細胞核 (nucleus) 是真核細胞內最大、最重要的細胞結構,作為細胞遺傳與代謝的調控中心,是真核細胞區別于原核細胞最顯著的標志之一。MCE 提供的細胞核熒光探針可對細胞或組織直接染色,從而實現對細胞核的定位,確定細胞在組織中的分布,并追蹤細胞從有絲分裂到凋亡整個過程中細胞核的變化。
表 1. 用于細胞核熒光試劑
圖 1. HA-nsp4 載體轉染 PK-15CD163 細胞[1]
轉染 24 小時后進行細胞固定,用膽固醇染料 Filipin (藍色) 確定膽固醇含量。細胞核用碘化丙啶 (紅色) 復染。
鬼筆環肽 (Phalloidin) 是從鬼筆鵝膏中分離到的一種環狀七肽毒素,以極高的親和力和特異性結合肌動蛋白絲 F-actins。通常將鬼筆環肽與熒光染料偶聯來研究細胞中 F-actins 的分布。
熒光標記的鬼筆環肽極少會非特異性染色,染色和未染色區域之間的對比度非常大,可使 F-actins 高效染色。
表 2. MCE 細胞骨架熒光試劑
圖 2. MDA-MB-231 細胞、CTCF-in 細胞的細胞骨架[2]
共聚焦顯微鏡捕獲細胞。藍色通道,細胞核 Hoechst 染色;紅色通道,F-actins 被 Rhodamine Phalloidin 染色;以上通道的組合;白色循環和箭頭,擴散的細胞周肌動蛋白纖維。
ΔΨm 即線粒體膜電位 (mitochondrial membrane potential, MMP),它的變化是反映線粒體活力的重要參數。線粒體膜電位越高,線粒體產生的能量越多,越能促進細胞能量轉換。線粒體膜電位下降是細胞凋亡早期的標志性事件。
MCE 線粒體膜電位熒光試劑,可以快速檢測線粒體膜電位下降,作為細胞凋亡早期的檢測指標。JC-1 線粒體膜電位試劑盒 (HY-K0601) 同時提供 CCCP 作為誘導線粒體膜電位下降的陽性對照,可用于細胞、組織或純化的線粒體等樣本的線粒體膜電位檢測。
表 3. 線粒體膜電位熒光試劑
細胞膜主要是由磷脂構成的富有彈性的半透性膜,為細胞結構中分隔細胞內、外不同介質和組成成分的界面。Di 系列熒光試劑可側向擴散染色整個細胞,是便捷的細胞輪廓標記物,DiO、DiI、DiD 被激發后分別發出綠色、橙紅色、紅色熒光。
細胞質是細胞質膜包圍的除核區外的一切半透明、膠狀、顆粒狀物質的總稱。在細胞增殖與活性相關研究中,細胞質染料可用于分析細胞活性、監測細胞的形態和位置等。
圖 6. CFSE 染色
PC-3 細胞用載體或 MTX 處理 20 小時,收集細胞并用 CFSE 標記。與 CellTracker Deep Red 標記的 MoDCs 細胞共孵育 2 小時,流式細胞術分析細胞吞噬作用。
關于細胞染色,小 M 今天就介紹到這里了,小伙伴們有沒有 Get 到新技能呢?
參考文獻