質(zhì)譜分析是一種分析技術(shù)，通過測量分子離子的質(zhì)量來確定化合物的組成和結(jié)構(gòu)。在生物化學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)中，質(zhì)譜技術(shù)已成為分析多肽和蛋白質(zhì)的主要方法之一。

一、多肽的質(zhì)譜分析:

1.電噴霧電離 (ESI) 和 基質(zhì)輔助激光解吸/電離 (MALDI):

這是兩種常用的離子化技術(shù)，它們可以將蛋白質(zhì)或多肽轉(zhuǎn)化為氣態(tài)離子，從而可以在質(zhì)譜儀中進(jìn)行分析。

2.串聯(lián)質(zhì)譜 (MS/MS):

通過對特定的前體離子進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)解離，獲得了多肽或蛋白質(zhì)片段的質(zhì)譜信息，從而幫助確定原始多肽的氨基酸序列。

圖1

二、質(zhì)譜在生物化學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用:

1.蛋白質(zhì)鑒定:

通過將實驗數(shù)據(jù)與蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行匹配，可以鑒定樣品中的特定蛋白質(zhì)。

2.蛋白質(zhì)后修飾的研究:

質(zhì)譜可以用來識別和定量蛋白質(zhì)的磷酸化、乙酰化、糖基化等后修飾。

3.蛋白質(zhì)組學(xué):

通過分析細(xì)胞或組織中的總蛋白質(zhì)，可以揭示蛋白質(zhì)的表達(dá)、相互作用和功能。

4.蛋白質(zhì)相互作用的研究:

結(jié)合免疫沉淀和質(zhì)譜技術(shù)，可以識別特定蛋白質(zhì)的相互作用伙伴。

5.定量蛋白質(zhì)組學(xué):

使用標(biāo)記如硅肼標(biāo)簽（SILAC）或同位素標(biāo)記的肽段（iTRAQ）可以實現(xiàn)蛋白質(zhì)的相對或絕對定量。

6.新蛋白質(zhì)和新生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn):

質(zhì)譜可以幫助發(fā)現(xiàn)尚未描述的蛋白質(zhì)或作為疾病標(biāo)志物的蛋白質(zhì)。

7.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究:

質(zhì)譜也可以提供有關(guān)蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化的信息，尤其是在結(jié)合其他技術(shù)如氫/氘交換時。

多肽的質(zhì)譜分析是一個非常復(fù)雜且功能強(qiáng)大的技術(shù)，它在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物開發(fā)和許多其他領(lǐng)域都發(fā)揮了關(guān)鍵作用。