今天是小編居家的第66天，今天不聊疫情，聊聊病毒。本次疫情爆發(fā)的原點是奧密克戎突變株BA2，相比早期的病毒，本次突變體具有隱匿性高，傳染性強等特點。新病原體及其突變株的出現(xiàn)對抗擊傳染性疾病的新疫苗和新療法研發(fā)提出更嚴峻的考驗。疫情就是命令，時間就是生命。高通量流式細胞分析技術可高效助力藥物和疫苗研發(fā)人員，加速病毒生物學和宿主免疫反應表征等研究的工作流程。

接下來，小編帶您回顧兩個典型研究案例，一起了解iQue®高通量流式細胞儀在病毒學研究中發(fā)揮的獨特作用吧！ COVID-19席卷全球伊始在世界各地傳播速度非常之快，這也使得有效的SARS COV-2疫苗和治療劑成為全球健康的迫切需要。作為一種新出現(xiàn)的病原體，必須對該病毒的各方面都進行研究，包括了解其體液免疫應答以及快速出現(xiàn)的傳染性增強的變種。

來自哈佛大學醫(yī)學院的Mercado等人^[1]使用iQue®對中和抗體滴度進行定量，并對編碼全長穩(wěn)定SARS-CoV-2棘突蛋白復制能力不強的重組腺病毒載體的免疫細胞功能進行深入的研究。研究人員開發(fā)出了一系列可編碼SARS-CoV-2棘突蛋白不同變體的載體，并對它們的免疫原性和保護效果做了評估。也對抗體依賴性中性粒細胞吞噬作用（ADNP）、細胞吞噬作用（ADCP）、補體沉積（ADCD）以及自然殺傷激活（ADNKA）分析等效應子功能進行了研究。2021年2月，強生公司獲得美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）對Ad26.COV2.S疫苗的緊急使用授權。 (A) 本文展示了一種基于iQue®高通量流式細胞儀的快速定量ADCP分析設計及工作流，用以研究抗體開發(fā)領域的作用機制。可以測試候選抗體結合經過精心改造以顯示病原體抗原的靶細胞的能力。然后，該分析以高通量和多參數(shù)的方式為單核細胞的吞噬作用提供熒光讀數(shù)，并報告細胞活性，并且可以對其他感興趣的分泌蛋白（如細胞因子或效應蛋白）進行多重讀數(shù)。(B) iQue®的簡化工作流程只需最少的清洗步驟，即可實現(xiàn)快速分析設置、采集和集成數(shù)據(jù)分析。

在開發(fā)疫苗的同時，研究人員基于COVID-19患者的不同臨床軌跡，探索了構成這些軌跡的免疫機制和血清學特征。來自哈佛大學的Atyeo等人^[2]使用iQue®高通量流式細胞分析平臺評估患者血漿樣本中的抗原特異性抗體亞類、同型、唾液酸、半乳糖及Fcγ受體結合水平。還使用該平臺對血漿樣本進行功能分析，以便對ADCP、ADNP、ADCD和ADNKA定量。作者在結果不同的個體中觀察到了不同的抗體特征。可以看出，龐大的數(shù)據(jù)量的背后，必須有一套完整的數(shù)據(jù)采集、篩選及分析工具輔助科學家很好地完成工作。iQue Forecyt®軟件可以在數(shù)分鐘內快速從采集轉變到分析，平臺與之相結合之后，無需進行數(shù)據(jù)外推和導出，即可輕松將數(shù)據(jù)可視化并快速進行解釋，對于復雜的生物分析也是如此。
Summary

以上研究證明，使用多功能iQue®可以提高通量，簡化數(shù)據(jù)分析，應用于各種多重檢測分析中，包括抗體同型、中和及功能研究，以及數(shù)據(jù)分析與作圖。

iQue®高通量流式細胞術平臺旨在不降低先進分析能力的前提下簡化蛋白分析、免疫表型、功能評估和分析，包括抗體篩選及免疫細胞激活。可以在單個多重分析中，使用每孔低至1-2 μL的樣品同時測定表型變化、增殖率及分泌因子等細胞特異性參數(shù)，從而獲得更加深入的生物學結果。

iQue®采用獲得專利的采樣方法，可達到業(yè)內最快的樣本采集速度。該平臺還可以快速處理多個檢測培養(yǎng)板的數(shù)據(jù)，兼容96、384或1536孔板配置，并可連接任何自動化系統(tǒng)，連續(xù)加載孔板。

鑒于這種獨特的取樣方法只使用幾微升的樣品，所以，研究人員可以保存檢測試劑和寶貴的患者來源樣品，同時保留材料，以供進一步的下游表征研究使用。

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-參考文獻-

1.Mercado NB, Zahn R, Wegmann F, et al. Single-shot Ad26 vaccine protects against SARS-CoV2 in rhesus monkeys. Nature. 2020;586(7830):583-588. doi: 10.1038/s41586- 020-2607-z.

2.Atyeo C, Fischinger S, Zohar T, et al. Distinct early serological signatures track with SARS-CoV-2 survival. Immunity. 2020; 53(3):524-532.e4. doi: 10.1016/j. immuni.2020.07.020.