辣椒及其制品辣度ELISA檢測試劑盒
使用說明書

 快速（＜10min）、高回收（≥80%）和高效的前處理方法

 檢測限1度辣度，定量限2度辣度

 快速，檢測時間30min

 高的重現性

原理：
基于競爭性免疫檢測原理：辣椒素與預包被在板上的辣椒素蛋白偶聯物競爭結合有限的抗辣椒素的抗體，然后加入酶結合物反應，形成酶結合物—抗辣椒素抗體—辣椒素蛋白偶聯物復合物，洗滌除去未結合的反應物，經TMB底物顯色產生藍色產物，加終止液后，產物由藍色轉變為黃色，其在450nm下有最大吸收峰。樣本中辣椒素含量與樣本的吸光度呈負相關。

 

1. 當與儀器方法結果相比時，試劑盒的結果偏高這是很正常的現象。因為儀器方法僅測量的單一化合物，而試劑盒中的抗體由于不僅能識別目標分子且還能識別結構上相似的分子，包括其相關的代謝產物。因此，使用人員需要明白本產品的局限性和對數據做出合理的分析。

2. 任何試劑、檢測程序的改變都可能導致檢測失敗。

3. 不要使用超過有效期的產品；不同批次的產品不得混用。

4. 實驗用水的質量很重要，請使用蒸餾水或去離子水。

5. 微孔板開封后，需置于有干燥劑的密封袋中冷藏保存，建議于一個月內使用完。

 酶標儀：配備450nm波長

 單道移液器：0.5-10、20-200、100-1000μL、0.5-5mL量程各一支

 多道移液器：30-300μL量程一支

 白色、黃色和藍色吸頭若干  恒溫培養箱

 均質器或絞肉機

 甲醇，分析純

 二甲基亞砜，分析純

(1) 樣本提取液

      分別取甲醇70mL和二甲基亞砜 30mL混勻備用。

(2) 1×樣本稀釋液

      取4×樣本稀釋液1份，加入3份去離子水混勻，比如1mL+3mL    

火鍋底料、凝固性油樣，可以加熱至樣品溶化后再稱量

(1) 稱取0.2g均質的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min;

(2) 4000rpm，離心5min；

(3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻；

(4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻

(5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻

稀釋倍數：1

  粉碎后，過40目篩

(1) 稱取0.2g均質的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min;

(2) 4000rpm，離心5min；

(3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻；

(4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻

(5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻

稀釋倍數：1

    在均質器或料理機上均質呈勻漿

(1) 稱取0.2g均質的樣本于一合適的容器中，加入10mL樣本提取液渦旋2min;

(2) 4000rpm，離心5min；

(3) 取上層液體0.1mL，加入9.9mL去離子水混勻；

(4) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.9mL去離子水混勻

(5) 再取0.1mL上一步混勻后溶液，加入0.1mL1×樣本稀釋液混勻

稀釋倍數：1

• 所有試劑需回復至室溫（在20-25℃下，從試劑盒中取出并放置1-2h）;
• 檢測開始前需準備好所需試劑；
• 取出所需體積的試劑，其余放回盒內；
• 未使用完的試劑請勿倒回原試劑瓶內，移取每一種試劑需更換吸頭，以免交叉污染；
• 請不要在通風口、陽光直射下檢測，以避免造成微孔微環境差異導致檢測失敗；
• 標準品、陽性樣本以及用過的吸頭和器皿均應做有毒廢棄物處理。