曠場實驗（Open Field Test, OFT）是一種常用的小鼠行為實驗方法，通過觀察小鼠在未知環境中的活動情況以評估藥物的抗焦慮效果。

一、實驗流程

在曠場實驗中，評估藥物的抗焦慮作用需要遵循一系列嚴謹的實驗步驟。

1. 實驗設計：首先將小鼠分為不同實驗組，包括對照組、焦慮抑郁模型組和藥物治療組。對照組使用正常小鼠，而模型組和治療組則使用焦慮抑郁小鼠模型。確保各組小鼠數量足夠以進行統計分析。

2. 制備焦慮抑郁模型：采用適當方法（如慢性應激、行為學刺激等）誘導小鼠形成焦慮抑郁模型。

3. 藥物處理：根據藥物給藥方式（如口服、腹腔注射等），按照一定劑量和給藥時間給治療組的小鼠進行藥物處理。請注意，對照組和模型組也應接受相應的安慰劑處理。

4. 實驗設備與條件：準備一個正方體曠場箱，通常邊長為50厘米，高40cm,并在場地內劃分中心區域和邊緣區域。確保場地清潔、光線適中且噪音水平低。同時，準備攝像頭等設備用于記錄實驗過程。

   
   曠場實驗箱，型號XR-XZ301，上海欣軟

5. 進行開放場實驗：將小鼠置于場地中心，開始記錄其在特定時間（通常為5-10分鐘）內的行為表現。記錄總活動量、中心區停留時間、邊緣區停留時間等關鍵指標。使用攝像頭錄制視頻，以便后續數據提取。

           

6. 數據提取與整理：觀察視頻，并手動或自動統計各項行為參數。整理成表格，按照對照組、模型組和治療組分類。

7. 描述性統計分析：對每個行為參數計算平均值、標準差和其他描述性統計量，以直觀展示數據分布情況。

8. 推論性統計分析：利用t檢驗、方差分析或非參數檢驗等方法比較各組之間的行為參數差異。如果治療組與模型組相比有顯著改善，可能說明藥物具有抗焦慮作用。

9. 相關性分析：計算各行為指標間的相關系數，了解它們之間的關聯關系。這有助于從多個角度評估藥物的抗焦慮效果。

10. 繪制圖像：將統計結果以表格、柱狀圖、散點圖等形式展示，便于觀察和解讀。

     
    

11. 結果解釋：結合實驗設計、藥物作用機制和已有研究成果，對涉及藥物抗焦慮效果的行為指標進行合理解釋。同時，注意探討實驗中可能存在的偏差、局限性和潛在因素。

12. 結合其他實驗方法：為了提高研究的準確性和可靠性，最好與其他行為實驗方法（如高架十字迷宮實驗、明暗箱實驗等）結合使用。這可以從多個方面驗證藥物的抗焦慮作用。

整個實驗流程需要遵循嚴謹的操作規范，并在每個步驟都保證準確性。此外，在數據分析階段，要根據實驗目的和分析需求選擇合適的統計方法。
 

二、實驗指標

以下是一些關鍵指標及其解釋，它們可以從不同維度評估藥物的抗焦慮作用：

總活動量：總活動量指的是小鼠在實驗期間在開放場地內所走過的總距離。這是衡量藥物對小鼠活動水平影響的基本參數。若藥物能夠增加小鼠的總活動量，可能說明藥物具有降低焦慮水平的作用。

移動速度：移動速度是指小鼠在場地中行走的平均速度。評估這一參數可以幫助了解藥物對小鼠自主活動能力的影響。

中心區停留時間：焦慮小鼠傾向于在邊緣區域活動，而避免進入開放的中心區域。因此，中心區停留時間（即小鼠在中心區域的活動時間）被認為是反映藥物抗焦慮作用的一個重要指標。如果藥物能增加小鼠在中心區的停留時間，說明藥物可能具有抗焦慮作用。

中心區進入次數：類似于中心區停留時間，中心區進入次數（即小鼠進入中心區域的次數）也是評估藥物抗焦慮作用的一個重要參數。藥物是否能增加小鼠進入中心區的次數，可以反映其對小鼠勇敢程度的影響。

邊緣區停留時間和活動比例：邊緣區停留時間是指小鼠在場地邊緣區域的活動時間。焦慮小鼠通常在邊緣區活動較多，因此這一參數可以用來衡量藥物對小鼠安全感的影響。同樣，邊緣區活動比例（即小鼠在邊緣區活動時間與總活動時間的比值）也可以用于評估藥物的抗焦慮作用。

支撐性站立與非支撐性站立次數：支撐性站立與非支撐性站立次數是指小鼠在實驗過程中豎立的次數。這一參數可以用來評估藥物對小鼠好奇心和探索行為的影響，以及對焦慮水平的調節作用。

自發性行為：自發性行為包括梳理、爬行、抓撓等。觀察和統計這些自發性行為的次數和持續時間，可以幫助了解藥物對小鼠自我安慰行為的影響，從而評估藥物的抗焦慮效果。

排泄物數量：在實驗過程中，小鼠的排泄物數量也可以作為評估藥物抗焦慮作用的一個輔助指標。焦慮狀態下的小鼠可能會增加排泄物數量，因此觀察藥物是否能夠減少小鼠的排泄物數量，有助于了解其抗焦慮作用。

通過對上述各項指標的綜合分析，研究人員可以從多個方面評估藥物的抗焦慮效果。需要注意的是，在進行數據分析時，要結合實驗設計和實際情況，選擇合適的統計方法。開放場實驗主要評估藥物的抗焦慮作用，并不特異性地反映抗抑郁效果。可以結合其他實驗方法，如強迫游泳實驗（Forced Swimming Test, FST）和懸尾實驗（Tail Suspension Test, TST），更全面地評估藥物的抗抑郁作用。

如果您也對動物實驗感興趣，歡迎關注和推薦關注微信公眾號：欣軟言行，也可以添加手機/微信：18121054991，專注于動物神經科學與行為學的實驗知識的方法傳播與分享交流，您可以推薦給您身邊的朋友、同學以及老師，我們會定期更新您需要的相關實驗方法的視頻和文章，希望能對大家帶來幫助