Von Frey纖維，亦稱纖毛機(jī)械刺激針，是一種評(píng)估皮膚觸覺(jué)敏感性的工具，其應(yīng)用能反映在外周或中樞敏化狀態(tài)下異常疼痛的存在。該技術(shù)在疼痛研究領(lǐng)域跨物種應(yīng)用廣泛，尤其在嚙齒類動(dòng)物的臨床前模型中，成為探索病理生理機(jī)制及新鎮(zhèn)痛藥物研發(fā)的寶貴資源。

然而，準(zhǔn)確評(píng)估嚙齒動(dòng)物的疼痛感受頗具挑戰(zhàn)性。通常，通過(guò)監(jiān)測(cè)其對(duì)機(jī)械或熱刺激的行為反應(yīng)變化來(lái)量化疼痛敏感性。Von Frey測(cè)試便是一種具體方法，它涉及在嚙齒動(dòng)物身體特定區(qū)域施加精確的點(diǎn)狀刺激，并記錄觸發(fā)撤回反射所需的刺激強(qiáng)度。這一過(guò)程采用具有特定彎曲力的校準(zhǔn)光纖完成，主要聚焦于后爪足底，以細(xì)校準(zhǔn)塑料絲模擬機(jī)械刺激。機(jī)械撤回閾值被定義為能夠引發(fā)撤回反射的最小細(xì)絲規(guī)格，旨在評(píng)估動(dòng)物對(duì)有害刺激的感知能力。一旦反應(yīng)發(fā)生，所需壓力以克為單位記錄，作為個(gè)體的疼痛閾值指標(biāo)。此外，現(xiàn)代電子測(cè)痛儀的引入，實(shí)現(xiàn)了連續(xù)施力并提供了更為精細(xì)的腳爪撤退閾值測(cè)量。

實(shí)驗(yàn)流程概覽：

1. 準(zhǔn)備階段：將小鼠置于高架線柵測(cè)試室內(nèi)，靜置一小時(shí)以適應(yīng)環(huán)境。
2. 測(cè)試執(zhí)行：
   • 將小鼠放在金屬絲網(wǎng)上，首先測(cè)試左后爪。使用0.6g起始規(guī)格的Von Frey細(xì)絲，從網(wǎng)下側(cè)輕觸小鼠后爪足底，保持1-2秒接觸時(shí)間。根據(jù)小鼠反應(yīng)調(diào)整細(xì)絲規(guī)格，無(wú)反應(yīng)則遞增，有反應(yīng)則遞減，直至找到引發(fā)撤回或舔舐行為的細(xì)絲。重復(fù)此過(guò)程5次，每次間隔至少2分鐘。
   • 對(duì)右后爪重復(fù)上述測(cè)試流程。

測(cè)試階段安排：

• 測(cè)試1：在適應(yīng)環(huán)境后24小時(shí)，按照前述步驟重新測(cè)試小鼠。
• 測(cè)試2：再隔24小時(shí)（即適應(yīng)后48小時(shí)），重復(fù)上述測(cè)試流程。

整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，需多次重復(fù)測(cè)試并記錄結(jié)果，特別關(guān)注藥物注射前后同側(cè)（如結(jié)扎側(cè)）與對(duì)側(cè)爪子在縮爪潛伏期上的變化，以ΔPWT (g)形式表示，即對(duì)側(cè)潛伏期減去同側(cè)潛伏期的差值，從而量化疼痛敏感性的變化。