3. 根據(jù)實驗要求的特異性進(jìn)一步篩選二抗

Anti-IgG (H+L)是最常用也是性價比最高的二抗形式，這類抗體和IgG分子的重鏈和輕鏈都可以反應(yīng)，也可以和其他的免疫球蛋白家族（IgM，IgA，IgD,IgE）和亞家族反應(yīng)，因為所有的免疫球蛋白都有相同的輕鏈。 Anti-IgG，Fc fragment specific這類抗體和IgG重鏈的Fc部分反應(yīng)，與F(ab’)2或Fab無交叉反應(yīng)，但可能與IgM或IgA有交叉反應(yīng)；而抗IgG，Fcγ fragment specific則只與IgG重鏈反應(yīng)，通常不能和IgA或IgM任何表位反應(yīng)。 Anti-IgG，F(ab’)2 fragment specific則與Anti-IgG，Fc fragment specific則正好相反。

另外，與一個物種反應(yīng)的二抗可能與其他物種發(fā)生交叉反應(yīng)，除非這類抗體經(jīng)過其他物種的血清蛋白吸附實驗。如Jackson 的Horseradish Peroxidase-conjugated AffiniPure Mouse Anti-Goat IgG (H+L) (min X Ms, Hu, Rb Sr Prot) 小鼠抗山羊二抗，就是經(jīng)過了小鼠、人、兔血清的吸附， 其與小鼠、人、兔血清內(nèi)蛋白（包括免疫球蛋白）的交叉反應(yīng)降到最低。 當(dāng)其他物種免疫球蛋白的出現(xiàn)可能導(dǎo)致交叉反應(yīng)時，推薦使用這類抗體。