使用柱前衍生及柱后衍生法進行食品及飼料中伏馬毒素檢測
✦ 關于伏馬毒素 ✦
伏馬毒素 (Fumonisin FB) 是一種霉菌毒素，是由串珠鐮刀菌產生的代謝產物。主要污染糧食及其制品，并對某些家畜產生急性毒性及潛在的致癌性，已成為繼黃曲霉毒素之后的又一研究熱點。目前我國現行標準《食品安全國家標準食品中真菌毒素限量》（GB2761-2017）尚未涉及伏馬毒素的限量，不過在《飼料衛生標準》（GB 13078—2017）規定了部分飼料原料和飼料產品中的FB1和FB2總量的限量標準。其中飼料原料玉米及其加工產品、玉米酒糟類產品、玉米青貯飼料和玉米秸稈中伏馬毒素的限量為 60 mg/kg，其他飼料產品中伏馬毒素的限量在5～50 mg/kg。
✦ 關于檢測方法✦
GB 5009.240-2023 食品安全國家標準 食品中伏馬菌素的測定 （將于2024年3月實施）LS/T 6130-2017 糧油檢驗 糧食中伏馬毒素B1、B2的測定 超高效液相色譜法
本方案采用IAC-107伏馬毒素免疫親和柱
IAC-107伏馬毒素免疫親和柱能夠特異性的純化與濃縮樣品中的伏馬毒素B1 、B2 、B3 . 伏馬毒素免疫親和柱廣泛地應用于糧食、食品、飼料、等樣品的提取，該方法速度快、操作簡單、準確性高，對準確靈敏的測定樣品中的伏馬毒素起到十分重要的作用。
✦ 操作流程✦
一、樣品前處理1.樣品提取及稀釋
1.1 稱取25.0g(精確到0.1g)過篩樣品于均質杯中,加入乙腈水(5+5) 100mL，以均質器高速攪拌提取2min或振蕩提取20min,定量濾紙過濾。
1.2 移取2.0mI濾液加入48mL0.1%的吐溫/PBS稀釋混勻。
2.樣品凈化
2.1將免疫親和柱連接于玻璃注射器下準確移取50.0mL上述樣品溶液注入玻璃注射器中。
2.2將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約1滴/s的流速緩慢通過免疫親和柱,直至空氣進入親和柱中。
2.3用10mL水淋洗親和柱流速為1滴/s~2滴/s.直至空氣進入親和柱中,棄去全部流出液，抽干小柱。
2.4準確加入3mL甲醇-乙酸溶液( 98+2 洗脫流速約為1滴/s,收集洗脫液。50°C下氮氣濃縮吹干后，用乙腈水 (5+5) 定容至1 mL，待檢測。
二、液相條件及衍生方法
柱前衍生法
色譜柱: Cloversil-C18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流動相: 甲醇:0.1MNaH2PO4(77: 23 體積比)用磷酸將PH值調到3.3
檢測器: 激發波長335nm 發射波長440nm
進樣體積: 20uL
衍生方法：取100uL標準溶液或樣品凈化液于進樣瓶中加入100uL OPA衍生試劑A渦旋混合30s，在 2分鐘內進樣分析。
柱后衍生法
色譜柱: Cloversil-C18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流動相: 甲醇/(65+35)
檢測器:激發波長335nm發射波長440mm
進樣體積: 20uL
衍生泵流速: 0.4mL/min
衍生溫度: 50℃
衍生泵流動相: OPA行生試劑B
HP-L10柱后衍生系統
HP-L20柱后衍生系統
✦ 實驗結果✦
1、柱效回收：
2、樣品添加回收：取玉米樣品，伏馬B1B2B3混標添加各1000ppb。
3、標準品及樣品圖譜
圖1 柱前衍生標準品液相色譜圖（出峰順序B1，B3，B2）
圖2 柱后衍生標準品液相色譜圖（出峰順序B1，B3，B2）
圖3 玉米本底液相色譜圖
圖4 玉米加標液相色譜圖✦ 訂購信息✦
本方案所需要的產品及儀器見下表| C/N編號 | 物品 |
| HP-L10 HP-L20 |
CLOVER柱后衍生裝置 |
| C1015 | 鄰苯二甲醛 (HPLC 法用) |
| C1016 | 2-疏基乙醇(HPLC 法用) |
| ZJ0612 | 科樂福 CLOVER 多位位泵流操作架(配有1臺空氣泵，6個10mL 針簡) |
| 20202 | 高速勻質器，轉速可達 18.000 r/in~22.000 r/min |
| 31955-C | 科樂福 CLOVER微纖維濾紙 (1.5um，100 張/盒) |
| 31240-C | 折疊式槽紋濾紙 (100 張/盒)，或中速定性濾紙 |
| 36010-C | 一次性塑料燒杯(25/包) |
| 34000-C | 一次性無熒光測試管(250 支/包) |
| 36020-C | 塑料漏斗(10 個/包) |
| CLOVER-1ST7224/5/6 | 伏馬毒素標準品 B1/B2/B3 |
| 35016 | 色譜純級的甲醇(4升/瓶) |
| C546150-U | 科樂福 Cloversil C18 反相色譜柱 4.6*150mm (5um) |
| C546250-U | 科樂福 Cloversil C18 反相色譜柱 4.6*250mm (5um) |
| FCMF3-CCP320C | 玉米、飼料等基質含有不同水平伏馬毒素的質控樣品(FAPAS/Trilogy) |
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