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流動下條件下活細胞實時成像設置詳解

瀏覽次數:496 發布日期:2023-2-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

活細胞成像是在流動條件下細胞培養分析的一種可能的體現。

根據實驗的持續時間和溫度要求,有幾種可能的設置具有不同的優點和缺點,本說明中顯示和討論了這些設置。

1. 無需培養箱即可設置

設備:

  • 放置在顯微鏡旁邊的 ibidi 泵系統

  • 倒置顯微鏡

圖片

優點:

  • 沿灌流管的均勻介質溫度。

  • 氣泡產生的可能性低。

  • 在較長時間內非常穩定。

  • 成本極低且易于操作。

缺點:

  • 細胞處于室溫。

  • 沒有向細胞培養基供應 CO2(碳酸鹽緩沖液不起作用)。

適合:

  • 可以在室溫下培養的細胞或生物。

  • 沒有細胞的實驗。

  • 如果細胞耐受溫度下降,則可能用于短期成像。



2. 設置載物臺頂部培養裝置

設備

  • 放置在顯微鏡旁邊的 ibidi 泵系統

  • ibidi 載物臺頂部培養系統(氣體混合器和溫度控制器)控制舞臺頂部培養室的溫度、二氧化碳和濕度。

  • 倒置顯微鏡

圖片

優點:

  • 細胞處于適宜的溫度。

  • 成本低。

缺點:

  • 沿灌流管的溫度梯度可能有產生氣泡。

  • 低 CO2 輸入到培養基中。孵育室(提供 CO2)中的暴露時間非常短。

  • 長期不穩定。

適合:

  • 短期實驗。



3. 設置載物臺頂部培養裝置和臺式培養箱

設備:

  • ibidi 泵系統

  • 臺式培養箱

  • ibidi 載物臺頂部培養系統(氣體混合器和溫度控制器)控制載物臺頂部培養室的溫度、二氧化碳和濕度。

  • 倒置顯微鏡

圖片

優點:

  • 細胞可以保持在 37°C,因為培養基的冷卻只發生在從培養箱到載物臺頂部培養的管道中。

  • CO2 供應提供給儲存器培養基和通道玻片。為獲得最佳 CO2 供應,泵回端口連接到小型培養箱的氣體。

  • 中長期穩定。

缺點:

  • 沿灌注管的溫度梯度可能會在長時間內會產生氣泡。

適合:

  • 細胞需要控溫的長時間培養。

  • 更長的時間段,帶有額外的氣泡捕集器

 

 

 

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