利用熒光染料識別細胞結構成分和監(jiān)測細胞毒性或細胞對生長信號的反應是很好的。關于細胞的分析,可以從多個角度切入,如細胞活性、亞細胞器的追蹤、細胞凋亡與自噬的檢測、細胞耐藥性、細胞氧化性壓力、細胞浦西追蹤、活細胞衰老檢測、細胞內蛋白聚集檢測、細胞周期檢測等。針對上述細胞研究領域,都有相應的檢測手段和方法去實現(xiàn),接下來本文就針對不同的角度來給大家做介紹:
十一種常見細胞分析方法及相關檢測試劑
1.細胞死亡與自噬
經(jīng)歷凋亡和壞死過程的細胞會包括健康細胞,早期凋亡細胞,晚期凋亡細胞和壞死細胞。可以通過對不同階段的細胞染不同的顏色來分辨該細胞系經(jīng)歷到了哪個階段。推薦使用APOPTOSIS/NECROSIS DETECTION KIT (GFP-CERTIFIED®) (ENZ-51002)這個試劑盒來進行細胞凋亡和壞死過程的監(jiān)測。如果是想監(jiān)測活細胞中自噬的情況,可以使用CYTO-ID® AUTOPHAGY DETECTION KIT(ENZ-51031)這個試劑盒
2.細胞氧化性壓力
氧化性壓力被定義為活性氧(ROS)的相對過剩,氧化性壓力相關的染料包括監(jiān)測活性氧積累和線粒體功能受損的探針,這兩者都與衰老、癌癥、糖尿病、心血管疾病和神經(jīng)變性的病理有關。
在活細胞中對總活性氧含量及超氧化的定量分析可以通過ROS-ID® TOTAL ROS/SUPEROXIDE DETECTIONKIT(ENZ-51010)試劑盒完成。其原理是ROS的存在通過可普遍檢測的ROS染料的熒光探針實現(xiàn)(綠色),而超氧化分析則通過SO-特異性的熒光染料來實現(xiàn)(黃色)。
對于線粒體功能受損情況的檢測,可以通過MITO-ID® MEMBRANE POTENTIAL CYTOTOXICITY KIT – (ENZ-51019)來實現(xiàn)。該試劑盒的檢測功能是通過雙放射性染料來實現(xiàn)的,綠色熒光代表單體結構,而橙色熒光則代表聚集體結構,橙色熒光的下降及證明了MMP(線粒體細胞膜電位)的下降。
3.鈣離子動員反應
細胞內的鈣離子是一個很常見“第二信使”,即胞內信號分子,負責細胞內的信號轉導,進而影響到其他的細胞過程,如細胞分化、遷移、增殖、存活及凋亡。細胞內鈣離子通常會用做GPCR激活程度的初步指標。
使用FLUOFORTE® CALCIUM ASSAY KITS (ENZ-51016 / ENZ-51017)試劑盒可以通過熒光染色的方法對鈣離子動員反應進行檢測,其染色探針有超強的細胞穿透性和留存性。
4.亞細胞結構染色與活細胞分析
使用細胞器選擇性染色劑或染料讓細胞器顯色是細胞和組織熒光成像的關鍵,多色的細胞器特異性染料可用于共定位研究和監(jiān)測結構變化對化學或環(huán)境脅迫的反應。