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GELRED說明書使用方法簡(jiǎn)介

瀏覽次數(shù):4292 發(fā)布日期:2015-12-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

gelred一種高靈敏、低毒性和超穩(wěn)定于一身的極佳的熒光核酸凝膠染色試劑。具有廣泛適應(yīng)性和染色過程簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。下面簡(jiǎn)單介紹gelred使用方法

1.膠染法(用法同EB)

(1)制膠時(shí)加入GelRed 核酸染料(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000× 儲(chǔ)液,以此比例類推)。

(2)按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

注意事項(xiàng):

此方法染色染料用量相對(duì)較少。500 μL染料大約可以做100塊50mL的膠。

由于GelRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將GelRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。GelRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

含有染料的預(yù)制凝膠溶液可以大量制備,并長(zhǎng)期保存直到使用。   

此方法不適合預(yù)制聚凝膠,對(duì)于聚凝膠請(qǐng)使用泡染法。

2.泡染法

(1)按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

(2)用H2O將GelRed 10,000× 儲(chǔ)液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如將15μL GelRed 10,000× 儲(chǔ)液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。

(3)將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,最佳染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5~10%的凝膠,染色時(shí)間通常介于30min到1h,并隨含量增加而延長(zhǎng)。

注意事項(xiàng):

用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。

3× GelRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。

發(fā)布者:北京索萊寶科技有限公司
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