1985年,Steru等建立懸尾實驗方法,其原理主要是:將小鼠尾巴懸掛,小鼠頭部向下成倒懸體位,剛開始小鼠會劇烈掙扎試圖逃脫這一不適的狀態,但掙扎一段時間后發現逃跑無望會表現出不動狀態,也被認為是一種“絕望”狀態。懸尾實驗以懸尾小鼠的不動時間為指標檢測動物的絕望行為,是抗抑郁藥物初篩以及檢測模型動物是否出現“抑郁樣”行為的常用檢測實驗。
 

• 實驗軟件

VisuTrack動物行為分析軟件采用動物輪廓識別技術，針對抑郁實驗的特點單獨開發的識別算法，可精確辨別動物的四肢。先識別動物的全部身體形態，然后計算動物特征身體部位，針對于每一個身體部位的動作獨立分析。分析更細致，結果更準確，數據更客觀。

• 測試方法

在小鼠懸尾實驗中，將小鼠尾巴 3 /4 處固定在某 一掛鉤上，離地面 30 厘米左右，并在與小鼠懸掛裝置 水平方向放置攝像頭。實驗過程中，需要有“實驗組” 與“控制組”，分別是用藥與未用藥小鼠，注射藥物一 段時間后進行實驗(皮下注射需等待 30 分鐘，口服藥 物則需要等待 60 分鐘)。

懸尾實驗多采用小鼠,其操作方法如下 :

(1) 實驗開始前,動物尾部懸吊使小鼠呈倒懸體位,頭部應與懸尾箱底面保持一定距離。

(2) 如同時進行多只動物實驗時,每兩只動物間應用不透明擋板隔開。

(3) 記錄檢測期動物的不動時間。

(4) 實驗時間應為 6 min,記錄后 4 min 內動物的不動時間。

• 評價指標

用不動、運動掙扎二類動作行為的時間進行判定。

(1)搖擺不動：動物停止掙扎,身體保持垂直倒懸狀態,靜止不動。動物的在懸尾實驗中的不動時間越 長表明抑郁程度越重。空白對照組 c57 小鼠不動時 間較長,均值多大于100s;空白對照組 ICR 小鼠不 動時間均值多小于 100 s;抑郁行為判斷標準:不動時間與對照組相比有顯著性增加(P < 0. 05)。

(2)運動掙扎：動物有明顯可見的掙扎運動。運動掙扎時間越短,表明抑郁程度越重。

• 注意事項

1、TST 懸尾實驗不建議用較重的大鼠，因為大鼠只能通過它們的尾巴來支持它們的體重，這對大鼠來說是痛苦的。同樣的道理，應該注意避免使用異常重的小鼠（例如用于模擬肥胖的小鼠），在這種情況下，實驗者應該尋找替代性的測試，例如強迫游泳實驗。

2、動物從居住環境帶入實驗環境應適應一段時間，通常至少一個小時。

3、實驗環境應保持安靜，突然大的噪音會使小鼠驚慌失措。

4、使用軟件分析時，選擇對比度的背景：白鼠使用黑色背景，黑鼠使用白色背景；也可選擇使用由上海欣軟信息科技有限公司生產的帶背光板的專業懸尾實驗設備；對老鼠的顏色沒有要求，更可拍攝出高質量，高對比度的實驗錄像。

​5、每只小鼠的實驗的參考空間在 55 高*15 寬*11.5 cm 左右，多通量實驗時，為防止動物彼此觀察或互相影響，中間用隔板隔開；動物懸掛在隔間中間，寬度和深度足夠大，不能與墻壁接觸。

6、懸掛后動物鼻尖與設備地板之前的參考距離在 20~25 cm 左右。

7、底部建議放置一個可拆卸的拖盤，收集糞便或尿液。

8、懸掛用的膠帶應牢固地粘貼在小鼠尾部和懸掛桿上，并且足夠堅固以承受正在測試的小鼠的重量。但是，膠帶不應該過于粘滯，因為在實驗結束會從尾部移除。膠帶尺寸應統一，長度 17 厘米，從一端 2 厘米做標記。這個 2 厘米的部分用于將膠帶連接到尾部，而剩余的 15 厘米用于懸掛小鼠；膠帶應貼在尾部的尾端，尾部留 2-3 毫米的距離。

9、尾巴攀爬阻止器，小鼠在實驗過程，會出現追求和攀爬它們自己的尾巴的現象，這是個普遍的問題。解決方法很簡單，而且非常有效：將一段塑料管切成 4 cm 長中空圓柱體（內徑 1.3 cm 左右，1.5 g）放置在小鼠尾巴周圍就能防止這種尾巴爬行行為。注意的是，在沒有使用阻止器之前，已經成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此應將這類小鼠排除。

10、分析時僅有前肢但沒有后肢介入的小動作可判斷為不動；因慣性產生的擺動可判斷為不動；

11、實驗結束后（通常是 6 分鐘），將動物放回鼠籠，應輕輕將膠帶從尾巴上拉下來，不要從尾巴上撕扯膠帶，避免給動物帶來痛苦；

12、清潔用品，每次實驗完成，收集糞便和尿液，徹底擦拭懸掛盒。

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