由于更能模擬人類的生理和病理條件，所以在科研上，動物實驗獲得的結果，比體外實驗更具有說服力。在腫瘤增殖方向的研究中，也通常會構建相應的動物模型來開展進一步的研究，皮下注射模型是最常規的方式。

那么如何構建腫瘤皮下注射模型呢？

關鍵三點做到位，腫瘤皮下注射模型so easy!

選取什么樣的樣本進行注射？

1. 組織塊

選擇生長良好，無液化壞死的魚肉狀的腫瘤組織塊進行接種。這樣的腫瘤組織生命力旺盛，活力強。當然，為了保證成功率，接種的時間也很關鍵，最好是切除后1小時內就接種。

組織塊一般來源于臨床的腫瘤樣本，或是在動物體內已經建立的腫瘤模型樣本。

臨床樣本直接進行接種能較好的保持病人腫瘤的特性，因其含有較全的腫瘤生長微環境，可以為臨床藥物提供最有效的指導；但是其來源比較困難，在動物體內致瘤性也較差。

已經建立腫瘤模型的樣本大大提高了其再次成瘤的能力，一個瘤體可以切成十幾二十幾份進行接種，也很大程度上降低了細胞培養的成本，適合一些成瘤能力較弱的腫瘤細胞。但是它也是需要先通過細胞注射建立腫瘤模型，且由于接種的樣本都是靠人工剪切，很難保證接種后成瘤的均一性。

2. 腫瘤組織懸液

選取生長狀態良好，活力強的腫瘤組織，加生理鹽水或細胞培養液在勻漿器內研磨制成懸液后進行接種。

它一定程度上可以提高成瘤的均一性，但是研磨勻漿的過程容易導致樣本活性降低，使其成瘤能力減弱。

3. 腫瘤細胞

取處于生長旺盛的腫瘤細胞進行移植。

腫瘤細胞接種時可以進行細胞計數，可控性較強，均一性也較好。

但是目前常見的一些細胞系的“年齡“較大，大部分都歷經了幾百上千代的培養，細胞的基因組和行為可能都已發生了改變。

因此，最終可以根據研究課題的實際情況進行合理選擇。

要選擇什么樣的動物進行注射呢？

1. BALB/c裸鼠：先天性胸腺發育缺陷，無被毛，T細胞功能缺失。其較好的成瘤能力以及無毛便于觀察的特性使其成為腫瘤模型中最常用的工具鼠。

2. NOD-SCID鼠：先天性T、B、部分NK淋巴細胞聯合免疫缺陷動物，其免疫缺陷程度比裸鼠更徹底，但是有白色被毛，不便于接種及觀察。

3. NSG/NOG/NCG小鼠：NOD/SCID 鼠遺傳背景，Il2rgnull，其NK細胞活性幾乎喪失，是目前免疫缺陷程度最高的工具小鼠。但是由于價格比較昂貴，來源較少，目前使用并不廣泛。

通常情況下選擇裸鼠建立腫瘤模型即可，如腫瘤惡性程度非常低，可以考慮使用免疫缺陷程度更徹底的工具小鼠，如需要建立其他特殊的模型則需要根據實驗目的選用合適品系的實驗動物進行實驗。

要注射在哪些部位？

在選擇接種部位時我們需要根據不同的癌種/細胞，不同的實驗目的等因素綜合考慮。

首先，腫瘤需要通過血管吸收宿主的營養成分以供其生長，所以一般情況下可以接種在腋下、腹股溝、頸背部等血管豐富的地方。

其次，腫瘤需要一定的空間供其生長，所以需要選擇皮膚寬松的地方，如背部兩側。

另外，還需要考慮到實驗人員觀察、測量的便利性，以及盡可能降低對動物正常生理活動的影響，所以頭部、腹部、四肢附近等部位都不是第一選擇。

最后，就是實驗目的的考慮，或是一些特殊癌種的需求；如乳腺癌接種脂肪墊研究其原位成瘤及轉移能力；黑色素瘤接種于皮內以提高其致瘤性。

經驗拿好！

1. 需要對有被毛的小鼠接種時，可以在接種前2-3天對接種部位使用物理（剃毛器）或化學（脫毛膏）方法進行脫毛處理，一旦出現傷口小鼠也有時間愈合，不至于影響接種實驗。

2. 實驗動物從其他地方購買過來后需要1-2天的適應期，以免動物發生應激反應，影響成瘤效果。

3. 腫瘤細胞接種前一天對細胞進行消化傳代，可以使細胞處于對數生長期，保證細胞活性，細胞在收集前，細胞匯合率不要太高， 70~80%即可。

4. 腫瘤細胞收集下來后如果無法及時接種，可用錫紙包裝，并存放于碎冰中，以防止細胞因溫度過高而導致結團或者細胞狀態不佳。

5. 細胞接種時，進針長度至少要超過半個針頭；進針時，針的斜面朝上；打完后慢慢抽針，針出來后壓一壓進針口和鼓出部位之間，防止細胞液流出來造成細胞數的差異。

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