細胞因子的作用特點及選型和使用注意事項
細胞因子（cytokine，CK）是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產生的低分子量可溶性蛋白質，具有調節固有免疫和適應性免疫、血細胞生成、細胞生長以及損傷組織修復等多種功能。
細胞因子具有以下作用特點：
多向性和靶向性：一種細胞因子可由多種細胞產生，作用于不同的靶細胞。例如，IL-5既可以來源于Th2細胞，也可以來源于肥大細胞，既能活化B細胞增殖，又能促進嗜酸性粒細胞分化、成熟，
即時性：基本不儲存，隨時產生并發揮作用。
局部性：通常以自分泌或者旁分泌的形式作用于周圍細胞。
相互協調：以網絡形式發揮作用，不同細胞因子間相互抑制或促進。
多重調節：發揮的效應與細胞因子濃度、靶細胞類型、其他細胞因子種類以及種屬有關。
常見細胞因子的作用
| 名稱 | 功能 |
| FGF | 堿性成纖維細胞生長因子，bFGF，FGF basic 或 FGF 2 屬于一個大的 FGF 蛋白家族，后者與包括增殖、生長和分化的細胞發育的許多方面有關。FGF-basic 是一種維持胚胎干細胞在培養中保持未分化狀態的關鍵成分。 |
| IL | IL是一類能夠雙向調節免疫系統的細胞因子家族，主要參與免疫細胞的分化和激活。IL可劃分為IL-1細胞因子家族、共γ鏈細胞因子家族、IL-10細胞因子家族、IL-12細胞因子家族等； |
| EGF | 表皮生長因子，是一種有效的促有絲分裂因子，在體內和體外的生長、增殖和各種表皮和上皮組織 和細胞培養中的一些成纖維細胞中起重要作用。EGF 產生的失調與某些癌癥的生長和進展有關。 |
| INF | 干擾素，具有抗病毒、抑制細胞增殖、調節免疫及抗腫瘤作用。 |
由于天然的細胞因子表達量低，分泌具有短時自限性，難以收集提純，一般通過蛋白重組技術獲得，即先用基因克隆或化學合成技術獲得目的基因，連接到適合的表達載體，導入到特定的宿主細胞，利用宿主細胞的遺傳系統，表達出有功能的蛋白質分子。目前常用的有原核、真核、昆蟲、哺乳動物四種表達系統。
| 表達系統 | 特點 |
| 原核 | 產量高、蛋白常為包涵體，無翻譯后修飾，大分子蛋白表達困難 |
| 酵母 | 便于純化，部分翻譯后修飾有時出現蛋白切割問題，糖基化不能滿足要求 |
| 昆蟲 | 表達的大多數蛋白是可溶的，適合毒性蛋白，表達激酶等定位于細胞內的真核蛋白 |
| 哺乳動物 | 完善的翻譯后加工，活性接近天然蛋白，技術要求高，表達量低 |
選擇細胞因子時要注意以下幾個問題：
·細胞因子作為動物免疫抗原進行檢測類抗體的研究，蛋白純度需大于80%；若用于晶體及晶體結構研究，蛋白純度需大于95%；
·若需選擇不同種屬來源的細胞因子，則要判斷兩種種屬的細胞是否有交叉反應活性。一般來說，不同種屬之間蛋白同源性(序列一致性)在80%以上的基本上可確定為有交叉活性。
·根據實驗目的選擇想要的產品時，我們還需要關注一下內毒素的水平，特別是作為細胞添加物使用時。
許多老師在收到凍干粉之后由于保存或者溶解不當造成實驗結果不理想，小愛也遇到過很多老師詢問，產品室溫保存了兩個月還能用嗎？溶解不了怎么回事？細胞因子儲存和溶解其實都很簡單，愛必信的細胞因子說明書中給了明確標注。
1.收到的凍干粉如何處理？
我們收到的凍干蛋白一般不會立即使用，這種情況下可放置-20℃儲存，室溫一般儲存三周左右，具體時間可參照說明書，請老師們妥善保存收到的產品。
2.凍干蛋白一般如何溶解？
敲黑板！！！溶解前，一定要將凍干粉離心收集于離心管底部，不同的凍干蛋白需要的溶解劑不同，比如，abs04698重組人IL4使用中蒸餾水即可溶解， abs04177 IGF-I蛋白需溶解在500mM乙酸中，這是由PH和離子濃度能多種因素決定的，大家一定要仔細閱讀說明書，此外，一定要溶解到說明書推薦的濃度范圍，否則可能會造成不完全溶解或活性減弱。
3.溶解方式
用槍頭輕輕捶打即可，對于相對較難溶解的，可以在低速搖床上靜止兩小時左右，切不可劇烈震蕩。
4.溶解后的蛋白如何儲存呢？
重組蛋白溶液一般可在4-7°C下儲存2-7天。避免反復凍融可將溶液分裝于聚丙烯管中（不會吸附蛋白），在<-20°C下穩定保存3個月左右，適當加入載體蛋白（BSA、HAS、FBS等）可減少管壁對重組蛋白的吸附損耗。
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