久热久草在线_一一高清视频在线观看_在线观看91av_久草免费在线观看视频_国产精品午夜无码A体验区_国产一级高清

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 快速流式細胞儀在細胞凋亡檢測中的應用

快速流式細胞儀在細胞凋亡檢測中的應用

瀏覽次數:818 發布日期:2023-6-26  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
細胞凋亡(Apoptosis)是一個由多基因嚴格控制,高度調節的細胞死亡過程,是細胞程序性死亡(Programmed cell death)的一種,是組織內細胞狀態維持的主要生物學機制。作為一種基本的生物學現象,細胞凋亡不會觸發免疫反應,它是為了更好的適應生存環境而主動爭取的一種有序的死亡過程,在生物體的進化、內環境的穩定以及多個系統的發育中起著重要作用。凋亡過程的紊亂,可能與許多疾病的發生有關。研究者對細胞凋亡進行研究,對疾病機制的闡明,疾病療法的探索以及治療藥物的研究方面都有著重要意義。

細胞凋亡的變化是多階段的,包括一系列的細胞形態學和生物化學的改變。檢測細胞凋亡的方法也有很多,如顯微鏡下的形態學觀察,DNA的瓊脂糖凝膠電泳等。其中流式細胞術是很常用的一種手段。而流式細胞術檢測細胞凋亡的方法也有很多,其中又以Annexin V/PI雙染色法最為重要。

Annexin V/PI雙染色法

細胞凋亡時,位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)翻轉至細胞膜外側。Annexin V(膜聯蛋白-V)是一種對PS高度親和的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能特異性識別凋亡細胞表面的PS。所以可以用FITC偶聯Annexin V作為探針,鑒別凋亡細胞和活細胞(如圖1左)。
圖1. Annexin V/PI染色

壞死細胞的PS也會由細胞膜內側翻轉到細胞膜外側,Annexin V也能與之結合,所以Annexin V無法區分壞死細胞和凋亡細胞。PI作為一種核酸染料,能夠與細胞內的DNA結合,但它不能通過完整的細胞膜,故PI可以標記壞死細胞(如圖1右),從而將活細胞和壞死細胞區分開來。將Annexin V和PI同時使用,利用流式細胞儀就可以明確區分活細胞、凋亡細胞和壞死細胞,并可以定量分析各自所占比例。

Moxi GO II快速流式細胞儀

傳統流式細胞儀設備體積大,構造復雜,價格昂貴,通常作為平臺產品儀器使用。儀器操作復雜,維護繁瑣,對操作者要求較高,往往需要進行專業操作培訓,具備專業知識技術才能使用。同時平臺產品排隊周期長,限制了科研人員的使用。


圖2. Mxoi GO II
 
針對這種情況,美國Orflo Technologies公司將行業公認的細胞計數和大小測量金標準——庫爾特原理(Coulter Principle)與熒光流式檢測技術相結合,推出的新一代快速流式細胞儀——Moxi GO II,滿足了研究人員對細胞凋亡檢測的需求。

應用展示

喜樹堿是一種細胞凋亡誘導劑,Jurkat細胞在20mM喜樹堿中預處理4個小時,然后與50%熱殺細胞(壞死細胞)混合,用Moxi GO II進行細胞凋亡檢測,其輸出結果如圖2所示,散點圖中細胞分群清晰。除散點圖外,Moxi GO II還以表格和柱狀圖展示象限門控數據,為用戶進行數據解析提供了極大的便利。
 

圖2. 細胞凋亡結果輸出

Moxi GO II系統還內置對比功能,可快速疊加比較兩種檢測結果。如圖3所示,用喜樹堿處理Jurkat細胞,分別處理0小時(t=0)和6.5小時(t=6.5)后進行Annexin V-FITC熒光檢測,并將兩次檢測的散點圖結果及熒光直方圖結果疊加比較。


圖3. 兩種檢測結果對比輸出
 
圖3直觀的顯示出經過6.5小時處理后,Annexin V+的細胞百分比顯著增加,細胞平均大小相應減少。這是細胞凋亡的顯著特征。通過庫爾特原理對細胞進行大小測定,這種對細胞大小變化的區分在傳統流式細胞儀上是無法實現的。

近日,武漢某生物技術服務公司將293T細胞進行藥物處理后,分別用Moxi GO II系統和傳統臺式流式細胞儀CytoFLEX S對細胞凋亡情況進行檢測評估(圖4和圖5),經對比后發現,兩個系統由于上樣體系、檢測原理等差異,散點圖展示有所不同,但數據分析結果一致(紅色框選):細胞狀態良好,與對照組相比,實驗組凋亡率并無明顯差異。
 

圖4

圖5

客戶評價:Moxi GO II系統對細胞分群明確,561nm/LP通道補償調節合適。在采用646nm/LP通道進行PI檢測時,無需進行補償調節,檢測結果與傳統流式細胞儀基本一致。整個儀器預設檢測應用,直接調用即可,操作非常簡單,散點圖及相應數據結果在幾秒內即可得出,無需再次軟件分析,使用便利,適合單個實驗室使用。

Moxi GO II采用庫爾特原理進行細胞計數和粒徑測量,同時采用488nm激光光源,結合兩個PMT通道,525/45nm通道和561nm/LP(或者646nm/LP,可根據需要更換),進行細胞活率、細胞凋亡、轉染效率、活性氧簇、線粒體膜電位等常規流式檢測。
PMT 通道 兼容染料(包括但不限于)
525/45nm通道 Annexin V-FITC,Alexa Fluor@ 488,BB515,GFP,Calcein等
561nm/LP通道  PE,PI,RFP等
646nm/LP通道 PI,7-AAD等

儀器設計小巧輕便,無需預熱,開機即用,預設程序,觸屏操控,運行后10秒即可給出測試結果,使用后也無需清潔維護。Moxi GO II功能多樣,簡單易用,為廣大研究者提供了一個非常實用的檢測工具。通過Moxi GO II,無論是經驗豐富的流式專家,還是初試身手的實驗小白,都可以輕松完成實驗。

美國Orflo Technologies公司是一家非常專業的細胞分析儀器研發和制造企業,擁有多項專利技術,產品以庫爾特原理的高精細胞計數儀和超快流式細胞儀為主。作為中國地區獨家代理,環亞生物科技有限公司全權負責Orflo Technologies產品在中國地區的推廣、銷售,為廣大用戶提供專業的技術咨詢和產品服務。

環亞生物,生命科學產品全國性代理商,不斷把國外頂級的創新產品引入中國。環亞生物具備完善的公司運營、產品管理、營銷、售前技術支持和售后維修體系。

▼更多 Orflo產品 詳情,請聯系我們▼
環亞生物科技有限公司
地址:上海市閔行區友東路358號閔欣大廈1號樓701/703/705室
電話:021-54583565
郵箱:info@apgbio.com
網址:www.apgbio.com
▼更多精彩內容,請掃碼關注我們▼
發布者:環亞生物科技有限公司
聯系電話:021 54583565
E-mail:info@apgbio.com

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 久久久久国产一区二区三区不卡 | 国产口爆吞精视频普通话 | аⅴ中文天堂最新版在线 | 国产成人精品午夜片在线观看 | 欧美乱码一区二区三区 | 99久久九九国产精品国产免费 | 亚洲va欧美va人人爽 | 东北少妇不戴套对白第一次 | 黄色a大片 | 久久久亚洲福利精品午夜 | 成人综合网久久久久久 | 一区二区三区四区五区在线 | 色网站在线观看视频 | 国产3344在线观看视频 | 国产精品男女猛烈高潮激情 | 国产乱淫av片免费网站 | 水野优香在线一区二区88 | 日韩精品无码免费专区午夜 | 国产精品一级毛片无码老人 | 一区毛片| 黄色片久久| 国产精品久久免费 | 天堂社区一区二区三区 | 国产精品麻豆a啊在线观看 美女一级毛片免费视频 | 国产激情一区二区三区成人免费 | 九色视频官网 | 91热爆| 日本最新一区二区 | 久久爱www.| av黄色免费观看 | 亚洲无吗视频在线 | 国产熟女精品视 | 一区二区大片 | 日本道色综合久久影院 | 国产精品久久久久久久久久久久久 | 国产精品s色 | 国产高潮流白浆免费观看 | 国内国内在线自偷第68页 | 拍国产真实乱人偷精品 | 免费无码国产V片在线观看 亚洲国产精品自拍 | 成人久久18免费 |