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實驗室軟X射線技術助力實現非標記納米細胞3D成像

瀏覽次數:273 發布日期:2025-4-16  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

軟X射線斷層成像(Soft X-ray Tomography, SXT)作為一種強大的三維無損成像技術,能夠在無需染色或切片的情況下,揭示冷凍生物樣本的納米級超微結構,為科研工作提供了關鍵的技術支持。然而,傳統SXT技術嚴重依賴大型同步輻射裝置,不僅設備成本高昂、使用門檻高,而且實驗預約難度大,極大地限制了其廣泛應用。

實驗室級軟 X 射線——SXT-100

近期,愛爾蘭公司SiriusXT研發的實驗室級軟X射線顯微鏡SXT-100,憑借其創新的激光驅動等離子體光源技術,成功打破了這一困境。它將高分辨率成像功能融入普通實驗室的日常研究中,讓科研人員無需再受限于大型同步輻射裝置,在自己的實驗室隨時實現高精度的細胞成像。這一突破為細胞生物學、納米醫學以及疾病研究領域帶來了全新的非標記納米水平細胞3D成像工具,并且SXT-100還可結合熒光成像對特定目標在細胞內進行3D共定位,為生物醫學提供多樣化的表征手段。

 
五大超卓技術優勢


☛ 高分辨率:SXT-100實現了40 nm分辨率,可清晰分辨細胞器(如線粒體、脂滴)及納米顆粒(如60 nm無機-有機雜化納米顆粒)。

☛ 高通量:單個細胞的斷層掃描時間僅需30分鐘至2小時,與傳統聚焦離子束掃描電鏡(FIB-SEM)長達48小時的耗時相比,優勢顯著,而且FIB-SEM在檢測中還需破壞樣本。采用優化后的樣品制備方法,如圓柱形薄壁玻璃毛細管,SXT-100S甚至可以在5到10分鐘內獲取單個細胞的三維結構圖像。

☛ 無損成像:基于“水窗”能量(280-530 eV)的軟X射線吸收特性,SXT-100可直接對全水合、冷凍樣本成像,避免化學固定或染色對結構的干擾。

☛ 結合熒光成像: SXT-100集成熒光顯微鏡功能,通過熒光信號定位目標區域(如納米顆粒、細胞器),再利用SXT獲取三維結構信息。

☛ 直達冷凍電鏡成像:成像后樣本可進一步用于冷凍電鏡(cryo-EM)或冷凍電子斷層掃描(cryo-ET),形成“光-電-射線”多尺度關聯成像(CLEXM)。


多領域前沿成果展示

1. 酵母細胞脂噬過程研究

在對冷凍酵母細胞(Saccharomyces cerevisiae)的研究中,SXT-100發揮了特殊優勢。如下圖所示,SXT成像對冷凍酵母細胞(Saccharomyces cerevisiae)進行3D成像,可以非常直觀地展示脂滴(黃色)與消化液泡(棕色)的空間分布動態,揭示饑餓誘導的脂噬(lipophagy)機制。

 
2. 納米藥物遞送在細胞內的3D成像


在HeLa細胞(HeLa)中,SXT-100成功追蹤了100 nm熒光聚苯乙烯納米顆粒(NPs)的溶酶體共定位。如下圖所示,SXT-100可以提供熒光信息與納米藥物遞送載體在細胞內的3D共定位信息,為優化藥物載體設計提供結構依據。

 
3. 復雜真核生物成像


SXT-100可以對眼蟲(Euglena gracilis)進行納米級3D無標記成像,結合熒光標記葉綠素進行三維結構表征。如下圖所示,SXT-100可以清晰呈現鞭毛、類核體及光合膜系統等復雜真核生物內的細胞器結構,為單細胞生物功能研究提供新視角。

 
專家點評


倫敦國王學院的 Roland Fleck 教授在2024年美國電鏡年會上做了“多尺度關聯工作流程、低溫 CLEM 的挑戰和機遇”主題演講。他指出,SXT-100作為預篩選工具,能夠高效識別玻璃化樣品中感興趣的區域,以便進行后續低溫TEM分析,顯著提高了實驗的通量。這一評價充分肯定了SXT-100在科研工作中的重要價值。

 
結語


SXT-100的推出,標志著軟X射線成像技術正式邁入實驗室普及時代。其高分辨率、無損、高通量及多模態關聯的特性,將加速從基礎細胞生物學到納米醫學的研究進程。隨著技術迭代與應用場景拓展,SXT有望成為解析生命微觀世界的“全能之眼”。

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