多肽合成方法是把不同的或相同的多個(gè)氨基酸按指定順序連結(jié)起來構(gòu)成肽鏈(含多個(gè)肽鍵-CONH-)化合物的合成方法。由德國化學(xué)家費(fèi)舍爾(E.Fischer)所首創(chuàng)。

進(jìn)行多肽合成，必須首先解決兩個(gè)問題：

1.要將氨基酸兩個(gè)官能團(tuán)中的一個(gè)(通常選氨基)封閉，即用保護(hù)基團(tuán)保護(hù)起來，只讓沒被保護(hù)的那個(gè)基團(tuán)(羧基)去同另一個(gè)氨基酸分子反應(yīng)。采用的保護(hù)基團(tuán)不僅要易于同被保護(hù)基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)，還須在肽鍵形成后易去除。
2.要活化沒被封閉的官能團(tuán)，使之能在較溫和的條件下發(fā)生反應(yīng)。可作為氨基保護(hù)試劑的有氯甲酸芐酯和叔丁氧甲酰氯等，用來活化羧基的方法則是將羧基變成酰氯、酯、混合酸酐等衍生物或加縮合劑(失水劑)二環(huán)已基碳酰二亞胺，使氨基和羧基結(jié)合起來。
1962年梅瑞費(fèi)爾德(R.Merrifield)引入了一個(gè)新的多肽合成方法——固相多肽合成法。其原理是讓第一個(gè)氨基酸附在一種不溶性高聚物分子上，然后再逐一同別的氨基酸連結(jié)，增長的肽鏈連結(jié)在不溶性高聚物上，這樣可大大地減少每次分離操作的損失，簡化提純手續(xù)，省去純化個(gè)別中間體的麻煩。并能使加料處理機(jī)械化和自動化，縮短了多肽合成周期。當(dāng)完成多肽連接后，用還原性斷裂法把多肽同高聚物分離，再用色層法提純。固相法的建立和應(yīng)用大大地促進(jìn)了多肽合成研究。 多肽合成方法分類

多肽的合成主要分為兩條途徑:化學(xué)合成多肽和生物合成多肽。
化學(xué)合成主要是以氨基酸與氨基酸之間縮合的形式來進(jìn)行。在合成含有特定順序的多肽時(shí)，由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸單體，多肽合成時(shí)應(yīng)將不需要反應(yīng)的基團(tuán)暫時(shí)保護(hù)起來，方可進(jìn)行成肽反應(yīng)，這樣保證了多肽合成目標(biāo)產(chǎn)物的定向性。多肽的化學(xué)合成又分為液相合成和固相合成。
多肽液相合成主要分為逐步合成和片段組合兩種策略。逐步合成簡潔迅速，可用于各種生物活性多肽片段的合成。片段組合法主要包括天然化學(xué)連接和施陶丁格連接。近年，多肽液相片段合成法發(fā)展迅速，在多肽和蛋白質(zhì)合成領(lǐng)域已取得了重大突破。在多肽片段合成法中，根據(jù)多肽片段的化學(xué)特定性或化學(xué)選擇性，多肽片段能夠自發(fā)進(jìn)行連接，得到目標(biāo)多肽。因?yàn)槎嚯钠�段含有的氨基酸殘基相對較少，所以純度較高，且易于純化。
1963年，美國著名生物化學(xué)家Merrifield提出了固相合成法，開展了多肽固相合成，即將氨基酸的C末端(羧基端)連接在不溶樹脂上，然后在此樹脂上依次進(jìn)行氨基酸的縮合、延長肽鏈。固相合成方法可分為叔丁氧羰基(Boc)方法和9-芴甲基氧羰基(Fmoc)方法。人們以多肽的液相和固相合成方法為基礎(chǔ)又發(fā)展了氨基酸的羧內(nèi)酸酐(NCA)法、組合化學(xué)法等。
多肽的生物合成方法主要包括發(fā)酵法、酶解法，隨著生物工程技術(shù)的發(fā)展，以DNA重組技術(shù)為主導(dǎo)的基因工程法也被應(yīng)用于多肽的合成。 其他多肽合成方法

1、氨基酸的羧內(nèi)酸酐法(NCA)
氨基酸的羧內(nèi)酸酐的氨基保護(hù)基也可活化羧基。
NCA的原理:在堿性條件下，氨基酸陰離子與NCA形成一個(gè)更穩(wěn)定的氨基甲酸酯類離子，在酸化時(shí)該離子失去二氧化碳，生成二肽。生成的二肽又與其他的NCA結(jié)合，反復(fù)進(jìn)行。
NCA適用于短鏈肽片段的多肽合成，其周期短、操作簡單、成本低、得到產(chǎn)物分子量高，在目前多肽合成中所占比例較大，技術(shù)也較為通用。
2、組合化學(xué)法
20世紀(jì)80年代，以固相多肽合成為基礎(chǔ)提出了組合化學(xué)法，即氨基酸的構(gòu)建單元通過組合的方式進(jìn)行連接，合成出含有大量化合物的化學(xué)庫，并從中篩選出具有某種理化性質(zhì)或藥理活性化合物的一套多肽合成策略和篩選方案。
組合化學(xué)法的多肽合成策略主要包括:混合-均分法、迭代法、光控定位組合庫法、茶葉袋法等。組合化學(xué)法的最大優(yōu)點(diǎn)在于可同時(shí)合成多種化合物，并且能最大限度地篩選各種新化合物及其異構(gòu)體。
3、酶解法
酶解法是用生物酶降解植物蛋白質(zhì)和動物蛋白質(zhì)，獲得小分子多肽。酶解法因其多肽產(chǎn)量低、投資大、周期長、污染嚴(yán)重，未能實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。酶解法獲得的多肽能夠保留蛋白質(zhì)原有的營養(yǎng)價(jià)值，并且可以獲得比原蛋白質(zhì)更多的功能，更加綠色，更加健康。
4、基因工程法
基因工程法主要以DNA重組技術(shù)為基礎(chǔ)，通過合適的DNA模板來控制多肽的序列合成。有研究者通過基因工程法獲得了準(zhǔn)彈性蛋白-聚纈氨酸-脯氨酸-甘氨酸-纈氨酸-甘氨酸肽(VPGVG)。
利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的活性多肽還有肽類抗生素、干擾素類、白介素類、生長因子類、腫瘤壞死因子、人生長激素，血液中凝血因子、促紅細(xì)胞生成素，組織非蛋白纖溶酶原等。
基因工程法合成多肽具有表達(dá)定向性強(qiáng)，安全衛(wèi)生，原料來源廣泛和成本低等優(yōu)點(diǎn)，但因存在高效表達(dá)，不易分離，產(chǎn)率低的問題，難以實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)。
5、發(fā)酵法
發(fā)酵法是從微生物代謝產(chǎn)物中獲得多肽的方法。雖然發(fā)酵法的成本低，但其應(yīng)用范圍較窄，因?yàn)楝F(xiàn)在微生物能夠獨(dú)立合成的聚氨基酸只有ε-聚賴氨酸(ε-PL)、γ-聚谷氨酸(γ-PGA)和藍(lán)細(xì)菌肽。