一,發光原理
1,生物發光
用熒光素酶基因標記DNA,利用其產生的蛋白酶與底物發生反應,產生體內自發光信號。
2,熒光發光
熒光染料、探針、蛋白受一定波長的激發光激發后,發射出波長大于激發光波長的熒光信號。
二,操作方法
生物發光
1、前期需將熒光素酶基因整合到細胞染色體DNA上以表達熒光素酶,包括構建熒光素酶重組質粒,細胞轉染,篩選陽性克隆細胞株。
2、每次成像前需要注射底物熒光素,實驗成本高。
熒光發光
1、前期可根據實驗需求選擇合適的熒光染料、熒光探針、熒光蛋白等,對不同的目標基因、蛋白、抗體、化合物等進行標記。
2、成像前無需注射底物,有合適的激發光源照射,就可發出特定波長的發射光,只要熒光基團穩定,就可實現隨時激發、發光、檢測。
三,應用范圍
生物發光
企業文化,或稱組織文化,是一個組織由其價值觀、信念、儀式、符號、處事方式等組成的其特有的文化形象,簡單而言,就是企業在日常運行中所表現出的各方各面。
熒光發光
光信號可能會隨著細胞的生長繁殖或實驗周期延長逐漸減弱。但需保持熒光基團穩定才可穩定發光,在活體或離體組織器官進行觀察。
具有更多靈活的標記探針可選,應用范圍更廣,適合瞬時觀測實驗,如藥物、細胞在體內的分布、靶向和代謝,疾病標記物的靶向監測等。
生物發光不同于熒光發光,依靠酶促反應產生自發光信號,無需激發光,背景低,信噪比高(相差2-3個數量級),靈敏度高,且發光強度與檢測目標有良好的線性關系,可進行準確定量。前期涉及轉基因操作,實驗難度較高,實驗過程中需要消耗底物熒光素,實驗成本較高,應用范圍較小。
四,逐典D-螢光素鉀鹽優勢
1.高純度(HPLC驗證純度≥99%)
2.優異的生物發光性能
3.高溶解度(>40mg/ml)
五,應用場景
D-熒光素鉀鹽在不同領域具有多種應用場景。其中包括蛋白表達研究、抗腫瘤或抗病毒藥物研究以及mRNA疫苗開發等。
蛋白表達研究:將Luc基因插入需要研究的蛋白中,可用于定量目標蛋白在實驗動物體內的表達情況。
抗腫瘤或抗病毒藥物:在腫瘤細胞或病毒中導入Luc基因,建立腫瘤或病毒感染小鼠模型,注射藥物后,通過活體成像技術觀測腫瘤大小或病毒感染的變化。
mRNA疫苗開發:在mRNA中插入Luc基因,脂質體包裹后注射實驗動物后,可通過活體成像技術可觀測疫苗的免疫效果。
六,應用案例分享