昆蟲桿狀病毒表達系統介紹
瀏覽次數:1423 發布日期:2024-3-28
來源:卡梅德生物
昆蟲桿狀病毒表達系統,是一種廣泛用于昆蟲桿狀病毒蛋白表達的系統,涉及使用桿狀病毒,這是一種昆蟲特異性病毒,在昆蟲細胞中傳遞和表達外源基因。以下是昆蟲桿狀病毒表達系統的一些特征:
1.桿狀病毒作為載體:桿狀病毒具有有效感染昆蟲細胞并將外源基因引入其基因組的能力。這些病毒可以被改造成攜帶和表達感興趣的基因,使其成為昆蟲桿狀病毒蛋白表達的有用載體。
2.昆蟲細胞系:昆蟲桿狀病毒表達系統主要利用來源于秋粘蟲(草地貪夜蛾)或卷心菜環蛾(Trichoplusia ni)的昆蟲細胞系。這些細胞系,如Sf9和Sf21,由于其高轉染效率和支持強大病毒復制的能力,通常用于蛋白表達:如昆蟲sf9細胞表達、昆蟲sf21細胞表達。
3.蛋白質折疊和翻譯后修飾:昆蟲細胞擁有一種真核細胞機制,能夠進行適當的蛋白質折疊和譯后修飾,如糖基化和磷酸化。該系統對于生產需要這些修飾以獲得適當功能的復雜且具有生物活性的重組蛋白是特別有利的。
4.高蛋白產量:昆蟲桿狀病毒表達系統以其產生高產量重組蛋白的能力而聞名。桿狀病毒可以有效地感染昆蟲細胞并在其中復制,從而導致高水平的蛋白質表達。該系統對難以在其他系統(如細菌或哺乳動物細胞)中表達的蛋白質特別有益。
5.懸浮培養:昆蟲細胞可以在懸浮培養中生長,從而可以大規模生產重組蛋白,懸浮培養系統為大量生產蛋白質提供了可擴展性和易操作性。
6.安全性:昆蟲桿狀病毒表達系統被認為是安全的,因為桿狀病毒是昆蟲特有的,不會感染脊椎動物,包括人類。昆蟲桿狀病毒表達系統在生物安全方面提供了額外的優勢,并避免了與基于哺乳動物細胞的表達系統相關的潛在風險。
7.下游加工:昆蟲桿狀病毒表達系統中產生的重組蛋白通常分泌到培養基中,簡化了下游加工。在收獲培養基后,可以使用各種色譜和過濾技術來純化蛋白質。
8.蛋白質復合物和多聚體蛋白質:昆蟲桿狀病毒表達系統適用于生產蛋白質復合物或多聚體蛋白,允許多個亞基的共表達或融合蛋白的產生,促進生物相關復合物的產生。
9.靈活性:昆蟲桿狀病毒表達系統在啟動子選擇、載體設計和基因表達調控方面提供了靈活性,允許使用強啟動子,如多面體啟動子,來驅動高水平的蛋白質表達。
但是昆蟲桿狀病毒表達系統也有其不可忽視的缺點:過程復雜且耗時;由于容納DNA量有限,會限制有效表達的基因或蛋白質的大小;盡管昆蟲細胞為蛋白質表達提供了真核環境,但它們所進行的翻譯后修飾可能與哺乳動物細胞中的不同等。
總的來說,昆蟲桿狀病毒表達系統是生產高產率和適當折疊的重組蛋白的有力工具,其進行翻譯后修飾的能力及其生物安全特性使其被廣泛選擇。