近期，阿斯利康宣布已經成功收購了專注于開發T細胞受體療法TCR-T的 Neogene Therapeutics 公司，這無疑給已經如火如荼的T細胞療法領域又助力一把。我國CAR-T細胞療法的發展也是高歌猛進，國際頂級期刊《柳葉刀》上刊登的文章更是直言CAR-T細胞治療，將在中國迅速崛起，擁有光明的未來。所以這些療法的核心步驟之一——T細胞的活化以及放大，自然就是目前研究的熱點。

作為第一個被克隆的細胞白介素因子，IL-2是免疫治療里的元老級成員，在T細胞的活化擴增的過程中都發揮著巨大的作用。但是隨著T細胞療法研究的深入，科學家發現細胞因子家族中的另一個組合IL-7和IL-15似乎有著不同于IL-2的誘導能力，探尋二者之間的能力差異可以幫助我們在后續的實驗和操作中優化對T細胞的改造，從源頭改善治療效果并減少不良反應。

血液學方面的頂刊Blood刊登了相關研究，為了對比IL-2和IL-7/IL-15的組合對CAR-T細胞擴增以及抗腫瘤活性的影響，研究者從免疫治療中炙手可熱的靶點人CD19抗原入手。CD19是B細胞最可靠的表面生物標志物之一，并且與B細胞的活化、信號轉導、及生長調節密切相關【1】。科研組選取了28例復發/難治性B細胞惡性腫瘤患者的組織，分別使用IL-2和IL-7/IL-15在體外進行誘導。

Fig1. 檢測不同培養組的T細胞增殖能力以及效應功能

從流式細胞術等實驗結果，我們可以看出相較于IL-2培養組，IL-7 / IL-15組培養的T細胞表現出更強的增殖能力以及更好的效應功能。這與培養物中CD8(+)CD45RA(+)CCR7(+)亞群密切相關，這種表型最接近 "T記憶干細胞"，保留CD45RA和CCR7表達，通過這種模式增強了CAR-T細胞的活性和抗腫瘤作用。為了進一步證明，實驗組選取了小鼠進行體內實驗，得到了與體外實驗類似的結果。IL-2培養組的CAR-T細胞半衰期短，并在輸注后第3天消失，與此形成鮮明對比的是，IL-7 / IL-15組擴增的CAR-T細胞在輸注后14天仍然可檢測到，并且積聚在腫瘤細胞躲藏的“老巢”——脊髓中，發揮更好的殺傷作用【2】。
 

Fig2. 檢測不同培養組的T細胞在小鼠體內持久性和抗腫瘤活性

T細胞療法的另一員大將TCR-T療法也在IL-2和IL-7 / IL-15培養方面有了新的突破，TCR工程化T細胞在體內的抗腫瘤功效在很大程度上取決于分化程度較低的亞群，例如具有更大擴展性和長期持久性的幼稚樣T細胞（TN）表型的T細胞。這就需要我們在活化誘導階段選擇適合的細胞因子，基于這個需求科學家選取了紐約食管鱗狀細胞癌-1（NY-ESO-1）來比較補充IL-2或IL-7 / IL-15對T細胞活化誘導的影響。重點是確定不同細胞因子混合物對NY-ESO-1特異性T細胞的活力、擴增和T細胞亞群以及效應器官功能的影響。
 

*第一組測試
 

*第二組測試
 

*第三組測試

Fig3. 檢測不同培養組T細胞活力、擴增和轉導效率，特異性T細胞亞群的分布以及耗竭和歸巢標記物
 

從檢測的結果我們可以發現在IL-2存在下培養產生的CD8+細胞毒性T細胞顯著增多，而CD4+Th細胞顯著減少【3】，綜合分析圖譜我們可以得出結論，IL-7/IL-15增強了分化程度較低的NY-ESO-1特異性T細胞的子集。這里我們可以對比在CD19特異性CAR-T細胞中得到的結論，使用 IL-7/IL-15培養的CAR-T細胞，相比于在添加IL-2的培養基下生成的CAR-T細胞來說，對腫瘤細胞的裂解率顯著提高。這說明對于T細胞培養，我們需要根據研究的具體目的來進行劃分，這打破了多年來IL-2金標準的固有印象。

不久前研究公司Adaptimmune Therapeutics宣布，已經向美國FDA啟動關于TCR-T細胞療法Afami-cel的滾動上市申請，用于治療晚期滑膜肉瘤，有望成為首款針對實體瘤的TCR-T細胞療法。這是T細胞療法的又一個里程碑事件。系統的研究IL-2和IL-7 / IL-15對T細胞的影響，對于T細胞療法行業乃至于整個免疫療法的發展都具有重要的意義，作為免疫療法的主要工具，我們相信在未來T細胞會為我們解決更多困擾人類的頑疾，保護人類的生命健康。

同立海源生物研發生產的GMP級IL-2、IL-7、IL-15可滿足T細胞藥物開發、驗證、申報等不同階段的需求。

GMP級產品放行標準（IL-15為例）

重組人 IL-2蛋白（Cat.No.GMP-TL777）活性測試數據

02 IL-7
 

重組人IL-7蛋白（Cat.No.GMP-TL506），可刺激PBMC增殖，比活性＞1×10⁷IU/mg(參考標準NIBSC代碼：90/530)

03 IL-15
 

重組人IL-15蛋白（Cat.No.GMP-TL202）可刺激小鼠T淋巴細胞CTLL-2增殖，比活性＞5×10⁶IU/mg（NIBSC代碼：95/554）

參考文獻：
【1】 Ying Z, Huang XF, Xiang X, Liu Y, Kang X, Song Y, Guo X, Liu H, Ding N, Zhang T, Duan P, Lin Y, Zheng W, Wang X, Lin N, Tu M, Xie Y, Zhang C, Liu W, Deng L, Gao S, Ping L, Wang X, Zhou N, Zhang J, Wang Y, Lin S, Mamuti M, Yu X, Fang L, Wang S, Song H, Wang G, Jones L, Zhu J, Chen SY. A safe and potent anti-CD19 CAR T cell therapy. Nat Med. 2019 Jun;25(6):947-953.

【2】 Xu Y, Zhang M, Ramos CA, Durett A, Liu E, Dakhova O, Liu H, Creighton CJ, Gee AP, Heslop HE, Rooney CM, Savoldo B, Dotti G. Closely related T-memory stem cells correlate with in vivo expansion of CAR.CD19-T cells and are preserved by IL-7 and IL-15. Blood. 2014 Jun 12;123(24):3750-9.

【3】  Gong W, Hoffmann JM, Stock S, Wang L, Liu Y, Schubert ML, Neuber B, Hückelhoven-Krauss A, Gern U, Schmitt A, Müller-Tidow C, Shiku H, Schmitt M, Sellner L. Comparison of IL-2 vs IL-7/IL-15 for the generation of NY-ESO-1-specific T cells. Cancer Immunol Immunother. 2019 Jul;68(7):1195-1209.