新冠疫苗保護性能評估
為了應對新冠疫情威脅，目前已經(jīng)有很多國家開始了疫苗接種工作，但接種新冠疫苗后，產(chǎn)生的保護效果并不確定，評估新冠疫苗有效性的重要指標之一就是接種者體內(nèi)中和抗體的含量。針對大規(guī)模疫苗接種后的人群，使用簡單、快速的膠體金免疫層析法，可快速評估每個接種者體內(nèi)的抗RBD抗體及中和抗體的水平。

RBD結(jié)合抗體

采用膠體金免疫層析技術(shù)，通過雙抗原夾心法測試RBD結(jié)合抗體：取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū)，血清會在毛細作用下向前層析，結(jié)合墊上的膠體金會溶解，然后和血清一起向前移動。血清到達檢測區(qū)后，膠體金標記的S-RBD、血清中的抗體與檢測線上包被的S-RBD形成復合物，表現(xiàn)為檢測線顯色，血清中的抗體含量與檢測線顯色強度成正相關(guān)。反應結(jié)束后，直接肉眼觀察顯**況或采用膠體金檢測儀進行測試。通過檢測線和質(zhì)控線上膠體金顯色強弱，可判斷RBD抗體的含量。該方法可檢測血清、血漿及其他分泌物中含有可與RBD相互作用的任何抗體，并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

膠體金免疫層析檢測RBD結(jié)合抗體

應用場景

血清中RBD抗體篩查、早期患者血清學診斷及疫苗臨床效果評價—抗RBD總抗體檢測。

測試結(jié)果

標記: 膠體金標記S-RBD (b46003P)和膠體金標記兔IgG (0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (0295G)，T線為S-RBD (46003P/46005P)

備注：“+++”表示反應很強；“++”表示反應較強；“+”表示反應較弱；“±”反應很弱；“-”表示無反應。

RBD中和抗體

采用膠體金免疫層析法的競爭法測試RBD中和抗體：取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū)，血清會在毛細作用下向前層析，結(jié)合墊上的膠體金會溶解，然后和血清一起向前移動。血清到達檢測區(qū)后，膠體金標記的S-RBD與檢測線上包被的ACE2結(jié)合，并被固定在檢測線上，表現(xiàn)為檢測線顯色，而血清中的中和抗體會與檢測線上的ACE2競爭結(jié)合S-RBD，從而導致固定在檢測線上的S-RBD減少，檢測線顯色下降。反應結(jié)束后，直接肉眼觀察顯**況或采用膠體金檢測儀進行測試。通過檢測線和質(zhì)控線上膠體金顯色強弱，可判斷中和抗體抑制效果。該方法可檢測血清、血漿中可阻斷RBD-ACE2相互作用的任何抗體，并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

膠體金免疫層析檢測RBD中和抗體

應用場景

疫苗臨床效果評價、康復者血清中保護性抗體水平檢測—模擬病毒侵襲細胞過程，通過阻斷RBD與ACE2的結(jié)合間接評價機體內(nèi)抗RBD中和性抗體的水平。

測試結(jié)果

標記: 膠體金標記RBD (46003P)和膠體金標記兔IgG (0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (0295G)，T線為Human ACE2 (46001P/46002P)

由此可見，陰性血清無中和活性，而陽性血清中含有中和性抗體，血清稀釋倍數(shù)在1:200時可完全阻斷RBD與ACE2的結(jié)合。