無(wú)表面活性劑的植物組織總蛋白提取試劑盒使用說明書
無(wú)表面活性劑的植物組織總蛋白提取試劑盒
描述：
應(yīng)用：
緩沖液配方：非公開
運(yùn)輸與儲(chǔ)存：
重要產(chǎn)品信息
所需附加材料
操作方法：
描述：
無(wú)表面活性劑的植物組織總蛋白提取試劑盒，由優(yōu)化蛋白提取緩沖液和離心管柱及 2.0ml 接收管組成，能夠快速?gòu)闹参锝M織中提取水溶性蛋白。蛋白提取緩沖液中不含任何表面活性劑和有機(jī)溶劑。使用了離
心管柱技術(shù)，提取的樣品體積可以從 50ul-500ul。從植物組織（葉片，種子，軟莖等）中提取無(wú)表面活性劑的總蛋白僅需不到 8 分鐘的時(shí)間，得率可達(dá) 1-5mg/ml。
應(yīng)用：
可應(yīng)用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究(LC/MS)，IP， ELISA ，2D，等電聚焦，SDS-PAGE, immunoblottings 及其他應(yīng)用。
緩沖液配方：非公開
試劑盒組分
50T： 4T：
1. 25ml DF-裂解緩沖液 1. 1.5ml DF-裂解緩沖液
2. 50 個(gè)離心管柱 2. 4 個(gè)離心管柱
3. 50 個(gè)收集管 3. 4 個(gè)收集管
4. 2 根塑料研磨棒 4. 1 根塑料研磨棒
運(yùn)輸與儲(chǔ)存：
常溫運(yùn)輸，4℃儲(chǔ)存。
重要產(chǎn)品信息
Minute TM 無(wú)表面活性劑的植物組織總蛋白提取試劑盒可快速提取水溶性蛋白，蛋白酶抑制劑不是必須加入，但是如果下游實(shí)驗(yàn)需要較長(zhǎng)時(shí)間或者蛋白提取后保存較長(zhǎng)時(shí)間，建議在蛋白提取緩沖液中添加蛋白酶抑制劑。
研究蛋白磷酸化，磷酸酶抑制劑應(yīng)在使用前加入裂解緩沖液中。推薦使用 BCA 法測(cè)定蛋白濃度。
所需附加材料
臺(tái)式離心機(jī)
BCA 蛋白定量試劑盒
操作方法：
以下步驟是從 50-100mg 植物組織（新鮮的葉片，種子，軟莖和根）中提取。干燥的種子樣品需要在水中浸泡 2 天。如果起始量較大或者較小，需按比例調(diào)整相應(yīng)裂解液的用量。
1.將蛋白提取緩沖液和離心管柱及接收管套管放在冰上預(yù)冷。
2.植物葉片樣品，取 50-100mg 新鮮組織，剪碎，卷起或者折疊減小體積放入離心管柱套管中，用 200ul 或 1ml 吸頭反復(fù)擠壓樣品 50-60 次減小體積（樣品小于 50mg 此步驟可忽略），接轉(zhuǎn)第3 步驟。種子樣品（新鮮或冷凍）和軟莖，用鋒利的刀片將其切成小片放入離心管柱套管中，用塑料研磨棒反復(fù)向下按壓扭轉(zhuǎn)研磨 50- 60 次，接轉(zhuǎn)第 3 步驟。
3.加入 50-100ul DF-裂解緩沖液到離心管柱中（注意： 緩沖液使用前請(qǐng)用力搖勻，使沉淀物重懸），用塑料研磨棒反復(fù)向下按壓扭轉(zhuǎn)研磨 50-60 次（注意：塑料研磨棒可以重復(fù)使用，用蒸餾水徹底沖洗干凈，用紙巾擦干）。
4.蓋上蓋子，冰上孵育 5 分鐘。離心機(jī)最高速離心 2-5 分鐘取出。棄去離心管柱，將接收管中蛋白溶液轉(zhuǎn)入新的離心管中保存，無(wú)表明活性劑的蛋白提取完成可應(yīng)用于下游實(shí)驗(yàn)。
請(qǐng)注意：部分未完全裂解的組織不會(huì)影響樣品質(zhì)量。
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