細胞計數儀的原理及選擇方法分享
一、前言
細胞計數是一種確定樣品中細胞的絕對數量或細胞密度的測量方法；并且是構成穩定細胞培養、精確細胞實驗以及精準定量的基礎。無論是為轉染準備細胞，還是為實驗接種精確數量的細胞，細胞計數以及活力分析都是許多實驗應用的基礎。
當我們在研究疾病進展以及藥物或調節劑如何影響我們的健康時，細胞計數的一致性以及準確性就顯得尤為重要。雖然許多小型實驗室仍在使用手動計數的方法，但一些大型實驗室已經開始使用自動化系統，來實現無縫的質量控制和細胞處理，同時保持對下游實驗至關重要的精確度。
本篇文章能夠為您提供有效的方法和專業的視角，以及基于應用的案例研究，幫助您選擇一種適合您實驗的細胞計數儀。
二、細胞計數儀原理
目前，細胞計數方法分為手動計數和自動計數兩種， 自動計數的儀器多種多樣，大致分為三種方法。下文將對目前市面上不同的計數原理進行概述，供大家詳細參考。
1. 手動計數與自動計數
（1）手動計數
常用的手動計數方法是使用血球計數板計數，此方法起初是為分析血液樣本而開發的。一直以來，細胞生物學家都使用它來進行細胞計數，血球計數板在載玻片上帶有計數室以及Neubauer計數網格，通過移液管將樣本加入計數室，然后在顯微鏡下直接觀察細胞進行細胞計數。
這種方法的優點是初始以及維護成本低，但主要缺點包括：
當我們在研究疾病進展以及藥物或調節劑如何影響我們的健康時，細胞計數的一致性以及準確性就顯得尤為重要。雖然許多小型實驗室仍在使用手動計數的方法，但一些大型實驗室已經開始使用自動化系統，來實現無縫的質量控制和細胞處理，同時保持對下游實驗至關重要的精確度。
本篇文章能夠為您提供有效的方法和專業的視角，以及基于應用的案例研究，幫助您選擇一種適合您實驗的細胞計數儀。
二、細胞計數儀原理
目前，細胞計數方法分為手動計數和自動計數兩種， 自動計數的儀器多種多樣，大致分為三種方法。下文將對目前市面上不同的計數原理進行概述，供大家詳細參考。
1. 手動計數與自動計數
（1）手動計數
常用的手動計數方法是使用血球計數板計數，此方法起初是為分析血液樣本而開發的。一直以來，細胞生物學家都使用它來進行細胞計數，血球計數板在載玻片上帶有計數室以及Neubauer計數網格，通過移液管將樣本加入計數室，然后在顯微鏡下直接觀察細胞進行細胞計數。
這種方法的優點是初始以及維護成本低，但主要缺點包括：
- 在有限的樣本濃度下，細胞計數結果的穩定性較低
- 技能要求高，容易出現計算錯誤，用戶之間的差異以及體積誤差均會導致數據不精確
- 費時費力
（2）自動計數
自動細胞計數儀的功能各不相同，但都基于三種主要技術：
自動細胞計數儀的功能各不相同，但都基于三種主要技術：
- 庫爾特電阻抗法
- 基于圖像的細胞測量法
- 流式細胞術
自動細胞計數儀不僅適用于哺乳動物細胞與原代細胞，也適用于酵母、藻類和原生動物等尺寸較小的細胞。與手動計數相比，自動細胞計數儀的優勢包括：
統計方法：
在該細胞計數標準中，統計學分析過程如下圖：
由該圖可得需計算四項指標：
①細胞計數平均值（Ydfi）
細胞計數平均值（Ydfi）表示目標稀釋分數df的一組測試樣本的細胞計數平均值。
其中Yij表示df的第j個代表性測試樣本的k個重復計數值的平均值，由以下公式得出：
四、NanoEnTek細胞計數儀
目前，市面上有各種各樣的細胞計數儀，因為基于圖像的細胞計數原理與手動計數原理相同，所以大部分成像儀均是利用成像對細胞進行計數。目前被廣泛應用的計數儀品牌如下表所示：
NanoEnTek 自動細胞計數儀系列曾在Select Science網站上獲得世界質量認證銀獎，該系列產品收獲了7200 多條評論和 4.8 分的星級評價(滿分5分)；并且一次性血細胞計數板系列也獲得了質量認證白金獎章。
蘇州奎克泰生物為韓國NanoEnTek中國區總授權�？颂┥飸{借極佳的生命科學設備產品和優質的服務，斬獲“2024年度創新實驗室設備提供商”獎，充分體現了我司的生命科學（細胞）設備類產品質量、技術服務和行業影響力等多方面的實力獲得了肯定。
我司代理的計數儀系列中，EVE™細胞計數儀簡單、快速、準確，能對成團細胞精準計數、計算細胞活率，選擇細胞大小范圍；EVE™ Plus最快1秒出結果；EVE™ HT / HT FL高通量計數儀3min內可一次性計48 個樣本。ADAM™ CellT是一款cGMP生產環境下可用的自動化細胞計數儀及ADAMII™ LS是一款基于熒光強度的桌面圖像型流式細胞分析儀，能夠提供多功能實驗和高準確度結果（與流式細胞儀結果一致），穩定性高。多款設備符合21 CFR Part 11要求，可在cGMP環境下使用，深受客戶贊譽。
穩定性：分別使用EVE、手工計數板、競品對HepG2、MCF7、F9進行計數，每個樣本重復7次，結果證明EVE自動細胞計數儀與競品相比，與手工計數結果更接近，且有更好的精確性。
EVE™ PLUS 超快速自動細胞計數儀
準確性：分別使用EVE PLUS與手工計數的方法對同一種細胞進行計數測試，結果證明EVE PLUS的計數結果與手工計數結果呈現高度相關性，且測量范圍優于手工計數。
穩定性：使用EVE Plus以及多臺儀器對多種細胞進行計數，EVE Plus的計數結果與熒光計數儀的結果更接近，且穩定性更好。
EVE™ HT高通量自動細胞計數儀
準確性：與傳統血細胞計數儀做對比，EVE HT在不同濃度和存活率下，計數結果與人工計數高度一致。
穩定性：通過5臺EVE HT進行對比實驗，所得出的計數結果一致。
EVE™ HT FL高通量熒光自動細胞計數儀
準確性：對于CHO細胞和PBMC，EVE™ HT FL測量的細胞總數與流式細胞儀所測結果高度相關。
穩定性：通過5臺EVE™ HT FL儀器對三種細胞樣本（Jurkat、Hela、CHO）各測量16次，結果表明不同儀器之間測量結果高度一致。
2. ADAM系列
ADAM™ MC2&CellT超精確細胞計數儀
準確性：ADAM MC2測量的細胞總數與流式細胞儀所測結果高度相關。
穩定性：使用ADAM MC2在低、中、高細胞濃度條件下計數，不同細胞濃度下計數結果穩定性高。
ADAM™ MC Plus & CellT Plus 超精確細胞計數儀
準確性：對不同濃度的PBMC細胞樣本進行計數比較，通過與流式細胞儀以及手工計數結果比較，計數結果高度相關。
穩定性：ADAM MC PLUS/CellT PLUS在低、中、高細胞濃度條件下計數，不同細胞濃度下計數結果穩定性高。
五、細胞計數儀選擇方法
我們面對各種品牌，如何為自己的實驗室選擇合適的細胞計數儀呢？雖然一些自動細胞計數儀（如流式細胞儀）的設備初始成本高，方案復雜，但是只要您的實驗室選擇合適的自動細胞計數儀將為以后的實驗帶來巨大的方便。在選擇儀器之前，我們需要確定影響計數方法選擇的重要因素：樣本類型。樣本類型決定了我們使用何種染色方法能更準確地得到細胞的數量、細胞的存活率。
1. 樣本類型
計數儀基本的要求是計數的準確性以及計數速度，所以下文詳細列出了各個產品的特性，有助于您選擇合適的計數儀設備。
2. 計數儀準確性、穩定性
選擇自動細胞計數儀代替手工計數，計數儀結果的準確性和穩定性至關重要。
準確性是計數儀計數結果與真實值之間的差異，可以與手工計數結果對比，或者借助標準品進行驗證計數儀準確性。穩定性是對同一樣本多次測量后的結果偏差在可允許范圍內，可用CV值（變異系數）表示。一臺優秀的計數儀，通常CV值＜5%。
3. 檢測效率
當選擇適合自己實驗室的計數儀時，除了考慮樣本、準確性與穩定性之外，檢測效率也是十分值得關注的一個因素。手動計數的一個缺點是耗時耗力，那么自動計數儀逐漸替代手動計數的一大優勢——省時省力，便是通過檢測效率來評估。一臺計數儀不僅要做到計數準確與穩定，快速也很重要。
檢測效率的評估主要通過單個樣本檢測時間與檢測通量評定。通常一個樣本，手動計數的時間約為3-5min，計數儀在10s-2min時間不等，并且檢測時間也會受到聚焦方式的影響。一塊血球計數板有兩個計數槽，現在市面上的大多數自動細胞計數儀也采用的兩通道計數板；也有一些高通量的細胞計數儀，適用于當一天需要檢測的樣本數量巨大時。
下表匯總了我司現有計數儀的檢測效率，您可以根據自己的需求進行選擇。
4. 21 CFR Part 11
在FDA 21 CFR Part 11 規定中，儀器設備的電子記錄被認為具有與書面記錄和手寫簽名等同的效力，此法規確保了電子數據的有效性和可靠性。在生物制造行業，質量控制和數據管理功能可以提供一個方便的方法來跟蹤多個細胞批次和監測不同的細胞操作安全。所以計數儀是否符合 21 CFR Part 11的規定也作為計數儀選擇的一個補充參考。
5. 其他因素
除以上所列條目外，還有一些因素也值得考慮，如是否需要外接電腦、性價比、服務等方面。
①機型——我司自動細胞計數儀產品除高通量計數儀 HT與HT FL需要外接電腦外，其余設備均為一體機，自帶觸控屏，無需配備電腦便可進行計數操作，且設備體積較小，無需占據實驗室內部很大的空間，放置于桌面上便可通過觸控屏點擊操作，得到準確的計數結果。
②細胞閥門——許多自動細胞計數儀能夠根據細胞的大小、形狀、亮度等參數調節，然后從計數范圍內排除不需要的細胞。這一調節能夠為特定的下游應用選擇細胞，從計數中去除樣品碎片，以及在有多種細胞類型的樣品中識別單個細胞類型。為了便于使用，許多自動細胞計數儀還具有“配置文件存儲”功能，允許用戶保存已自定義好的參數閾值，以便下一次直接使用該參數進行計數，節省時間。
③成團細胞計數——雖然應該采取一切措施來確保樣品準備得當，但還是有細胞成團/聚集的可能性，并且細胞成團可能影響細胞的計數。自動細胞計數儀使用內置的算法能提高對成團細胞計數的準確性。
④性價比——儀器本身的價格會受到計數原理、計數通量、預設調整等配置的影響，熒光計數的價格高于明場計數；計數通量越高那么價格也會越高；此外，還需考慮到耗材的成本以及后續儀器維護的成本，我司的計數儀耗材均使用一體壓成的工藝，更能保證計數的準確性；使用流式以及庫爾特計數原理的計數儀都需進行定期的維護，因此儀器后續的維護費用也是需要考慮的因素之一。
⑤服務——服務包括售前售后、儀器試用、技術支持以及質保期�？颂┥飼䴙槟掷m提供高效專業的服務。
了解以上的內容后，相信無論是需要原代細胞計數還是細胞系計數、明場還是熒光、常規通量還是高通量，我司具有極高性價比與專業服務保障的產品，會有一款能滿足您的需求。
- 使細胞計數標準化，提高計數結果的準確性和一致性
- 提升計數速度，從而提高統計精度與通量。例如，屢獲殊榮的EVE™ Plus細胞計數儀能夠在1秒內得到明場下的細胞計數結果。
自動細胞計數儀還有許多其他優點，如易于操作的界面：可以評估細胞形狀與測量細胞大小，來確認細胞類型特征。
2. 自動細胞計數方法
在本章節將會講述自動細胞計數的三種方法以及各自的優缺點。
（1）電阻抗計數法
電阻抗是利用庫爾特原理對細胞進行計數。首先需要將細胞懸浮在弱電解質溶液中，然后將該溶液通過直徑精確的小孔，通過施加小電壓，從而形成一個“感應區”，當每個細胞通過孔道時，都會置換出與自身體積相等的電解質溶液，這種置換將產生電壓脈沖，該電壓脈沖代表細胞數量，可對其進行監測；較大的細胞會產生更大振幅的脈沖，因此脈沖高度與細胞大小成正比。所以樣品中細胞濃度是通過精確控制和測量通過孔的液體體積來確定的。
與光學計數相比，庫爾特計數法不受細胞顏色或折射率的影響，能夠計數樣品中存在的所有顆粒。如Beckman Coulter的Multisizer 4e細胞計數儀，能精確計數細胞的數量以及大小。電阻抗計數法的優勢在于，與手工計數相比，該方法提升了計數的精確度與速度，但它不能進行活細胞/死細胞的分析，無法得出細胞存活率，且不能精確計數成團的細胞。
（2）基于圖像的細胞計數
細胞成像技術的進步使得基于圖像的細胞計數儀迅速發展。這些系統使用與手動計數相同的原理，但通常操作更為簡便，并可以提供細胞形狀和大小的信息。操作流程是將樣本加入一次性計數板的腔室，調整預設的參數并進行計數。
細胞計數是通過無標記分析、細胞染色或熒光測量實現的，光學模式有明場、單色熒光或雙色熒光。這些自動細胞計數儀可以測量各種細胞類型和細胞密度，并且通常具有一系列附加功能，包括參數設置、細胞閥門大小、自動聚焦以及數據存儲和記錄。他們主要是對單視野進行拍照計數，但近期研發的自動細胞計數儀可以拍攝多張視野圖像進行計數，以提高細胞計數的精度。
基于圖像的細胞計數有眾多優勢：
三、計數儀評價標準
市面上的細胞計數儀多種多樣，大家對各品牌的計數儀也褒貶不一，那么我們該如何客觀地評價一款細胞計數儀呢？這就需要參考細胞計數儀的計數標準。
儀器行業的發展推動了各種細胞計數儀的發展，并廣泛地應用于總細胞計數和分類細胞計數。在缺乏參考資料的情況下，測量方法的準確性很難確定。同時生物制劑的復雜性（如細胞類型、來源、制備等）也使這一問題更加突出。因此在沒有參照材料或參照方法的情況下，需要制定措施來保證細胞計數測量過程中的質量。
本文提供了一種通過稀釋系列實驗設計和統計分析得出的一組質量指標來評估細胞計數的方法。該方法適用于總細胞計數、細胞分類計數、直接細胞計數和間接細胞計數，前提是測量過程符合實驗設計的標準（例如，將細胞應為懸浮狀態），且該方法主要適用于真核細胞。
在細胞計數中獲得高置信度意味著測量既準確又精確。具體來說，通過實驗設計和統計分析，可以評估描述偏離比例和變異系數（CV）的質量指標，以評估細胞計數測量過程的質量。質量指標評估細胞計數測量過程的整體質量，其中測量過程包括樣品制備和處理、數據采集以及數據處理/校正。
2. 自動細胞計數方法
在本章節將會講述自動細胞計數的三種方法以及各自的優缺點。
（1）電阻抗計數法
電阻抗是利用庫爾特原理對細胞進行計數。首先需要將細胞懸浮在弱電解質溶液中，然后將該溶液通過直徑精確的小孔，通過施加小電壓，從而形成一個“感應區”，當每個細胞通過孔道時，都會置換出與自身體積相等的電解質溶液，這種置換將產生電壓脈沖，該電壓脈沖代表細胞數量，可對其進行監測；較大的細胞會產生更大振幅的脈沖，因此脈沖高度與細胞大小成正比。所以樣品中細胞濃度是通過精確控制和測量通過孔的液體體積來確定的。
與光學計數相比，庫爾特計數法不受細胞顏色或折射率的影響，能夠計數樣品中存在的所有顆粒。如Beckman Coulter的Multisizer 4e細胞計數儀，能精確計數細胞的數量以及大小。電阻抗計數法的優勢在于，與手工計數相比，該方法提升了計數的精確度與速度，但它不能進行活細胞/死細胞的分析，無法得出細胞存活率，且不能精確計數成團的細胞。
（2）基于圖像的細胞計數
細胞成像技術的進步使得基于圖像的細胞計數儀迅速發展。這些系統使用與手動計數相同的原理，但通常操作更為簡便，并可以提供細胞形狀和大小的信息。操作流程是將樣本加入一次性計數板的腔室，調整預設的參數并進行計數。
細胞計數是通過無標記分析、細胞染色或熒光測量實現的，光學模式有明場、單色熒光或雙色熒光。這些自動細胞計數儀可以測量各種細胞類型和細胞密度，并且通常具有一系列附加功能，包括參數設置、細胞閥門大小、自動聚焦以及數據存儲和記錄。他們主要是對單視野進行拍照計數，但近期研發的自動細胞計數儀可以拍攝多張視野圖像進行計數，以提高細胞計數的精度。
基于圖像的細胞計數有眾多優勢：
- 通量優勢
- 易于操作的界面
- 運營成本低
- 大大減少計數錯誤
- 降低用戶之間的差異性
但基于圖像的細胞計數卻難以計數低濃度的細胞。
（3）流式細胞術
雖然流式細胞術提供了對細胞特性的快速定量，但在細胞計數時需要先確定細胞濃度，或者使用額外的計數標準。因此，復雜性和高成本可能會對小型實驗室造成障礙。
然而，該技術可以在異質混合細胞群中有效地分選細胞，所以可以用于計數原代細胞。使用特定體積的已知濃度的熒光微珠，將其添加到一個特定的樣品體積來創建一個已知的比例，然后通過測量被記錄的熒光微珠的數量來換算樣品的體積，從而得到細胞的絕對數量。
基于圖像的流式細胞術，可以在一個系統中定義多個參數，是一種非常強大的細胞表征和分析工具，但同時也代表著昂貴的費用以及繁瑣且專業的操作，現今的實驗室很少單純地將流式細胞術用于細胞計數，往往會用流式去做定性或定量分析細胞功能與分選細胞。
（3）流式細胞術
雖然流式細胞術提供了對細胞特性的快速定量，但在細胞計數時需要先確定細胞濃度，或者使用額外的計數標準。因此，復雜性和高成本可能會對小型實驗室造成障礙。
然而，該技術可以在異質混合細胞群中有效地分選細胞，所以可以用于計數原代細胞。使用特定體積的已知濃度的熒光微珠，將其添加到一個特定的樣品體積來創建一個已知的比例，然后通過測量被記錄的熒光微珠的數量來換算樣品的體積，從而得到細胞的絕對數量。
基于圖像的流式細胞術，可以在一個系統中定義多個參數，是一種非常強大的細胞表征和分析工具，但同時也代表著昂貴的費用以及繁瑣且專業的操作，現今的實驗室很少單純地將流式細胞術用于細胞計數，往往會用流式去做定性或定量分析細胞功能與分選細胞。
三、計數儀評價標準
市面上的細胞計數儀多種多樣，大家對各品牌的計數儀也褒貶不一，那么我們該如何客觀地評價一款細胞計數儀呢？這就需要參考細胞計數儀的計數標準。
儀器行業的發展推動了各種細胞計數儀的發展，并廣泛地應用于總細胞計數和分類細胞計數。在缺乏參考資料的情況下，測量方法的準確性很難確定。同時生物制劑的復雜性（如細胞類型、來源、制備等）也使這一問題更加突出。因此在沒有參照材料或參照方法的情況下，需要制定措施來保證細胞計數測量過程中的質量。
本文提供了一種通過稀釋系列實驗設計和統計分析得出的一組質量指標來評估細胞計數的方法。該方法適用于總細胞計數、細胞分類計數、直接細胞計數和間接細胞計數，前提是測量過程符合實驗設計的標準（例如，將細胞應為懸浮狀態），且該方法主要適用于真核細胞。
在細胞計數中獲得高置信度意味著測量既準確又精確。具體來說，通過實驗設計和統計分析，可以評估描述偏離比例和變異系數（CV）的質量指標，以評估細胞計數測量過程的質量。質量指標評估細胞計數測量過程的整體質量，其中測量過程包括樣品制備和處理、數據采集以及數據處理/校正。
1. 樣品制備
- 測試材料應為懸浮細胞，且細胞應為單細胞、細胞聚集體或細胞團聚體。
- 用于為細胞計數測量過程生成代表性測試樣本的制備和處理程序應進行優化，以保持測試樣本的特性。
- 樣品制備程序應避免對細胞造成損傷，防止改變其計數能力，并避免引入/減少可干擾或人為改善細胞計數測量過程的碎片。
2. 稀釋分數實驗設計
使用一個細胞懸液作為母液，在預期濃度范圍內稀釋為不同濃度的可重復代表性測試樣本，如果濃度和組成完全相同，則可以使用額外的細胞原液。
使用一個細胞懸液作為母液，在預期濃度范圍內稀釋為不同濃度的可重復代表性測試樣本，如果濃度和組成完全相同，則可以使用額外的細胞原液。
注：該圖描述了從單一細胞懸液開始的實驗設計，其中通過獨立稀釋得到一組包含3個重復代表性樣本（n=3）的稀釋分數，對每個代表性樣本進行三次重復計數。
i表示細胞原液不同稀釋分數的數量（i=1，.....，i）；dfi表示不同的稀釋分數，值在0至1之間；ni表示為目標稀釋分數的具有代表性的重復測試樣本數；kij表示第i個稀釋分數的第j樣本的重復測量次數；Yijk表示來自細胞原液的第i個目標稀釋分數的第j個重復代表性樣本的第k個重復計數樣本的值。
i表示細胞原液不同稀釋分數的數量（i=1，.....，i）；dfi表示不同的稀釋分數，值在0至1之間；ni表示為目標稀釋分數的具有代表性的重復測試樣本數；kij表示第i個稀釋分數的第j樣本的重復測量次數；Yijk表示來自細胞原液的第i個目標稀釋分數的第j個重復代表性樣本的第k個重復計數樣本的值。
統計方法：
在該細胞計數標準中，統計學分析過程如下圖：
①細胞計數平均值（Ydfi）
細胞計數平均值（Ydfi）表示目標稀釋分數df的一組測試樣本的細胞計數平均值。
②變異系數（CV）
變異系數（CV）是衡量各觀測值變異程度的統計量。樣本測量精度應使用重復性測量值的變異系數（CV）進行評估，用百分比（%CV）表示。CV值越小，表示數據越穩定，變異程度越小，反之則表示數據不穩定，變異程度較大。CVij表示具有目標稀釋分數df的代表性測試樣品j的重復性觀測數值的變異系數。
變異系數（CV）是衡量各觀測值變異程度的統計量。樣本測量精度應使用重復性測量值的變異系數（CV）進行評估，用百分比（%CV）表示。CV值越小，表示數據越穩定，變異程度越小，反之則表示數據不穩定，變異程度較大。CVij表示具有目標稀釋分數df的代表性測試樣品j的重復性觀測數值的變異系數。
%CVdfi表示具有目標稀釋分數df的一組n個代表性測試樣品的變異系數平均百分比。
③決定系數（R2）
決定系數R2是在數據分析和實驗設計領域廣泛使用的指標，用于描述模型與一組觀測值的擬合程度。
決定系數R2是在數據分析和實驗設計領域廣泛使用的指標，用于描述模型與一組觀測值的擬合程度。
其中，Y......是一組 n 個具有代表性的獨立測試樣本 j 的 Yij 的平均值；一組目標稀釋分數 (DF) 的重復代表性測試樣本的 Yij 的平均值由公式給出：
④比例指數（PI）
用戶應根據平滑殘差計算比例指數（PI）。
用戶應根據細胞計數測量的預期用途選擇PI的計算方法。
3. 結果報告
細胞計數應以細胞濃度表示，單位為細胞/ml，報告應包含以下質量指標：
用戶應根據平滑殘差計算比例指數（PI）。
用戶應根據細胞計數測量的預期用途選擇PI的計算方法。
3. 結果報告
細胞計數應以細胞濃度表示，單位為細胞/ml，報告應包含以下質量指標：
四、NanoEnTek細胞計數儀
目前，市面上有各種各樣的細胞計數儀，因為基于圖像的細胞計數原理與手動計數原理相同，所以大部分成像儀均是利用成像對細胞進行計數。目前被廣泛應用的計數儀品牌如下表所示：
NanoEnTek 自動細胞計數儀系列曾在Select Science網站上獲得世界質量認證銀獎，該系列產品收獲了7200 多條評論和 4.8 分的星級評價(滿分5分)；并且一次性血細胞計數板系列也獲得了質量認證白金獎章。
蘇州奎克泰生物為韓國NanoEnTek中國區總授權�？颂┥飸{借極佳的生命科學設備產品和優質的服務，斬獲“2024年度創新實驗室設備提供商”獎，充分體現了我司的生命科學（細胞）設備類產品質量、技術服務和行業影響力等多方面的實力獲得了肯定。
我司代理的計數儀系列中，EVE™細胞計數儀簡單、快速、準確，能對成團細胞精準計數、計算細胞活率，選擇細胞大小范圍；EVE™ Plus最快1秒出結果；EVE™ HT / HT FL高通量計數儀3min內可一次性計48 個樣本。ADAM™ CellT是一款cGMP生產環境下可用的自動化細胞計數儀及ADAMII™ LS是一款基于熒光強度的桌面圖像型流式細胞分析儀，能夠提供多功能實驗和高準確度結果（與流式細胞儀結果一致），穩定性高。多款設備符合21 CFR Part 11要求，可在cGMP環境下使用，深受客戶贊譽。
并且，我司的計數儀系列在準確度與精確度方面有著良好的優勢，相信會有一款細胞計數儀能滿足您的需求。
1. EVE系列
EVE™自動細胞計數儀
1. EVE系列
EVE™自動細胞計數儀
準確性：分別使用EVE與手工計數的方法對同一種細胞進行計數測試，結果證明EVE的計數結果與手工計數結果呈現高度相關性，且測量范圍優于手工計數。
穩定性：分別使用EVE、手工計數板、競品對HepG2、MCF7、F9進行計數，每個樣本重復7次，結果證明EVE自動細胞計數儀與競品相比，與手工計數結果更接近，且有更好的精確性。
EVE™ PLUS 超快速自動細胞計數儀
準確性：分別使用EVE PLUS與手工計數的方法對同一種細胞進行計數測試，結果證明EVE PLUS的計數結果與手工計數結果呈現高度相關性，且測量范圍優于手工計數。
穩定性：使用EVE Plus以及多臺儀器對多種細胞進行計數，EVE Plus的計數結果與熒光計數儀的結果更接近，且穩定性更好。
EVE™ HT高通量自動細胞計數儀
穩定性：通過5臺EVE HT進行對比實驗，所得出的計數結果一致。
EVE™ HT FL高通量熒光自動細胞計數儀
穩定性：通過5臺EVE™ HT FL儀器對三種細胞樣本（Jurkat、Hela、CHO）各測量16次，結果表明不同儀器之間測量結果高度一致。
2. ADAM系列
ADAM™ MC2&CellT超精確細胞計數儀
準確性：ADAM MC2測量的細胞總數與流式細胞儀所測結果高度相關。
穩定性：使用ADAM MC2在低、中、高細胞濃度條件下計數，不同細胞濃度下計數結果穩定性高。
ADAM™ MC Plus & CellT Plus 超精確細胞計數儀
準確性：對不同濃度的PBMC細胞樣本進行計數比較，通過與流式細胞儀以及手工計數結果比較，計數結果高度相關。
我們面對各種品牌，如何為自己的實驗室選擇合適的細胞計數儀呢？雖然一些自動細胞計數儀（如流式細胞儀）的設備初始成本高，方案復雜，但是只要您的實驗室選擇合適的自動細胞計數儀將為以后的實驗帶來巨大的方便。在選擇儀器之前，我們需要確定影響計數方法選擇的重要因素：樣本類型。樣本類型決定了我們使用何種染色方法能更準確地得到細胞的數量、細胞的存活率。
1. 樣本類型
- 實驗室的細胞類型一般多為常規傳代培養的細胞系，如腫瘤細胞系、哺乳動物細胞系等，這些細胞的直徑通常在5-40μm。這類型的細胞計數往往簡單易操作。
- 從組織或血液中分離的原代細胞，如PBMC、脾細胞等，但由于細胞碎片頻繁存在、細胞隨時間降解以及消化細胞懸液中的細胞群異質性，準確測定細胞數是富有挑戰的。
- 除細胞系與原代細胞外，也有一些別的樣本類型的計數需求，如酵母細胞、球藻細胞、芽孢桿菌等小粒徑樣本（1-10μm）。
- 針對于細胞系，我們可以選用基于臺盼藍的明場細胞計數儀。臺盼藍染色是最常用且成熟的對細胞計數且分析細胞活率的方法。TB是一種選擇性偶氮染料，無法進入細胞膜完整的活細胞，僅對死細胞進行染色。
- 針對于原代細胞、PBMC等，由于樣本的雜亂性，我們更推薦您選擇熒光細胞計數儀。使用熒光細胞計數儀能夠對混合細胞類型的復雜樣本進行計數，且計數結果相較于使用臺盼藍計數原代細胞結果更加準確。
- 針對于特殊樣本的計數需求，我們需要關注儀器的計數直徑范圍，確保我們選擇的計數儀能覆蓋自己實驗使用的樣本直徑。
- 自動細胞計數儀由于測量范圍的限制，所以也應確保選擇的計數儀能覆蓋自己實驗使用的細胞濃度范圍。
計數儀基本的要求是計數的準確性以及計數速度，所以下文詳細列出了各個產品的特性，有助于您選擇合適的計數儀設備。
2. 計數儀準確性、穩定性
選擇自動細胞計數儀代替手工計數，計數儀結果的準確性和穩定性至關重要。
準確性是計數儀計數結果與真實值之間的差異，可以與手工計數結果對比，或者借助標準品進行驗證計數儀準確性。穩定性是對同一樣本多次測量后的結果偏差在可允許范圍內，可用CV值（變異系數）表示。一臺優秀的計數儀，通常CV值＜5%。
3. 檢測效率
當選擇適合自己實驗室的計數儀時，除了考慮樣本、準確性與穩定性之外，檢測效率也是十分值得關注的一個因素。手動計數的一個缺點是耗時耗力，那么自動計數儀逐漸替代手動計數的一大優勢——省時省力，便是通過檢測效率來評估。一臺計數儀不僅要做到計數準確與穩定，快速也很重要。
檢測效率的評估主要通過單個樣本檢測時間與檢測通量評定。通常一個樣本，手動計數的時間約為3-5min，計數儀在10s-2min時間不等，并且檢測時間也會受到聚焦方式的影響。一塊血球計數板有兩個計數槽，現在市面上的大多數自動細胞計數儀也采用的兩通道計數板；也有一些高通量的細胞計數儀，適用于當一天需要檢測的樣本數量巨大時。
下表匯總了我司現有計數儀的檢測效率，您可以根據自己的需求進行選擇。
4. 21 CFR Part 11
在FDA 21 CFR Part 11 規定中，儀器設備的電子記錄被認為具有與書面記錄和手寫簽名等同的效力，此法規確保了電子數據的有效性和可靠性。在生物制造行業，質量控制和數據管理功能可以提供一個方便的方法來跟蹤多個細胞批次和監測不同的細胞操作安全。所以計數儀是否符合 21 CFR Part 11的規定也作為計數儀選擇的一個補充參考。
5. 其他因素
除以上所列條目外，還有一些因素也值得考慮，如是否需要外接電腦、性價比、服務等方面。
①機型——我司自動細胞計數儀產品除高通量計數儀 HT與HT FL需要外接電腦外，其余設備均為一體機，自帶觸控屏，無需配備電腦便可進行計數操作，且設備體積較小，無需占據實驗室內部很大的空間，放置于桌面上便可通過觸控屏點擊操作，得到準確的計數結果。
②細胞閥門——許多自動細胞計數儀能夠根據細胞的大小、形狀、亮度等參數調節，然后從計數范圍內排除不需要的細胞。這一調節能夠為特定的下游應用選擇細胞，從計數中去除樣品碎片，以及在有多種細胞類型的樣品中識別單個細胞類型。為了便于使用，許多自動細胞計數儀還具有“配置文件存儲”功能，允許用戶保存已自定義好的參數閾值，以便下一次直接使用該參數進行計數，節省時間。
③成團細胞計數——雖然應該采取一切措施來確保樣品準備得當，但還是有細胞成團/聚集的可能性，并且細胞成團可能影響細胞的計數。自動細胞計數儀使用內置的算法能提高對成團細胞計數的準確性。
④性價比——儀器本身的價格會受到計數原理、計數通量、預設調整等配置的影響，熒光計數的價格高于明場計數；計數通量越高那么價格也會越高；此外，還需考慮到耗材的成本以及后續儀器維護的成本，我司的計數儀耗材均使用一體壓成的工藝，更能保證計數的準確性；使用流式以及庫爾特計數原理的計數儀都需進行定期的維護，因此儀器后續的維護費用也是需要考慮的因素之一。
⑤服務——服務包括售前售后、儀器試用、技術支持以及質保期�？颂┥飼䴙槟掷m提供高效專業的服務。
了解以上的內容后，相信無論是需要原代細胞計數還是細胞系計數、明場還是熒光、常規通量還是高通量，我司具有極高性價比與專業服務保障的產品，會有一款能滿足您的需求。
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