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病理學(xué)服務(wù):免疫熒光實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記,試劑與標(biāo)本中相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后,測(cè)定復(fù)合物中的熒光素,這種免疫技術(shù),稱為免疫熒光素技術(shù)。

服務(wù)類別:免疫與抗體總訪問:1487
最后更新:2014-8-21半年訪問:29
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免疫熒光實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)


常見熒光素: 
⑴ FITC
⑵ RB200
⑶ TRITC
⑷ 鑭系:Eu、Tb
⑸ PE
⑹ 其它


實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 4μm石蠟切,60℃烤,30min。
2. 常規(guī)脫蠟至水(二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各10min,無水乙醇,95%乙醇,85%乙醇,75%乙醇各2min)。
3. PBS洗(磷酸鹽緩沖液0.01mol/L pH7.4)3×3min。
4. 0.1%胰蛋白酶(100ml蒸餾水中加入100mg胰蛋白酶,100mg氯化鈣,用0.1N NaoH調(diào)pH至7.6),37℃,消化30min。(或其他修復(fù)方法)
5. 0.01mol/L pH7.4 PBS洗3×3min。
6. 兔抗人AFP1:50(用專用抗體稀釋液稀釋)37℃,1h或室溫4h,或4℃過夜。
7. PBS洗3×3min。
8. 羊抗兔IgG-F,1:20稀釋,37℃,1h,室溫2h。
9. PBS洗3×3min。
10.蒸餾水洗3min。
11.pH9.0緩沖甘油封片。
12.鏡檢,陽(yáng)性呈明亮綠色熒光。


熒光信號(hào)增強(qiáng)封片劑
    mowiol 40-88         4.8g
    甘油                 12ml
    蒸餾水               12ml
    0.2mol/L Tris(pH8.5) 24ml
上述混合(加熱溶解),5000g離心,15min,最后加入1.4-diazobicydo-[2,2,2]-octane(DABcos),終濃度2.5%(約1.25g),溶解后,分裝存于-20℃中。


實(shí)驗(yàn)具體收費(fèi)、標(biāo)本的收集、實(shí)驗(yàn)試劑的定購(gòu)等事宜,請(qǐng)聯(lián)系嘉美生物。
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