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水溶性羧基量子點(diǎn)與氨基分子偶聯(lián)方案
【標(biāo)記所需儀器與試劑】
2-20μl、20-200μl、100-1000μl 或相似量程的可調(diào)高精密及相應(yīng)槍頭，去離子水，磷酸緩沖
溶液，0.22μm 針頭式濾器，pH 計(jì)或精密 pH 試紙（量程為 6-8），渦旋振蕩器，磁力攪拌器，
待標(biāo)記分子，手套，護(hù)目鏡，口罩，實(shí)驗(yàn)服等防護(hù)用品。
【操作步驟】
- 量子點(diǎn)濃度為 5μM
- 待標(biāo)記分子用磷酸緩沖液（0.01M，PH6.8）稀釋至 5mg/ml
- 取一定量的量子點(diǎn)加入到反應(yīng)器中，開始攪拌，依次加入計(jì)算好用量的 EDC 水溶液（10mg/ml）、NHS 水溶液（10mg/ml，調(diào)節(jié) PH 至 7.0 左右），攪拌 0.5h。
- 按比例加入待標(biāo)記分子，攪拌 4h。
- 反應(yīng)結(jié)束，用 0.22μm 針頭式濾器將樣品過濾，測(cè)濃度。于 4℃保存。
【注意事項(xiàng)】
- 試劑檢查：量子點(diǎn)樣品在 365nm 紫外光照射下為發(fā)熒光的均質(zhì)溶液。
- EDC 溶液要現(xiàn)用現(xiàn)配。
- 調(diào)節(jié) pH 時(shí)，要迅速，選擇較稀濃度 NaOH 調(diào)節(jié)（建議 1M 左右）,防止溶液調(diào)節(jié)過堿。
- 建議反應(yīng)摩爾比為：QD-COOH:EDC:NHS:NH2-R=1：(2000-5000)：(1000-2500)：(5-50)。
參考比例：
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QD-COOH(5uM) |
EDC（10mg/ml） |
NHS（10mg/ml） |
NH2-R（5mg/ml） |
實(shí)驗(yàn)比例 |
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20μl |
3.6μl |
1.15μl |
15μl |
1:2000:1000:5 |
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20μl |
9.0μl |
2.90μl |
30μl |
1:5000:2500：10 |
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備注：本實(shí)驗(yàn)方案只供參考，具體實(shí)驗(yàn)需進(jìn)一步確定實(shí)驗(yàn)條件，建議反應(yīng)體系中量子點(diǎn)濃度
不得小于 1μM，客戶可根據(jù)產(chǎn)品自行調(diào)整反應(yīng)比例。
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24小時(shí)電話： 13311756131
客服: QQ:2851717098
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