前言：
    細胞劃痕實驗（Cell Scratch Assay），也被稱為傷口愈合實驗（Wound Healing Assay），是一種常用的體外實驗方法，用于評估細胞的遷移能力和修復(fù)過程。這項技術(shù)主要應(yīng)用于研究細胞生物學(xué)，特別是在癌癥研究、組織工程、藥物篩選以及了解細胞信號傳導(dǎo)通路等領(lǐng)域。  
實驗原理：
    細胞劃痕實驗通過在培養(yǎng)的單層細胞上人工制造一個空白區(qū)域（即“劃痕”或“傷口”），然后觀察并記錄細胞向這個空白區(qū)域遷移的過程。隨著時間的推移，邊緣的細胞會逐漸遷移到劃痕區(qū)域填補空缺，這個過程類似于體內(nèi)傷口愈合。通過比較不同時間的劃痕寬度/融合度，可以量化細胞遷移的速度和效率。

細胞劃痕實驗步驟：

• 準(zhǔn)備細胞和培養(yǎng)板：選擇合適的細胞系，在無菌條件下將細胞懸液接種到6孔板或其他的培養(yǎng)容器中，確保細胞能夠過夜生長形成單層。
• 制造劃痕：當(dāng)細胞完全鋪展并形成單層后，使用無菌的工具（如尖銳的槍頭或劃痕器）在細胞層上制造一個直線劃痕。
• 清洗與更換介質(zhì)：用PBS輕輕洗滌細胞以去除劃痕過程中可能產(chǎn)生的細胞碎片，隨后加入無血清或低血清培養(yǎng)基，以減少細胞增殖對實驗結(jié)果的干擾。
• 圖像采集：

a.普通顯微鏡：在劃痕后立即拍攝第一張照片作為基線，然后每隔一定時間間隔（如6小時、12小時、24小時）再次拍照，記錄劃痕愈合的情況。
b.活細胞成像儀：使用Celloger^®，在劃痕后將孔板置于培養(yǎng)箱內(nèi)的Celloger^®載物臺上，使用掃描軟件設(shè)定任意孔位及自動拍攝參數(shù)并開啟延時成像。

• 數(shù)據(jù)分析：

a.利用ImageJ等圖像分析軟件測量劃痕寬度，并計算不同時間點劃痕面積的變化，以此來評估細胞遷移速率。
b.使用Celloger^®配套的分析軟件對Celloger^®拍攝的圖像進行分析，分析細胞融合度的變化，并自動生成生長曲線，以此來定量細胞遷移；也可以通過Celloger^®聯(lián)合Image J對劃痕區(qū)域的面積進行定量。

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• 近兩年使用Celloger®做細胞劃痕實驗的文獻匯總：

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1️⃣ 實時觀測：無需中斷實驗，連續(xù)捕捉細胞遷移過程。
2️⃣ 高清成像：高分辨率圖像，輕松分析劃痕閉合速率。
3️⃣ 環(huán)境控制：培養(yǎng)箱內(nèi)環(huán)境，確保細胞健康與實驗穩(wěn)定性。
4️⃣ 自動化分析：內(nèi)置智能分析算法，助力數(shù)據(jù)處理與圖像量化。

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Celloger^® Pro 通過自動移動的集成相機和固定在平臺的培養(yǎng)耗材和樣本，在多個位點進行細胞成像。這樣確保了細胞的穩(wěn)定環(huán)境，從而提高了圖像質(zhì)量和研究準(zhǔn)確性。

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