Nucleofector電轉技術在重編程產生誘導多能干細胞 (iPSC) 中的應用
誘導多能干細胞 (iPSC) 是通過人工將干細胞特異性轉錄因子引入預成熟或成熟的體細胞，從已經分化的細胞類型中衍生的多能干細胞。
由于其類似ESC的功能，iPSC已經作為許多發育或疾病相關應用的強大工具，幫助科學家進一步確定發展機制或疾病發病機制，或作為進行體外藥物篩選和毒性研究的新型人類疾病模型，并具有成為再生醫學新工具的巨大潛力。
科學家通過病毒轉導或非病毒轉染將干細胞特異性轉錄因子引入原代體細胞中，可以簡單地在實驗室中產生誘導的PSC。不同組合中使用的典型重編程因子是Oct4，Sox2，Klf4，c-Myc，Nanog和Lin28。
最初，這些重編程因子通過逆轉錄病毒轉導遞送到體細胞中，因其隨機整合的特性和重編程因子的長期存在對腫瘤抑制基因的潛在失活可能引起腫瘤生長，從而降低了它們對臨床的適用性。
因此，研究人員通過使用非整合 RNA 病毒或游離型載體甚至 mRNA 的非病毒遞送來探索替代方案。 龍沙的 Nucleofector™ 技術已被證明是用于 iPSC 生成的一種方便、高效且具有成本效益的非病毒替代品，目前正被世界各地的領先科學家使用。
Nucleofector™ 技術已被有效地用于重編程常見的細胞類型，如人外周血單核細胞 (PBMC)、真皮成纖維細胞或 CD34+ 造血祖/干細胞，以及更罕見的起始細胞類型，如脂肪干細胞或角質形成細胞。
下面列出的鏈接和參考資料將提供一些指南，說明使用哪些 Nucleofector™ Kits 將重編程載體轉染到這些常用的細胞類型中。此外，為了設置您的方案，我們的主要細胞類型和相應的優化培養基可用作陽性對照。
Human PBMCs生成IPSC
| 對照細胞 | hPBMCs(Cat# CC-2702) |
| 細胞特異性培養基 | TheraPEAK™ X-VIVO 15 media (Cat# BEBP02-054Q) |
| Nucleofector 試劑盒 | 對于4D Nucleofector™ X 單元P3 Primary Cell 4D-Nucleofector™ X Kit(Cat# V4XP-3024)對于Nucleofector™ 2b系統Human T Cell Nucleofector™ Kit(Cat# VPA-1002) |
| 參考資料或方案 | 案例研究：Lonza L7™ hiPSC Reprogramming and hPSC Culture System（點擊查看）實驗方案\應用數據\文獻列表：（點擊查看） |
Human Fibroblast生成IPSC
| 對照細胞 | Human Dermal Fibroblasts (Cat# CC-2511) |
| 細胞特異性培養基 | FGM™-2 Media (Cat# CC-3132) |
| Nucleofector 試劑盒 | 對于4D Nucleofector™ X 單元P2 Primary Cell 4D-Nucleofector™ X Kit (Cat# V4XP-2024)對于Nucleofector™ 2b系統Human Dermal Fibroblast Nucleofector™ Kit (Cat# VPD-1001) |
| 參考資料或方案 | 實驗方案\應用數據\文獻列表：（點擊查看） |
Human CD34+造血干細胞生成IPSC
| 對照細胞 | Human Bone Marrow CD34+ Cells (Cat# 2M-101C)Human Cord Blood CD34+ Cells (Cat# 2C-101) |
| 細胞特異性培養基 | TheraPEAK X-VIVO media |
| Nucleofector 試劑盒 | 對于4D Nucleofector™ X 單元P3 Primary Cell 4D-Nucleofector™ X Kit (Cat# V4XP-3024)對于Nucleofector 2b系統Human CD34+ Cell Nucleofector Kit (Cat# VPA-1003) |
| 參考資料或方案 | 案例研究：Generation of ipsc with cord blood cells with 4D-Nucleofector™ System（點擊查看）實驗方案\應用數據\文獻列表：（點擊查看） |
Human Bone Marrow Mononuclear Cells生成IPSC
| 對照細胞 | Human Bone Marrow Mononuclear Cells (Cat# 2S-101D) |
| 細胞特異性培養基 | TheraPEAK X-VIVO media |
| Nucleofector 試劑盒 | 對于4D Nucleofector X 單元P3 Primary Cell 4D-Nucleofector™ X Kit (Cat# V4XP-3024) |
| 參考資料或方案 | 實驗方案\應用數據\文獻列表：（點擊查看） |
