等中等復雜樣本進行蛋白鑒定。
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產品定義
利用LC-ESI-MS/MS蛋白鑒定技術對膠條樣本(即SDS-PAGE樣本)、IP、co-IP、Pull-down等純化溶液等中等復雜樣本進行蛋白鑒定。
SDS-PAGE樣本
Co-IP實驗質譜檢測
技術原理
電噴霧(ESI)技術是將待測分子溶解在溶劑中通過HPLC分離,以液相方式通過毛細管達到噴霧口,在噴霧口高壓電場作用下形成帶電荷的微滴,隨著微滴中的揮發性溶劑蒸發,微滴表面的電荷體密度隨半徑減少而增加,達到某一臨界點時,樣品以離子化的方式從液滴表面蒸發,進入質量分析器。
Ⅰ 電噴霧離子化方式容易形成多電荷離子,因此在較小的M/Z范圍內可檢測到大分子質量的分子;
Ⅱ 采用液相方式進樣,一般與液相色譜(LC)聯用,可以對復雜樣品進行質譜分析,根據樣品在色譜中不同的保留時間對其進行分離后鑒定,大大提高了分析的效率和精確度。
電噴霧(ESI)工作原理示意圖
實驗流程
使用儀器
Thermo Scientific LTQ-Velos Thermo Scientific Q Exactive
技術優勢
適合中度復雜的蛋白質樣品,如相互作用的蛋白質條帶;
高準確性 高靈敏度。
應用領域
蛋白質或多肽鑒定
樣品需求
樣品 |
樣品要求 |
SDS-PAGE條帶 |
考染、銀染(質譜兼容)條帶清晰可見 |
蛋白質溶液 |
蛋白質總量>5μg,濃度>0.1μg/μl; 緩沖液不含去污劑NP40、Triton X-100等 |