液閃測量技術在中醫藥研究中的應用及前景展望
瀏覽次數:9766 發布日期:2010-2-9
來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
液閃測量拄木是一種利用液體閃爍計數囂進行體外放射性測量的技木.最有利于探測離體樣品中3H、14C等發射的穿透力租弱的軟β射線。具有靈敏度高、特異性強等優點。這一技木的應用使中醫藥的研究更加深^,并已成為溝通傳統醫學與現代醫學的渠道,為中酉醫結合的研究作出了很大的貢獻。迄今,該技木已應用于中醫藥研究的各個領域,現將有關資料綜述于下:
1中草藥前研究中的應用
在已建立的40多種免疫檢測中草藥有效成分的方法中,放射免疫分析占70%以上.由于多采用H標記。因而液閃測量技術就顯得尤為重要。如青蒿素青蒿罱檢測方法的建立國外有學者應用該技術建立了測定鈣質生成植物中的總VD衍生物的方法.等等我國中草藥資源豐富,尋找新的活性成分是中藥研究的一項艱巨任務。
近年來液閃測量技術在中藥藥理研究中的應用更加廣泛。它不僅可以用來測定生藥及其在人體中的有敢成分,以及用藥后人體各微量生物活性物質含量變化,而且為中藥藥理研究深到分子水平做出了很大貢獻。
在中藥有效成份的研究中,太棗、茵胨、丹參等中藥中環核昔酸的含量,哈士蟆油中的睪酮、孕酮、雌二醇等甾體激素等均可用液閃進行測量。周文浴等人以3H小檗堿3H.誅片為示蹤劑.觀察大鼠外敷中藥消炎是的透皮吸收,用液體閑輯計數器檢測用藥大鼠血}瘦臟器組織、糞、尿的艘射性,結果表明:3H冰片的可能透皮量不足外敷總量的5%,外敷的3H小堿也大半留在體外;提示外敷中藥是能部分透過皮膚的,但透皮量有限.且因組分不同而異。推測外敷中藥對病變組織除可起部分直接作用外,可能還通過其它機制起作用。
根據放射免疫原理.應用液閩測量拄術可測定體外樣本中血栓素.前列腺素、環磷酸腺苷、宴質酮等微量物質含量。觀察用藥后這些微量物質含量變化是闡明中藥作用機理及指導臨床用藥的重要依據。鄧常青等通過檢測兔腦缺血再灌注損傷模型腦血栓紊TX&6-酮前列腺素及血漿和氈環磷酸晾苷的含量,對組成益氣活血方的黃芪和活血方的作用機理進行了比較研究,發現活血方和益氣活血方均可抑制兔腦映血再滟注后腦TX的升高,提高腦6一酮一前列腺索R含量。活血方還可抑制腦cAMP的升高,黃芪則對此無明顯影響。提示益氣活血法通過改善腦局部TXA2/PGI:平衡而起作用,且主要為活血藥物作用在研究周真方老年大鼠海馬和下丘腦一垂儺一腎上腺皮質軸(HPA軸)的作用中通過檢測血漿皮質酮含量,發現固真方能顯著降低老年大鼠增高的血漿皮質醇含量,結臺糖皮質澈素受體分析結果,加深了對諼方延緩老年大鼠海馬和HPA軸退化作用的認識。余林中等人在研究瘟膈散解熱作用機理中發現,該藥能抑制中樞性發熱介質PGB、cAMP合成釋放,繼而影響丘腦下部體溫調節中樞。
近年來,與分子生物學技術相結臺,液閃測量技術在中藥藥理研究深入到分子水平的過程中發揮了很大作用。李應東等人以外周血淋巴細咆非程序DNA臺成(UDS)為觀察指標,用3H標記DNA合成前體物質,通過液閃測量研究了莪木和硫酸鎳的遺傳毒性教應廈莪術對硫酸鎳誘導的^外周血淋巴細胞UDS的影響.發現莪術在一定劑量時可明顯減輕硫酸鎳對外周血淋巴細胞DNA的損傷,而其本身無致突變作用。但當莪術劑量達到1g/ml時,對DNA的修復造成已造成抑制。還有作者I在對抗衰老中藥原研究中,以3H甲基摻入法測定大鼠腦中DNA甲基化酶活性,發現在長期服用神方補臂生血藥后,該酶比活力增高,酶的熱穩定性和對NaC[的耐受力略有增強。并結臺蛋白成分的分折說明神方補腎生血藥可改變太鼠腦DNA甲基化酶活性和酶學性質.從而影響DNA甲基化水平,可能是該藥抗衰老作用的途徑之一。還有作者采用H摻入法檢鍘DNA聚臺酶和逆轉錄酶活性,證實了疏肝利膽沖劑具有明顯的抑制以上兩種酶的作用,為臨床用藥提供了實驗依據。
2中醫基礎理論研究方面的應用
中醫基礎理論具有豐富的內涵,但目前的中醫還不縣備用準確的理論概括其基術特征的能力,在從經驗醫學向科學醫學轉化的過程中應用現代化的檢測技術故方法為中醫服務是十分必要且行之有敬的。在舌苔原理的緣合實驗研究中,發現厚苔者Ac MP、cGMP同時升高,提示其細胞分裂和分化加速,而角化脫落相對延緩;病理白薄菩兩者均低于正常,薄黃苔兩者均高于正常,提示分裂和分化處于不同水平的相對平衡;剝脫者cAMP和eGMP水平亦較高則可能與某些母煮致使細胞過早變性壞死有關。
錢汝紅等人在內燥和內濕的實驗研究中,對五組大鼠(常體寒體、熱俸、內燥組、內濕組)分別進行研究,將其外周血淋巴細胞DNA經紫外線照射損傷,采用H摻入法培養后收集細胞液閌測定。通過觀察淋巴細胞DNA損傷后修復能力的差異,進一步探討體質類型及其轉變時的細胞學基礎。結果表明:內燥組的3H TdR揍入值小于熱體組,內濕組的3H -TdR摻入值小于寒體組,差異都顯著,提示DNA的3H TdR摻入值可作為區別正常體質和病理體質的指標之一。
在針刺研究中,應用液閑測量針剌后,體灘及組織中釬校苷酸、血栓索、前列環索等微量物質古量的變化,同樣有助于針剌作用機理的研究。有研究表明。針剌內關穴可抑制缺血心肌細胞內cAMP過度升高,可防止因細胞膜cd通透性增大而致的心率失常,減少心肌耗氧量;降低延髓組織中Ac MP、cGMP含量,通過訶整延髓心血管中樞,改善急性心肌靛血病人的心功能狀態;降低血中cAMP音量,說明針蒯內關可抑制機體過度強烈的應激反應。港免心臟負擔加重.利于缺血心肌的恢復。另有研究表明“針刺心經經脈和針觸肺經經脈均有降壓作用,且針剌心經降壓強度大于針刺肺經。其中升高血清前列環索水平是針刺降壓作用機理之一。
3中醫臨床研究方面的應用
中醫臨床以辨證施治為本,臨床醫生根據對患者望、聞、問、切所得資料,用八綱、臟腑辯證綜臺納丹型,又依據不同分型予以應治療,應用液閃測量技術對中醫疾病分型進行相關檢測以及對疾病病因、病理轉歸、預后予以科學分析.不僅為中醫臨床辨證施治提供科學依據,也闡明了中醫辨證實質和藥物作用環節。
應用液閑測量技術檢測中醫辨證患者體渡中活性物質或其它功能指標,并以此為辨證分型的基礎觀察其與中醫分型的關系。如:對虛寒、虛熱證患者尿PGE2,PGF2排出量的臨床觀察,發現虛寒患者尿PGE2排出量下降:虛熱患者尿PGE2排出量升高PGF2無明顯變化.PGE/PGF2值升高。提示PGE2、PGF2與中醫寒熱辨證密切相關。
4前景與展望
近年米,科研工作者應用液閃泓量技術在中醫藥研究中做了大量實際工作,并已探人到中醫的理、法、方、藥等各個領域,為中醫臨床辨證施治提供了科學依據,為進一步深人研究獲得了有價值的資料雖然液閃測量技術具有放射性同位素廢物處理困難,試劑成本較貴等不足之處,但由于其快速、精確、專一、樣品不需純化、超微量(最小測量值可達10 -15水平)等突出優點,仍無法被其它方法取代。而且.該技術與分子生物學等其它相關技術的聯合應用.使得中醫藥研究更加探人.甚至滲透到一些過去無法研究的課題。
綜上.積極地運用現代科學技術促進中醫自身發展,造已經成為絕大多數當代中醫人士的共識。液閃測量技術正在中醫藥研究中起著越來越大的作用,相信隨著研究的深入和發展。它必將為發掘中醫藥學寶,以及中醫現代化做出更大貢獻。
(天津中醫學院 王虹)