數(shù)字PCR應(yīng)用文獻(xiàn)|用數(shù)字PCR方法單次實(shí)驗(yàn)同時(shí)檢測EGFR活化突變位點(diǎn)和耐藥突變位點(diǎn)

通常生物學(xué)樣本量有限，通過單次實(shí)驗(yàn)獲得足夠多的信息對于研究人員和診斷人員至關(guān)重要。Naica^TMcrystal數(shù)字PCR系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了單次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)檢測和定量多重生物標(biāo)志物，并確保數(shù)據(jù)精準(zhǔn)度和可信度，通過3個(gè)不同的熒光通道，非常明確地區(qū)分靶標(biāo)位點(diǎn)。這種簡單快速的技術(shù)平臺(tái)能夠兼容多種熒光染料組合，大大地?cái)U(kuò)展了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的可能性。

在NSCLC（非小細(xì)胞肺癌）治療中，EGFR（表皮生長因子受體）是重要的藥物作用靶點(diǎn)。EGFR活化突變位點(diǎn)，如L858R和L861Q用于預(yù)測TKIs（酪氨酸激酶抑制劑）藥物藥效，同時(shí)EGFR T790M突變用于一代TKIs藥物耐藥預(yù)測。

為能夠在單次實(shí)驗(yàn)中評估TKIs藥物反應(yīng)，在Naica^TMcrystal數(shù)字PCR系統(tǒng)上進(jìn)行的多重?cái)?shù)字PCR實(shí)驗(yàn)，實(shí)現(xiàn)了同時(shí)檢測EGFR L858R、L861Q、T790M和野生型EGFR。在野生型背景下，可以成功并準(zhǔn)確地檢測到終濃度低至0.25 copies/µL的突變，對應(yīng)的突變檢測限為0.05% (Figure A，B，C)。
 

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