Morris水迷宮實(shí)驗方法
實(shí)驗開始先將小鼠放入水池中(不放平臺)自由游泳2min使其熟悉迷宮環(huán)境。實(shí)驗共歷時5d,每天定于固定時間段,每個時間段訓(xùn)練4次。訓(xùn)練開始時, 將平臺置于 NW 象限,從池壁四個起始點(diǎn)的任一點(diǎn)將小鼠面向池 壁放入水池。自由錄像記錄系統(tǒng)記錄小鼠找到平臺的時間(逃避 潛伏期)和游泳路徑,4次訓(xùn)練即將小鼠分別從四個不同的起始點(diǎn) (不同象限)放入水中。Morris水迷宮實(shí)驗方法小鼠找到平臺后或120s 內(nèi)找不到平臺(潛伏期記為 120s),則由實(shí)驗者將其拿上平 臺,在平臺上休息15s再進(jìn)行下一次試驗。每天以小鼠4次訓(xùn)練 潛伏期的平均值作為小鼠當(dāng)日的學(xué)習(xí)成績。
第6天撤除原平臺,將小鼠任選 1 個入水點(diǎn)放入水中,所有小鼠必須為同一入水點(diǎn),記錄大鼠在2min 內(nèi)跨越原平臺的次數(shù)。
注意事項
在實(shí)驗過程中注意事項尤為重要,只有注意這些外部因素才能使實(shí)驗不受影響順利進(jìn)行,而且實(shí)驗數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確。
1、對比食物驅(qū)動的模型,水迷宮實(shí)驗的最大優(yōu)點(diǎn)在于,動物具有更大的、逃離水環(huán)境的動機(jī)。而且不必禁食,特別適合老年動物的測試。加上它對衰老引起的記憶減弱尤其敏感,因此,水迷宮最常用于老年動物記憶的研究。
2、每天在固定時間測試。操作輕柔,避免不必要的應(yīng)激刺激。懸尾應(yīng)激可顯著損傷小鼠的空間記憶及其反轉(zhuǎn)學(xué)習(xí)的獲得和鞏固,其中相對空間記憶及其反轉(zhuǎn)學(xué)習(xí)的鞏固受損尤為嚴(yán)重,所以在實(shí)驗過程中避免小鼠懸尾時間過長。
3、當(dāng)與其他同類實(shí)驗相比較時,要注意到動物的性別、品系、泳池的尺寸和水溫等多種因素對實(shí)驗結(jié)果的影響。此外,當(dāng)以游泳速度作為觀察指標(biāo)時,要考慮到動物的體質(zhì)量、年齡以及骨骼肌發(fā)育狀況等對游泳速度可能造成影響。
4、用老年動物進(jìn)行實(shí)驗時,應(yīng)確認(rèn)動物的游泳能力和視力不因年齡增大而影響行為操作。其方法如下:將平臺露出水面使動物能夠看見平臺。動物放入泳池后如毫無困難地直接游向平臺,說明動物的游泳能力和視力均正常,可以開始實(shí)驗。
5、 游泳對動物是一個較大的應(yīng)激刺激,可引起神經(jīng)內(nèi)分泌的變化。這些變化可能對實(shí)驗結(jié)果造成干擾。對老年動物,嚴(yán)重時可誘發(fā)心血管疾病而導(dǎo)致卒中甚至死亡。因此,必要時可將動物多次放入泳池或適當(dāng)延長其游泳時間以增加動物對游泳的適應(yīng)能力。
6、水迷宮實(shí)驗過程中,水面布光和對外界環(huán)境的隔離要求很高,水面的陰影會干擾實(shí)驗結(jié)果,外界工作人員或者其他物體移動會干擾實(shí)驗動物的記憶,所以水迷宮外的一切物品在實(shí)驗的始終要保持不變。
Morris水迷宮是利用小鼠尋找水中的休息場所的本能,通過定位航行試驗和空間探索試驗兩個部分來測 試小鼠對空間位置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。在實(shí)驗過程中注意事項不容忽視,只有注意這些外部因素, 才能使實(shí)驗不受影響順利進(jìn)行,而且實(shí)驗數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確。
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