肌酐 (Cr) 苦味酸法測(cè)定試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣

 
注   意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
肌酐是在肌肉中從磷酸肌酸通過自發(fā)和不可逆轉(zhuǎn)化而形成的，除非肌肉質(zhì)量有大的變化，通常情況所形成的肌酐量是相當(dāng)恒定的。游離肌酐的循環(huán)量完全依賴于它的排泄速度，從而測(cè)定尿液，血清或血漿中的肌酐量，可用于腎功能檢查。肌酐含量的增高常見于:慢性腎衰竭時(shí)排泄量的減少及肢端肥大癥。
 
測(cè)定原理：
肌酐與過量苦味酸在堿性條件下反應(yīng)生成橙紅色苦味酸肌酐。在波長(zhǎng) 490 nm 處有最大吸收峰，在一定的時(shí)間內(nèi)測(cè)定該復(fù)合物，即可計(jì)算出樣本中肌酐的含量，并可避免干擾。
 
肌酐+堿性苦味酸————肌酐苦味酸復(fù)合物
 
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、普通離心機(jī)，超速離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
 
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存，臨用前過濾。試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑三：10x 標(biāo)準(zhǔn)液×1 瓶，4℃保存，臨用前，蒸餾時(shí) 10 倍稀釋，終濃度為 0. 1 mg/ml。
*工作液：試劑二：試劑一 = 1：10, 臨用前配置
 
樣本收集：
1. 血清，血漿，血清或血漿中的肌酐在 2-8℃下可保存 24 小時(shí)。
2. 尿液:試驗(yàn)前將新鮮尿液用蒸餾水作 1/50 稀釋，測(cè)定結(jié)果乘以 50。

測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 490 nm，蒸餾水調(diào)零。
2，按下表添加樣本試劑，充分混勻，置 37℃水浴 30 秒鐘后，選擇波長(zhǎng) 490nm，以空白管校零點(diǎn)讀取起始吸光度(A1)，90 秒鐘后讀取終末吸光度(A2)
備注:可根據(jù)使用儀器的不同，恒比例改變?cè)噭┡c樣本的量。注意：空白管只需要做一次。

試劑名稱（μL）	樣本管	空白管	標(biāo)準(zhǔn)管
樣本	100
試劑三 1x			100
蒸餾水		100
工作液	1000	1000	1000

計(jì)算公式：
樣本管吸光度 A2 一樣本管吸光度 Al
肌酐(umol/L)= X 標(biāo)準(zhǔn)液濃度