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小鼠小膠質細胞(BV2)培養要點及異常解決方案

瀏覽次數:1463 發布日期:2024-12-18  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
小鼠小膠質細胞(BV2)細胞特性

① BV2是一種半貼壁半懸浮細胞,它的形態并不規則,存在圓形和梭形兩種。懸浮細胞為圓形,貼壁細胞既有圓形也有梭形。由于圓形細胞折光率高,它的邊緣看起來是發亮的;梭形細胞則向兩端伸出黑色突起。

② BV2細胞傳代比例1:3-1:6,傳代周期2-3天,中途每2~3天需要進行補液或者換液,維持細胞所需營養。

小鼠小膠質細胞(BV2)注意事項

① BV2細胞凍存復蘇細胞貼壁性差,基本處于懸浮細胞狀態,細胞培養48小時后收集懸浮細胞和貼壁細胞,再次分瓶傳代,細胞會呈現多邊形貼壁細胞和懸浮細胞兩種形態。

② BV2細胞正常細胞形態為半懸半貼,傳代時收集懸浮細胞在和通過胰酶消化后的貼壁細胞合并一起分瓶傳代培養。


BV2細胞異常生長形態和解決方案

異常形態1:細胞全部飄起,完全不貼壁
① 培養基偏堿。培養瓶不透氣或者開封時間過長,培養基PH將增大,可見培養基呈紫紅色。BV2對培養基酸堿度較為敏感,在偏堿培養基中培養數小  時后將會全部飄起。

解決方案:給細胞換上新鮮配制的培養基,并使用透氣瓶。

異常形態2:細胞形態變為阿米巴樣

解析:小膠質細胞是一種可塑性極高的細胞,可通過特定因素激活,從而發揮其免疫功能。從靜息態變為激活態的過程中,小膠質細胞形態也隨之發生改變。

實驗中常用細菌脂多糖(LPS)和干擾素-γ(IFNγ),分別模擬細菌和病毒感染,來刺激小膠質細胞激活。受到刺激的小膠質細胞突起縮短變厚,胞體增大,呈現阿米巴樣,如果細胞沒有受到任何刺激,就已經呈現阿米巴樣,那么細胞有可能發生了自分化。

其原因可以從以下幾點考慮:

① 存在潛在微生物污染,刺激細胞自分化。

解決方案:通過去掉培養基中的抗生素確定污染類型,并排查污染源頭。

② 使用的胎牛血清內毒素高,內毒素刺激細胞自分化。

解決方案:嘗試使用其他胎牛血清品牌,或許能得到改善。

異常形態3:全都是分枝狀細胞,圓形細胞少

解析:這種形態往往伴隨著細胞生長慢或生長停滯的情況。由于圓形細胞增殖速度較快,在圓形細胞缺失的狀況下,整體增殖速度就會減慢。

解決方案:由于BV2是一種半貼壁半懸浮細胞,貼壁和懸浮細胞的比例并不固定,當懸浮細胞較多時,換液和傳代時要將懸浮細胞收集,避免圓形細胞的大量損失。
總而言之,BV2細胞的形態、生長狀態與其生長環境息息相關,給細胞以最合適的環境,嚴格按照要求規范操作。
發布者:蘇州海星生物科技有限公司
聯系電話:4009906627
E-mail:hfx@dingbio.com

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