腦缺血模型的制作：

制作腦缺血動物模型的方法很多，但常用方法主要有結扎法和栓塞法兩種，結扎法是運用外科手段結扎腦的供血動脈，中止腦的血氧供應，它可以進一步分為顱內結扎和顱外結扎。顱外結扎主要是用于制作全腦缺血模型，可進一步分為：①4血管結扎，即結扎頸總動脈/頸內動脈和椎動脈； ②2血管結扎，即結扎兩側頸總/頸內動脈，同時抽取動物一定量的血液，使血壓降低到50mmHg以下，達到造成全腦缺血的目的。

這種方法因為需要監視和控制血壓，實驗條件要求嚴格，且因椎動脈未予結扎，往往造成的腦缺血是不完全的。另一種兩血管結扎法是用沙土鼠（Gerbil）進行，利用沙土鼠腦底Willis動脈環發育不全后交通動脈缺如的特點，結扎兩側的頸總或頸內動脈造成前腦缺血。栓塞法是用自體血凝塊、塑料或玻璃微球來栓塞實驗動物頸動脈、腦內大動脈或微動脈，造成腦組織缺血模型，該法簡便易行，但可控性、可重復性差，且不能再灌流。

1. 實驗動物

實驗動物的選擇對腦缺血模型是非常重要的，理論上兔、貓、狗和靈長類都可被用來制作腦缺血模型，但更多的人傾向于選擇使用鼠作實驗。這主要是基于如下認識：因為鼠是小動物，價格便宜，軀體小，消耗藥品試劑較少；鼠的腦血管解剖和生理與高級動物無明顯差異；一些在體的實驗操作更容易進行，甚至在倫理學更容易接受等等。

2. 儀器和設備

制作腦缺血動物模型的儀器設備分為二類：一類是為動物手術服務，包括一套手術器械，手術顯微鏡，顱鉆，腦立體定位儀，溫度控制裝置（控溫儀、紅外線燈和加熱墊），呼吸機；另一類是用于監測和分析的儀器，包括腦電記錄裝置，血壓記錄裝置，多譜勒血流記錄儀，血氣血糖分析儀。

3. 四血管結扎腦缺血模型的制作

這是一個廣泛應用的腦缺血模型。最常用的為Pulsinelli的改良方法。該模型選用Wistar大鼠，可以在清醒和自由運動狀態下制作嚴重的腦缺血和恒定的病理學改變。該模型分二個階段制作，第一階段：將動物麻醉，按置在腦立體定位儀上，調節耳桿和門齒高度使鼠頭前傾約30度，同時用橡皮栓住鼠尾給以輕度的牽拉力，使頸椎伸直，翼孔呈水平位，便于觀察。枕骨下第一頸椎水平正中切口，仔細分離兩側第一頸椎橫突，暴露第一頸椎橫突上的翼孔，翼孔下有兩則椎動脈通過，用小的單極或雙極電凝器插入翼孔燒灼閉塞雙側椎動脈。然后動物取背位，頸部正中切口，分離頸動脈鞘，注意不要損傷迷走神經和頸動脈鞘后方的頸交感干。用外科縫線套住兩側頸總動脈（不要結扎），將線頭藏于皮下，簡單關閉切口；第二階段：待動物麻醉清醒后自由飲水，但禁食12～24小時后，將動物于清醒狀態下，取背位，分別用繩子固定四肢和門齒，以控制動物掙扎。小心分離頸前部的切口，辯認套在頸總動脈上的縫線，輕輕牽起，將線套收緊或者用微血管夾夾閉雙側頸總動脈。此時在2～3秒鐘內大鼠將昏迷并喪失對光反射。缺血后2～3分鐘可出現異常腦電圖，并持續到缺血結束。頸總動脈的關閉時間根據實驗設計而定，通常取10～20分鐘。昏迷和反射消失是缺血是否成功的標志。據統計約有四分之三的大鼠經上述二階段處理可導致缺血成功。缺血期間自主呼吸和角膜反射的存在提示腦干血液供應的存在，這是因為脊髓前動脈供血的原因。缺血結束后松開頸總動脈，動物通常很快清醒。但在24～72小時內將有一部分動物出現缺血性抽搐，如果缺血持續30分鐘，在24小時內將有20%、72小時有40%的鼠發生缺血性抽搐，這些發生抽搐的鼠在結果分析時應被排除。

約有四分之一的鼠缺血不成功，其中2/3是昏迷不完全，另外1/3死于呼吸衰竭。該模型的制作的關鍵是燒灼椎動脈，由于椎動脈不能直接看到，這就需要操作者具有一定的經驗，適當的掌握燒灼的時間和電極與翼孔的角度，同時要避免損傷腦干
 
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