FISH熒光原位雜交技術——捕獲基因位、量的“釣魚”工具

瀏覽次數：897　發布日期：2024-5-25　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

熒光原位雜交是一種生物技術，行業內簡稱FISH（Fluorescence In Situ Hybridization），被廣泛應用于生物醫學研究和臨床診斷領域。其原理簡潔而強大，可以幫助使用者準確地定位和分析細胞或組織中特定DNA序列的位置和數量，為研究基因組的結構、功能和異常提供了重要的手段，所以說，FISH是揭示基因位置與數量的強大工具。

要想使用好這個工具，就不得不說說它的生物學原理。高中生物讓我們學到了生命重要的遺傳物質--DNA（脫氧核糖核酸），它是由特定的堿基序列配對形成的雙螺旋結構，也就是A（腺嘌呤）—T（胸腺嘧啶）配對，G（鳥嘌呤）—C（胞嘧啶）配對。FISH熒光原位雜交技術的核心在于使用熒光標記的DNA探針與待檢測樣品中的目標DNA序列發生特異性的互補配對，在進行FISH熒光原位雜交之前，DNA雙螺旋結構經過處理分解為單鏈的目標DNA，而探針DNA通過人工合成或PCR擴增并在其一端標記上熒光染料，在特定的溫度和鹽濃度下形成探針—目標DNA配對這樣的雙鏈結構，然后對樣品進行洗脫，洗去未結合的探針染料（減少背景雜光干擾），而結合上的熒光染料標記的探針會發出特定顏色的熒光信號。

利用DNA堿基對的互補性，將直接標記了熒光的單鏈DNA(探針)和與其互補的目標樣本的DNA(玻片上的標本)雜交，通過觀察熒光信號在染色體上的位置反映相應染色體的情況。

最后，使用熒光顯微鏡下通過使用染料對應的熒光波段觀察樣品。熒光染料標記的探針會發出特定顏色的熒光信號，用于定位和分析目標DNA序列的位置和數量，因其特異性結合原理可以“釣出”所需的堿基序列，也常被稱為生命科學界的“釣魚”技術。

FISH技術在許多領域都有著廣泛的應用，包括：基因組學研究、腫瘤學診斷、胚胎學研究、微生物學研究等，FISH技術為科學家們提供了深入探索生命本質的窗口，為疾病的診斷和治療提供了重要支持。其對HER2、EGFR、TP53基因擴增的檢測具有較高的靈敏度，其特定的工作原理可以診斷DNA序列的位置和數量，對染色體缺失、重復、倒位等遺傳疾病的診斷和研究具有重要意義，FISH熒光原位雜交技術以其高分辨率、高特異性和廣泛適用性而成為生物醫學領域中的重要工具。所以近幾年醫院在胃癌、乳腺癌和產前診斷方面的FISH項目如火如荼開展，FISH技術及其相關產業在國內外蓬勃發展。

熒光顯微鏡檢做為FISH檢測最后一道關鍵工序，在推進FISH技術的進程中扮演著不可或缺的角色。Mshot明美開發了FISH熒光鏡檢的整套解決方案，這其中包括Mshot明美科研級正置熒光顯微鏡MF43-N以及專用于FISH檢測的醫學影像處理軟件系統Mshot V2.0，醫學影像處理軟件系統配套了2100萬像素科研級制冷高分辨率、高靈敏度、高特異性的熒光攝像頭，軟件具有自動熒光信號點提取、景深擴展、多通道融合及自由報表等功能，打通FISH樣片熒光檢測—圖像處理—出具報告這條完整產線的應用需求。其中強大的自動熒光信號點提取功，可以將提取出的信號點不丟失、亮度不減弱，快速且準確，大大提升了FISH圖像處理效果以及FISH圖像處理效率。以下是FISH熒光信號點一鍵提取功能的效果演示。