利用細胞原位分子互作技術(儀)SPRm200探索腫瘤細胞表面糖密碼

瀏覽次數：1028　發布日期：2024-8-30　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

背景介紹
糖基化失調,包括N-糖鏈分支增加、O-糖鏈縮短和高度唾液酸化，是癌細胞的典型特征,創造了一個獨特的"糖密碼"。這種糖密碼可被糖結合蛋白(又稱lectin)識別和結合。

實驗內容
該實驗使用細胞原位分子互作技術(儀)SPRm200研究了兩種lectin - 小麥膠凝素(WGA)和接骨木糖(SNA) - 與胰腺癌細胞(BxPC3)表面糖苷的實時結合動力學。

圖 1 胰腺癌細胞表面糖基化異常和兩種不同凝集素的結合位點示意圖

圖 2 使用 SPRm 200 對 BxPC3 細胞進行動力學相互作用分析：(A) 從響應性 ROI 中提取的親和力等溫線圖，顯示 SNA 凝集素與 BxPC3 細胞上的聚糖結合，單一群體紅色標記顯示。(B) SNA凝集素動力學參數直方圖統計與高斯分布擬合，以提取細胞群體平均值和 95% 置信區間。(C) 從響應性 ROI 中提取的親和等溫線圖，顯示 WGA 凝集素與 BxPC3 細胞中的聚糖結合相互作用，兩個不同的群體以藍色和綠色標記顯示。(D) WGA凝集素動力學參數直方圖統計與高斯分布擬合，以提取細胞群體平均值和 95% 置信區間。

表 1 凝集素與 BxPC3 胰腺細胞結合的總結

結果
SPRm200允許無標記、實時檢測單個細胞上lectin-糖苷相互作用,提供了這些相互作用的細節和異質性結合信息。數據顯示，與WGA結合到N-乙酰氨基葡萄糖和唾液酸殘基的更為異質化的動力學相比，SNA與末端半乳糖連接的唾液酸有更高的結合親和力和選擇性。

SPRm200能夠生成親和力等溫線圖和動力學參數分布，揭示了復雜的多模式lectin-糖苷相互作用，這是傳統的終點法測量或親和力測量技術所無法觀察到的。

討論
了解這些lectin-糖苷詳細的相互作用機制，對于推進我們對腫瘤細胞表面糖基化修飾的認知及其在癌癥發生中的生物學作用，甚至為開發新的診斷和治療方法均能提供至關重要的信息。

SPRm 200 系列
基于細胞原位分子互作技術(儀)SPRm200集成了光學顯微鏡和SPR，是一種可用于細胞原位測量膜蛋白結合活性的強大技術。它允許通過明場測量樣品的表型變化，同時通過 SPR 測量結合強度和動力學。